發(fā)布時(shí)間：2020-08-19 21:08

【摘要】： 目的對檢測乙型肝炎病毒(HBV)YMDD變異的3種方法進(jìn)行靈敏度和特異性比較,并結(jié)合患者治療前HBV DNA載量、ALT水平及免疫標(biāo)志物和YMDD變異后HBVDNA載量等臨床信息進(jìn)行結(jié)果分析。方法分別以熒光定量PCR(FQ-PCR)、通用模板信號擴(kuò)增(UT-PCR)和聚合酶鏈反應(yīng)微板核酸雜交-酶聯(lián)免疫吸附法(PCRmnh-ELISA),對拉米夫定治療過程中血清出現(xiàn)HBV DNA由陰轉(zhuǎn)陽的52例慢性乙型肝炎患者,進(jìn)行HBV YMDD變異檢測,比較3種方法的敏感性,并對3種方法檢測結(jié)果不一致的標(biāo)本進(jìn)行測序,比較它們的特異性。同時(shí)將治療前HBV DNA載量、ALT水平、免疫標(biāo)志物及變異后HBV DNA載量與YMDD變異結(jié)果相結(jié)合進(jìn)行綜合分析。結(jié)果FQ-PCR、UT-PCR和PCRmnh-ELISA對YMDD變異的檢出率分別為:53.85%、48.08%、73.07%,經(jīng)兩兩比較,FQ-PCR和UT-PCR均與PCRmnh-ELISA有明顯差異(P＜0.05),而FQ-PCR與UT-PCR無顯著性差異(P＞0.1)。將檢測結(jié)果不一致的17例標(biāo)本進(jìn)行測序,FQ-PCR、UT-PCR、PCRmnh-ELISA與測序結(jié)果的符合率分別為94.1%、70.6%、29.4%,三者之間差異有顯著性(P＜0.005)。52例研究患者中,28例發(fā)生了YMDD變異,其中YIDD 17例,YVDD 7例,YIDD和YVDD混合變異4例。發(fā)生YIDD變異的患者較治療前HBV DNA水平顯著降低(P＜0.05),發(fā)生YVDD變異的患者較治療前HBV DNA水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。YVDD變異后的HBVDNA水平與YIDD變異后HBV DNA水平無顯著性差異(P＞0.05)。YMDD變異組治療前的ALT基礎(chǔ)水平高于YMDD野生組治療前水平(P＜0.01),治療前HBV DNA水平及HBeAg陽性率在變異組和野生組中無差別(P＞0.05)。結(jié)論①3種方法比較,FQ-PCR檢測HBV YMDD變異具有較高的靈敏性和特異性,并能同時(shí)檢測出野生株和變異株的混合感染,與測序結(jié)果相符,是診斷HBV YMDD變異較好的方法。UT-PCR與PCRmnh-ELISA相比,特異性較好,且能具體檢測出YVDD、YIDD兩種變異,與測序結(jié)果符合率較高。以上結(jié)果提示,FQ-PCR和UT-PCR法在檢測HBV YMDD變異方面優(yōu)于PCRmnh-ELISA法,值得臨床推廣應(yīng)用。②PCRmnh-ELISA由于操作煩瑣和較高的假陽性率,建議在方法學(xué)得以改進(jìn)后再考慮臨床應(yīng)用。③拉米夫定治療前ALT基礎(chǔ)水平高可能是YMDD變異的一個(gè)易發(fā)因素。密切監(jiān)控慢性乙肝患者的HBV DNA及ALT水平,有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)YMDD是否發(fā)生變異。④動(dòng)態(tài)監(jiān)測HBV YMDD變異情況,有助于在拉米夫定治療過程中及時(shí)發(fā)現(xiàn)YMDD變異,及時(shí)調(diào)整治療方案。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R512.62;R450

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2797589