【摘要】：研究背景 骨髓間充質干細胞（BMMSCs）是一類來源于中胚層的具有多向分化潛能的成體干細胞，而且具有低免疫原性、易于培養(yǎng)擴增、遺傳背景穩(wěn)定等特點，成為組織工程學較為理想的種子細胞。目前已廣泛應用于機體各系統(tǒng)疾病的研究之中，但尚無在慢性萎縮性胃炎（CAG）中的應用報道。CAG以胃固有腺體減少為特征，與胃癌發(fā)生關系密切，目前尚無理想藥物逆轉其萎縮病變。 目的 探究骨髓間充質干細胞對慢性萎縮性胃炎的治療作用。方法 1.將大鼠隨機分為模型組和正常組，模型組自由飲用0.1%氨水，前10周用2％水楊酸鈉和30％酒精混合溶液灌胃，后12周用20mmol/L去氧膽酸鈉溶液灌胃；正常對照組正常飲水，用蒸餾水灌胃22周。 2.采用全骨髓貼壁法分離純化大鼠BMMSCs，同時提取大鼠胃黏膜勻漿上清液并測定其蛋白濃度為1.5ug/ul，按照150ug/ml對BMMSCs進行誘導5周后利用細胞免疫熒光方法鑒定細胞角蛋白以及巢蛋白的表達。 3.將模型大鼠與正常大鼠分別分為細胞移植組與對照組，在移植組大鼠中，CM-Dil標記的BMMSCs按照2x106/只的量，分別通過尾靜脈注射與胃壁注射進行移植，模型對照組分別給予尾靜脈或胃壁注射等體積生理鹽水作為對照。細胞移植2周、4周后分別通過冰凍切片觀察CM-Dil熒光以及FISH方法鑒定BMMSCs在胃內定植情況，并觀察胃病理學指標改善情況。 結果 1.建模22周后，模型組大鼠與正常組比較，胃竇腺體萎縮明顯，黏膜層變薄且黏膜肌層相對增厚，炎性細胞浸潤明顯。 2. BMMSCs經(jīng)胃黏膜勻漿上清誘導后第7天開始出現(xiàn)圓形或橢圓形細胞，5周后鑒定細胞角蛋白表達陽性，巢蛋白陰性。 3.在胃壁注射BMMSCs組中，于移植后2周，可觀察到CM-Dil標記的熒光， 4周后未見CM-Dil標記的熒光，但在雌鼠中通過FISH發(fā)現(xiàn)BMMSCs在胃內的定植。其他各組在觀察時間段內均未見BMMSCs定植。BMMSCs移植后4周，萎縮性胃炎模型中移植組與對照組相比，炎性細胞浸潤明顯減輕（p0.05），但萎縮程度與黏膜層厚度比較沒有統(tǒng)計學差異（p0.05）。 結論 1.綜合應用30%酒精、2%水楊酸鈉、20mmol/L的脫氧膽酸鈉及0.1%氨水，22周后成功建立了萎縮性胃炎模型，此模型建立方法簡單，無需特殊設備和條件。 2.胃黏膜勻漿上清液可誘導BMMSCs分化為上皮細胞。 3. BMMSCs通過胃壁注射移植2周、4周后均可觀察到細胞在胃壁內的定植；在CAG模型中，BMMSCs在移植后4周內可減輕炎性細胞浸潤程度，但對萎縮無明顯改善。
【學位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R573.3
【圖文】：

的竇、體部分別觀察 5 個視野，計算平均值。察指標：腸化生，胃黏膜上皮細胞細胞核多形性，無。理均數(shù)±標準差（x ±s）表示，應用 SPSS17.0 軟件進符合正態(tài)分布應用 t 檢驗分析，不符合則用秩和檢異。結 果，有 2 只大鼠（兩組各 1 只）因灌胃不當導致死亡織放入水中，提示液體灌入肺內致使肺組織下沉。

圖 2 兩組大鼠平均體重變化曲線圖表 1 兩組間觀察指標比較察指標 正常組 模型組 9 18479.5±125.6 370.8±93.0 0.000±0.000 0.111±0.471 0.000±0.000 1.111±0.471 0.667±0.500 1.533±0.524 0.889±0.601 2.111±0.583 )（um）

【參考文獻】

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本文編號：2721671