【摘要】：目的：探討TLR2、TLR4、髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)在實驗性慢性末端回腸炎發(fā)病過程中表達(dá)水平的變化及其相關(guān)意義。 方法：60只雄性SD大鼠隨機分成造模組、縫線組、對照組，每組20只。造模組行末端回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)，縫線組于回腸末端作手術(shù)縫線，對照組只給予麻醉。術(shù)后2周和8周時每組各取10只SD大鼠，收集距吻合口1-4cm處末端回腸組織，肉眼觀察后行切片鏡下觀察，再分別利用Western Blot和實時定量PCR（Real-Time PCR，RT-PCR）方法，測定實驗性大鼠CTI中TLR2、TLR4、MyD88蛋白表達(dá)和mRNA的值，分析三種因子在CTI中的變化及其相關(guān)性。 結(jié)果： 1.各組SD大鼠死亡率各組死亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ~2=2.105,P=0.349）。 2.各組SD大鼠的一般情況術(shù)后3天-2周造模組及縫線組SD大鼠均有不同程度的脫毛、精神萎靡、食欲差、體重下降等。在恢復(fù)進(jìn)食后各組一般情況開始好轉(zhuǎn)，但造模組恢復(fù)較慢，術(shù)后4周-8周三組大鼠無明顯差異（P＞0.05）。 3.各組SD大鼠末端回腸組織肉眼觀與病理術(shù)后2周，肉眼及鏡下觀見造模組及縫線組表現(xiàn)為急性炎癥反應(yīng)，兩組炎癥評分均較對照組高；術(shù)后8周，肉眼及鏡下觀見造模組表現(xiàn)為慢性炎癥改變。而縫線組回腸末端組織未見明顯炎性細(xì)胞浸潤及結(jié)構(gòu)破壞，造模組炎癥評分比縫線組及對照組均顯著升高。 4.各組SD大鼠回腸末端組織TLR2、4及其MyD88的表達(dá)水平 術(shù)后2周及8周三組SD大鼠TLR2、TLR4、 MyD88的表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（TLR2：F~(2W)=177.3,P_(2W)=0.000；F~(8W)=594.1,P_(8W)=0.000）；（TLR4：F~(2W)=1113.0,P_(2W)=0.000；F~(8W)=7496.0,P_(8W)=0.000）；（MyD88：F~(2W)=156.1,2W=0.000；F~(8W)=994.7, P_(8W)=0.000），表明三個因子的表達(dá)在造模組中有顯著增加。術(shù)后8周與2周對比，縫線組及造模組SD大鼠末端回腸組織中TLR2、TLR4、MyD88的表達(dá)水平均有統(tǒng)計學(xué)意義（TLR2：t_縫=7.6223,P_縫=0.0000；t_造=16.7251,P_造=0.0000）；（TLR4：t_縫=11.0262,P_縫=0.0000；t_造=76.7887,P_造=0.0000）；（MyD88：t_縫=24.4459,P_縫=0.0000；t_造=20.7673,P_造=0.0000），且造模組升高明顯較縫線組顯著。結(jié)果表明TLR2、TLR4、 MyD88在末端回腸炎的發(fā)病過程中有明顯的升高，并與末端回腸炎癥存在時間及炎癥程度有相關(guān)性。 造模組SD大鼠不同時間節(jié)點三種因子表達(dá)的比較經(jīng)方差分析，它們表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（F~(2W)=26.0,P_(2W)=0.000；F~(8W)=294.5,P_(8W)=0.000）；且2周至8周TLR2、TLR4、 MyD88的升高率分別為158.88%、458.68%、233.87%，TLR4表達(dá)水平的升高率更顯著。5.TLR2及TLR4與MyD88的關(guān)系。實驗表明，在實驗性末端回腸炎發(fā)病過程中TLR2、TLR4、MyD88表達(dá)呈正相關(guān)，造模組8周， TLR2、TLR4與MyD88的相關(guān)系數(shù)較2周更高，表明三者的表達(dá)與炎癥程度呈正相關(guān)。 結(jié)論： 1.TLR2、TLR4、MyD88在CTI中表達(dá)增加，均與炎癥程度呈正相關(guān)； 2.TLR4表達(dá)水平在CTI發(fā)病時較TLR2及MyD88升高更顯著，推測革蘭陰性菌感染可能是CTI發(fā)病的啟動因子； 3.TLR2及TLR4可能通過MyD88依賴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活在CTI發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R574.53

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2754461