【摘要】： 乙型肝炎病毒(HBV)是一種嗜肝性DNA病毒,病毒本身的復(fù)制并不造成肝臟損傷。研究表明,CHB患者肝臟損傷是由于免疫系統(tǒng)不能有效控制病毒復(fù)制,卻又長(zhǎng)期被激活并介導(dǎo)肝細(xì)胞破壞而發(fā)生的。近十年來(lái),人們逐步開(kāi)始認(rèn)識(shí)到NK細(xì)胞在各類(lèi)肝臟疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。然而,HBV慢性感染患者(特別是e抗原陽(yáng)性的CHB患者)體內(nèi)NK細(xì)胞的功能特點(diǎn)及其臨床意義還未被揭示,NK細(xì)胞介導(dǎo)的肝損傷機(jī)制也未完全闡明。 本研究通過(guò)橫斷面研究,系統(tǒng)觀察HBV感染各個(gè)時(shí)期(包括急性肝炎、慢性HBV感染免疫耐受期和免疫活化期)患者外周血NK細(xì)胞的頻率、表型和功能特點(diǎn),并密切結(jié)合患者的臨床指標(biāo)(谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平和血清HBV載量)進(jìn)行分析,以期闡明NK細(xì)胞變化的臨床意義,并在此基礎(chǔ)上初步探討了CHB患者NK細(xì)胞免疫活化的可能原因及其介導(dǎo)肝臟免疫損傷的作用機(jī)制。 研究發(fā)現(xiàn),與免疫耐受期患者和健康對(duì)照者比較,慢性乙肝免疫活化期患者外周血NK細(xì)胞亞群發(fā)生顯著改變,表現(xiàn)為CD56~(dim)CD16~(pos)亞群頻率下降而CD56~(bright)CD16~(neg)亞群頻率上升。我們還發(fā)現(xiàn)盡管急性乙型肝炎病程早期階段,患者的外周血T細(xì)胞和NK細(xì)胞表面的活化標(biāo)志物如HLA-DR、CD38和CD69的表達(dá)顯著上升,然而慢性乙肝免疫活化期患者的外周血僅NK細(xì)胞活化標(biāo)志顯著增加,提示慢乙肝免疫活化期以NK細(xì)胞活化為主。進(jìn)一步的體外功能試驗(yàn)揭示免疫活化期患者NK細(xì)胞在IL-12／IL-15刺激后表達(dá)更多IFN-γK562刺激后產(chǎn)生更多CD107a,同時(shí)殺傷更多的靶細(xì)胞K562、HepG2、HepG2.2.15和HuH7.5細(xì)胞,更重要的是NK細(xì)胞殺傷活性與肝損傷程度密切相關(guān)。 本研究通過(guò)對(duì)乙型肝炎患者NK細(xì)胞的表型和功能進(jìn)行詳細(xì)分析,發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎免疫活化期患者外周血NK細(xì)胞處于高活化狀態(tài),進(jìn)一步支持慢性 乙型肝炎患者NK細(xì)胞的高度活化與肝損傷的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R512.62
【圖文】：

型凝集素受體，但是表達(dá)低水平的KIRS受體，細(xì)胞殺傷活性和ADCC活性很低。同時(shí)還組成性表達(dá)大量的細(xì)胞因子和化學(xué)趨化受體，包括IL一2受體(IL一ZRap丫)，e一kit和CCR7(CCR7)。見(jiàn)圖2。

過(guò)CD3和CD56分子圈門(mén) CD3-CD56+，即NK細(xì)胞;在NK細(xì)胞的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步通過(guò)en56和eD16分子區(qū)分℃Ds6州蜘(enl6尹創(chuàng)叮)和ens嚴(yán)(eol6+)NK細(xì)胞亞群。設(shè)門(mén)策略見(jiàn)圖3。2228，26吟二 二’ ’:’‘:.:::毓毓 ::: 000.94%...、 、.…‘ ‘ lll...一一、必’ ’于于渭麟:’ ’▲，9..............叭OQ CD3.1-一.一------呻 CD16一---------呻圖3外周血NK細(xì)胞亞群設(shè)門(mén)策略。左圖框內(nèi)為cD3℃D56+的細(xì)胞;右圖框內(nèi)分別為 CD56嘲和cDS嚴(yán)NK細(xì)胞亞群。3.檢測(cè)NK細(xì)胞活化比例取新鮮分離的PBMCs各100閃，在樣品中同時(shí)加入下列熒光標(biāo)記抗體:anti一CD3一 FITC10林l，anti一eD56一ApCS林l。NK細(xì)胞活化標(biāo)志物(eD38、CD69

患者(中位數(shù)4.3%，范圍0.94%一5.8%;p<0.001)和健康對(duì)照組(中位數(shù)3.7%;范圍0.5%一17.1%:p<0.001)明顯上升。免疫耐受期患者和健康對(duì)照組在NK細(xì)胞各亞群的分布上無(wú)顯著性差異。結(jié)果見(jiàn)圖5、圖6、圖7和圖8�！囐嵸嵸嵸嵸嵸嵸嵸嵡盖盖盖盖盖盖盖盖盖附澜阑炕炕炕炕炕縊喲00圖5流式細(xì)胞儀在淋巴細(xì)胞門(mén)內(nèi)分析PBMCs的CD3和CD56表達(dá)�？騼�(nèi)點(diǎn)圖表示健康對(duì)照組、IT、IA和AHB患者的NK細(xì)胞亞群。數(shù)值表示cD56bri咖和ens6d‘mNK細(xì)胞亞群的百分t匕。

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 崔明芳;郜玉峰;呂峰;李娜;張振華;李旭;蘇菲;;Tim-3基因多態(tài)性與乙型肝炎病毒感染轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性[J];世界華人消化雜志;2011年14期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 鞠瑛;Tim-3在HBV慢性感染中的表達(dá)及作用研究[D];山東大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 鐘鑒宏;過(guò)繼免疫治療在肝細(xì)胞性肝癌術(shù)后應(yīng)用的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 崔明芳;Tim-3基因多態(tài)性與HBV感染轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

3 席文錦;Ⅰ.TIPE2在CHB患者PBMCs的表達(dá)及意義 Ⅱ.CPI-17影響VSMCs表型參與動(dòng)脈粥樣硬化形成[D];山東大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2747221