【摘要】：研究背景炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)是一種慢性腸道炎癥性疾病。IBD病因和發(fā)病機(jī)制都未明確。孕烷X受體(Pregnane X receptor,PXR)是一種孤兒核受體,在肝臟、骨骼及腸道等處表達(dá)。PXR能通過調(diào)控腸道內(nèi)炎性因子的分泌,在腸道炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用。胰再生源蛋白Ⅲγ(regenerating ganeⅢγ,RegⅢγ)是抗菌肽中一種,能夠限制細(xì)菌入侵腸道。目前對于PXR具體的抑制炎癥作用研究較少。目的通過PXR激動劑干預(yù)結(jié)腸炎模型小鼠,觀察結(jié)腸組織學(xué)改變,檢測其結(jié)腸中Toll樣受體4(toll-like receptors 4,TLR4)、髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)及RegⅢγ的表達(dá)水平以及血清中髓過氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、干擾素γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量并與正常對照組比較。了解PXR在結(jié)腸炎中的作用,探討研究PXR靶向治療藥物的臨床價值。方法SPF級雄性C57BL/6小鼠,共48只隨機(jī)分為,12只/組。模型組給予葡聚糖硫酸鈉(dextran sulphate sodium,DSS)干預(yù)。(1)正常對照組:自由飲食,無特殊處理。(2)DSS結(jié)腸炎模型組:實驗第4天開始,自由飲用2.5%DSS溶液7天。(3)PCN+DSS模型組:從實驗第1天開始,按10mg/kg的量,將PCN溶于玉米油中配成100ul的溶液,給予灌胃,自由飲食。實驗第4天改為自由飲用2.5%DSS溶液7天,同時繼續(xù)給予PCN灌胃,方法及用量同前。(4)PCN對照組:給予PCN灌胃10天,量及方法同(3),自由飲水及飲食。觀察各組小鼠一般狀況,并收集相關(guān)數(shù)據(jù),進(jìn)行DAI評分。于第11天處死全部小鼠,收集血液及結(jié)腸組織。ELISA檢測血清中TNF-a、MPO、IFN-γ。結(jié)腸組織HE染色后進(jìn)行HI評分,免疫組化方法檢測結(jié)腸組織內(nèi)TLR4及RegⅢγ的表達(dá),定量PCR檢測MyD88以及RegⅢγ的mRNA在結(jié)腸的表達(dá)情況。數(shù)據(jù)用統(tǒng)計軟件SPSS 21.0處理,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)描述。Levene檢驗方差齊性,單因素方差分析(ANOVA)法進(jìn)行方差分析。組間比較采用LSD-t法。定性資料的差異性比較選用秩和檢驗。取α=0.05,P0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果(1)采用LSD-t檢驗法兩兩比較各組小鼠DAI評分,結(jié)果提示DSS模型組小鼠與正常組比較,DAI評分較高(P0.05)。PCN+DSS組小鼠DAI評分與DSS模型組小鼠比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。正常組小鼠的DAI評分與PCN組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)將各組小鼠結(jié)腸組織HI評分進(jìn)行兩兩比較,結(jié)果DSS模型組及DSS+PCN組的HI評分均比正常組高,均符合P0.05。DSS模型組與DSS+PCN組比較,前者較高,符合P0.05。(3)DSS模型組與DSS+PCN組小鼠血清MPO、TNF-α、IFN-γ的含量均比正常組高(P0.05)。與DSS模型組相比,DSS+PCN組血清TNF-α、IFN-γ濃度明顯降低(P0.05)。(4)正常組的TLR4及RegⅢγ在腸粘膜組織中的表達(dá)明顯低于DSS模型組(P0.05)。DSS模型組上述指標(biāo)與DSS+PCN組比較均較高,滿足P0.05。(5)比較各組小鼠結(jié)腸中MyD88以及RegⅢγ的mRNA表達(dá)量。正常對照組明顯低于DSS模型組與DSS+PCN組(P0.05),DSS模型組高于DSS+PCN組(P0.05)。結(jié)論1.PXR激活劑可通過激活PXR受體,然后抑制TLR4/MyD88通路,減少RegⅢγ的釋放。2.PXR的激活可以對結(jié)腸炎癥反應(yīng)起到保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R574.62
【圖文】：

各組小鼠血清MPO、TNF-α及IFN-γ濃度比較

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2794424