【摘要】： 為了探討HLA-ⅡI類和Ⅲ類基因與乙型病毒性肝炎之間的相關(guān)性，我們作了如下研究： 1．采用免疫組化法和Western-blot法對36例慢性乙型肝炎和20例正常肝組織中HLA-DR和HLA-DQ的表達(dá)進(jìn)行了檢測，采用免疫組化雙染色技術(shù)對HLA-DR／HBcAg和HLA-DQ／HBcAg的表達(dá)進(jìn)行了檢測，分析HLA-DR、HLA-DQ在慢性乙型肝炎肝組織中的表達(dá)及其意義。 2．采用免疫組化法對36例慢性乙型肝炎和20例正常肝組織中HSP27、HSPT0和HSP90α的表達(dá)進(jìn)行了檢測，采用免疫組化雙染色技術(shù)對HSP70／HBcAg和HSP90α／HBcAg的表達(dá)進(jìn)行了檢測，采用原位雜交法對HSP70 mRNA的表達(dá)進(jìn)行了檢測，分析HSP27、HSP70和HSP90α在慢性乙型肝炎肝組織中的表達(dá)及其意義。 3．應(yīng)用PCR／SSP法對106例正常健康人、52例慢性乙型肝炎、30例急性乙型肝炎和32例慢性重型乙型肝炎患者HLA-DRB1、HLA-DQA1、HLA-DQB1等位基園多態(tài)性進(jìn)行了檢測，分析HLA-DRB1、HLA-DQA1和HLA-DQB1等位基因多態(tài)性與乙型病毒性肝炎之間的相關(guān)性。 4．采用MTT法檢測52例慢性乙型肝炎和30例急性乙型肝炎患者的外周血淋巴細(xì)胞對重組乙型肝炎核心抗原(rHBcAg)的增殖反應(yīng)，分析淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)與HLA-DRB1、HLA-DQA1、HLA-DQB1等位基因多態(tài)性的關(guān)系。 5．應(yīng)用EBV體外感染52例慢性乙型肝炎、30例急性乙型肝炎和32例慢性重型乙型肝炎患者外周血淋巴細(xì)胞建立永生化的淋巴母細(xì)胞系(LCL)；應(yīng)用結(jié)晶紫染色法檢測LCL分泌TNF能力，分析TNF活性水平 與乙型病毒性肝炎臨床表型和HLA－DRB、HLA－DQA、HLA－DQB等位 基因多態(tài)性的關(guān)系。 主要結(jié)果和結(jié)論如下： 1．正常肝組織中肝細(xì)胞未見 HLA－DR、HLA－DQ表達(dá)。慢性乙型肝炎 肝細(xì)胞 HLA－DR、HLA－Do表達(dá)陽性率分別為 22．22O、19．44O。其中，中 度和重度肝炎HLA－DR、HLA－DQ陽性率O7．50、37．50）明顯高于輕度肝 炎（10％、5％），兩者相比差異顯著（ X；‘＝＝3．89，X＊＊曰5．99，P＜0．05）口 HLA＊R 和 HLAoQ過度表達(dá)，可能與病毒活動和肝細(xì)胞壞死有關(guān)，在慢性乙型肝 炎發(fā)病機(jī)制中起重要作用。HLA－DR（HLA－DQ）和 HBCAg同時(shí)陽性的肝細(xì) 胞變性、壞死明顯，在慢性乙型肝炎的免疫損傷機(jī)制中 HLA－DR（HLA－DQ） 和HBCAg可能具有協(xié)同作用。 2．慢性乙型肝炎和正常肝組織中肝細(xì)胞HSP27表達(dá)陽性率分別為 25O和 20O，兩者相比差異無顯著性（X乙0．18，P＞0．05）。慢性乙型肝炎中 HSP70和 HSP90 a陽性率（44．44％、38．89％）明顯高于正常肝組織（15％、 15％X 兩者相比差異顯著（X；’－4．97，X�！校�97，P叼刀5卜中度和重度肝炎 HSP70、HSP90 a陽性率（68．75％、62．5％）明顯高于輕度肝炎（25％、20％）， 兩者相比差異顯著（X廣＝6．89，X／－6．76，P＜0＊5）。HSP70、HSP90 Q表達(dá)陽 性的肝細(xì)胞大多數(shù)無HBCAg表達(dá)。HBV在肝細(xì)胞內(nèi)感染可誘導(dǎo)HSP70和 HSP90 a表達(dá)增加，而對 HSP27的誘導(dǎo)作用則不明顯，HSP70和 HSP90 a 可作為慢性乙型肝炎時(shí)肝細(xì)胞損害的一種標(biāo)志。HSP70、HSP90 a可能干 擾了HBV蛋白的產(chǎn)生或裝配。 3．共檢出HLA－DRB等位基因14個(gè)、HLA－DoAl等位基因10個(gè)、 HLA－DQ田等位基因 13個(gè)，正常健康人中檢出率較高的 HLA0RB等位 基因有HLA－DRBI＊1201／1202、”1501／1502、“0901和”0401／04if，等位基 因頻率分別為 16刀4％、16刀4％、15．09％和 11．32％。HLA－DQAI等位基因 有 HLA－DQAI“0301、“0102、”0501和“0601，等位基因頻率分別為 26．89％， ZI．23％，門＊8％和 10．85％。HLA－DQBI等位基因有 HLA－DQBI＊0301、 “0303、”0201、“0502和”0601，等位基因頻率分別為18．87％、16．sl％、 ·IX· ＼ 10．85o、9．430和9．430。符合我國南方漢族人群的遺傳學(xué)特點(diǎn)。 4．慢性乙型肝炎組的HLA－DRB”0301、HLA－DQAI‘0501 和 HLA－DQBI’0301等位基因頻率（17．310，25．960，35．580）明顯高于正常對 照組（5．67％，13石8％，18．87％），兩者相比差異顯著（X；’呂12．3068，PCI＝0．0074， MI＝＝4．15．X�！�9．2002，PCZ＝0＊157，肌＝2．87．X。’＝＝15．5938，PC3＝0＊075， RR3＝4刀刀。慢性乙型肝炎組的HLA－DRB門 八 02和HLA－DQAI“0301 等位基因頻率（．96o，14．42o）明顯低于急性乙型肝炎組（13．330，30o），兩 者相比差異顯著（X廣s11．9206，PCI＝0．0145，RR1＝18．55．X。‘＝7＊781， PC。＝0．0388，RR＝3．70）。慢性重型乙型肝炎組的HLA－DRBI“1001的等位基 因頻率＊刀9％
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R512.62
【圖文】：

慢性乙型肝炎肝組織中HSP27的表達(dá)((SPx200)

慢性乙型肝炎肝組織中HSP90a的表達(dá)(SPx200)

M23456789101112一429bP一一

本文編號：2762242