【摘要】：目的 探討抵抗素對(duì)非酒精性脂肪肝病（non-alcoholic fatty liver diseaseNAFLD)肝纖維化的影響及可能的體內(nèi)外作用機(jī)制。 方法 應(yīng)用高脂飼料喂養(yǎng)30只wistar大鼠建立NAFLD肝纖維化體內(nèi)模型，隨機(jī)分成對(duì)照組和模型組，各15只，分別喂以普通飼料和高脂飼料，分別在15、18、21周各處死10只（對(duì)照組5只，模型組5只）。蘇木素-伊紅染色（HE染色）、膠原纖維染色（VG染色）觀察肝組織纖維化的情況，電鏡觀察HSC（肝星狀細(xì)胞）的活化以及肝組織纖維化的情況；測(cè)定大鼠血清纖維化指標(biāo)Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、透明質(zhì)酸（HA）、Ⅳ型膠原（CⅣ)、層粘連蛋白（LN)水平，采用半定量RT-PCR及Western blot法檢測(cè)大鼠肝組織抵抗素表達(dá)，觀察抵抗素和肝纖維化之間的變化趨勢(shì)。選用重組抵抗素作用于HSC-T6建立NAFLD肝纖維化體外模型。用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)HSC-T6，細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶75％后傳代，待貼壁后分4組：A組（1640培養(yǎng)液）；B,C,D組分別于1640培養(yǎng)液中加入不同濃度抵抗素25ug/L，50ug/L，和100ug/L，各組細(xì)胞分別培養(yǎng)72小時(shí)后，檢測(cè)細(xì)胞上清液中Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、透明質(zhì)酸（HA）、Ⅳ型膠原（CⅣ)、層粘連蛋白（LN)水平；采用半定量RT-PCR法檢測(cè)HSC-T6中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-1（TGF-β1)mRNA及腫瘤壞死因子α（TNF-α)mRNA表達(dá)水平。分析抵抗素對(duì)HSC的作用機(jī)制。 結(jié)果 隨著高脂飼料喂養(yǎng)大鼠時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠肝組織出現(xiàn)纖維化變化，大鼠血清中肝纖維化指標(biāo)Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、透明質(zhì)酸（HA）、Ⅳ型膠原（CⅣ)、層粘連蛋白（LN)水平逐漸升高，表明纖維化程度逐漸加重；大鼠肝組織內(nèi)HSC活化，抵抗素表達(dá)逐漸增加。隨著抵抗素濃度的增加， HSC-T6上清中纖維化指標(biāo)Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、透明質(zhì)酸（HA）、Ⅳ型膠原（CⅣ)、層粘連蛋白（LN)水平逐漸升高，表明纖維化程度逐漸加重；細(xì)胞中TGF-β1mRNA及TNF-α mRNA表達(dá)增加。與對(duì)照組比較，各指標(biāo)差異均有顯著性（p值＜0.05或0.01）。 結(jié)論 動(dòng)物模型中，抵抗素的表達(dá)增加，大鼠肝組織HSC活化，肝纖維化程度加重，大鼠血清中肝纖維化指標(biāo)水平逐漸升高，但對(duì)抵抗素與纖維化的因果關(guān)系不甚清楚，所以建立體外細(xì)胞模型加以研究，研究表明抵抗素促使肝纖維化指標(biāo)水平逐漸升高，TNF-α、TGF-β1mRNA表達(dá)增加，提示抵抗素可能通過作用于HSC,使其產(chǎn)生TNF-α、TGF-β1等炎癥因子，誘導(dǎo)NAFLD肝纖維的發(fā)生發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R575.2
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文(圖1A、1B、1C，2A、2C)。電鏡觀察見肝細(xì)胞胞漿中見較多脂質(zhì)空泡。狄氏內(nèi)膠原原纖維增生，HSC胞漿內(nèi)脂質(zhì)空泡明顯減少甚至消失（圖2B、2C）。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文(圖1A、1B、1C，2A、2C)。電鏡觀察見肝細(xì)胞胞漿中見較多脂質(zhì)空泡。狄氏內(nèi)膠原原纖維增生，HSC胞漿內(nèi)脂質(zhì)空泡明顯減少甚至消失（圖2B、2C）。

21周模型組肝臟HE200×Fig1-CTheliverofmodelgroupat21Week

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 王倩;管小琴;;大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改進(jìn)[J];世界華人消化雜志;2007年11期

本文編號(hào)：2799659