發(fā)布時間：2020-07-16 16:01

【摘要】： 目的 本研究預(yù)采用實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合熒光探針技術(shù)對60例有家庭聚集性的HBV感染者進(jìn)行HBV基因分型,并探討基因型分布及其與病毒載量及肝組織病理的關(guān)系。 材料與方法 一、研究對象 本實驗60例有家庭聚集性的HBV感染者血清均取自2006年12月到2008年12月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院感染科住院的沈陽地區(qū)患者,所有血清均為HBsAg和HBV DNA陽性(HBV DNA水平≥10~3copies/ml為陽性)。其中臨床診斷慢性無癥狀HBV攜帶者(ASC)16例,慢性乙型肝炎(CHB)患者32例,代償期肝硬化(LC)患者12例,年齡10～55歲,平均年齡32歲,均進(jìn)行HBV基因型檢測,HBV DNA定量檢測,肝組織病理檢測。研究對象入選標(biāo)準(zhǔn):1)家庭聚集性慢性HBV感染者診斷標(biāo)準(zhǔn):HBV感染者凡符合其母親或(和)父親HBV標(biāo)志物陽性及同胞中大于或等于1人為HBV標(biāo)志物陽性者,均可為家庭聚集性慢性HBV感染。2)臨床診斷:依據(jù)2000年擬定的病毒性肝炎防治方案。 二、HBV基因分型 采用PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù),對乙型肝炎病毒基因進(jìn)行熒光PCR分型檢測,試劑盒由杭州博康生物科技有限公司生產(chǎn),該試劑盒只能檢測乙肝病毒基因B、C基因型,儀器使用ABI7500多色熒光PCR儀及相應(yīng)軟件。 三、HBV DNA定量檢測 熒光定量PCR檢測,試劑盒由深圳匹基生物制品有限公司生產(chǎn),檢測靈敏度為10~3copies/ml,儀器使用Lanegene FQ-PCR熒光定量擴(kuò)增儀。 四、肝組織病理檢測 60例患者肝組織取材均在超聲引導(dǎo)下進(jìn)行,取肝組織2cm,常規(guī)4%甲醛固定,石蠟包埋,標(biāo)本切片為4μm,均做HE、MASSON及網(wǎng)狀纖維特殊染色,提出炎癥分級(G)/纖維化分期(S)診斷。其G/S診斷參照2000年病毒性肝炎防治方案。 五、統(tǒng)計學(xué)分析 在醫(yī)學(xué)統(tǒng)計軟件spss15.0上進(jìn)行X~2檢驗,以P＜0.05確定差異有無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1、HBV基因型分布 60例患者中,B型14例,占23.3%,C型40例,占66.7%,無法分型6例,占10%。其中,在16例臨床診斷的ASC中,B型3例,占18.75%,C型12例,占75%;在32例CHB患者中,B型11例,占34.375%,C型17例,占53.125%;在12例LC患者中,C型11例,占91.7%。 2、HBV基因型與病毒載量的關(guān)系 將HBV DNA載量分為兩組,其中＜10~6copies/ml為低載量組,≥10~6copies/ml為高載量組。在臨床診斷的16例ASC中,HBV DNA均為高載量組;在32例CHB患者中,HBV DNA有9例為低載量組,23例為高載量組;在12例LC患者中,6例為低載量組,6例為高載量組。B、C基因型均以高載量為主,經(jīng)X~2檢驗后,P值＞0.05,兩型之間病毒載量并無明顯差異。 3、HBV基因型與肝組織病理的關(guān)系 B型肝組織病理損害較輕,≤G1者13例(92.9%),≤S1者12例(85.7%);C型肝組織病理損害較重,≥G2者21例(52.5%),≥S2者18例(45%)。在12例LC患者中,幾乎均為C型(91.7%),提示C型與嚴(yán)重肝病有關(guān)。在11例B型CHB患者中,≤G1者10例(90.9%),≤S1者9例(81.8%);在17例C型CHB患者中,≤G1者7例(41.2%),≤S1者8例(47.1%);≥G2者10例(58.8%),≥S2者9例(52.9%);經(jīng)X~2檢驗后,X~2=76.6,P＜0.05,提示C型患者的肝細(xì)胞炎性損傷程度及肝組織纖維化程度均高于B型患者,即C型肝組織損傷較重。16例ASC中,肝組織怖砦廾饗員浠

本文編號：2758206