目的 建立經(jīng)濟(jì)、簡便的同時(shí)分離培養(yǎng)肝星狀細(xì)胞及枯否細(xì)胞的方法,為進(jìn)一步深入研究肝纖維化的發(fā)生機(jī)制及抗肝纖維化藥物的療效評價(jià)做準(zhǔn)備。 方法 應(yīng)用膠原酶和蛋白酶對大鼠肝臟進(jìn)行原位灌流、消化,獲得大鼠肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,經(jīng)18%(W/V)的Nycodenz密度梯度離心,一步分離肝星狀細(xì)胞及枯否細(xì)胞。肝星狀細(xì)胞處在界面,而枯否細(xì)胞處在界面下。臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力。Desmin免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定肝星狀細(xì)胞。溶菌酶免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定枯否氏細(xì)胞。 結(jié)果 該方法分離的肝星狀細(xì)胞和枯否氏細(xì)胞的純度達(dá)95%左右。肝星狀細(xì)胞得率3.0±0.5×10~7/肝,枯否氏細(xì)胞得率4.0±0.5×10~6/肝。 結(jié)論 應(yīng)用Nycodenz一步密度梯度離心法可以很好的同時(shí)分離肝星狀細(xì)胞和枯否氏細(xì)胞。
【學(xué)位單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R575.2
【部分圖文】：

門靜脈插管，肝臟灌流

剛分離出來的大鼠肝星狀細(xì)胞

培養(yǎng)10天的大鼠肝星狀細(xì)胞，細(xì)胞呈梭形鋪滿單層

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 葉紅軍,高洪文,劉少田,宋云芳,赫國志;丹參及干擾素對成纖維細(xì)胞分泌和形態(tài)學(xué)的影響[J];臨床肝膽病雜志;1997年03期

2 黃賢樟,佘世鋒,汪幗斌;不同劑量丹參注射液抗肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2001年04期

本文編號：2808391