【摘要】：目的 初步研究COX-2shRNA對CCL4復合因素誘導的大鼠肝纖維化的防治作用及其作用機制。 方法 (1)實驗性大鼠肝纖維化模型的建立：50只清潔級SD大鼠正常喂養(yǎng)1周后，隨機分為5組：正常組、模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組、尼美舒利組，每組10只。除正常組外，其它各組均以CCl4溶液(40%CCl4花生油，2ml/kg次5d)灌胃，同時予以高脂飲食(普通飼料基礎上加2%膽固醇、10%豬油)喂養(yǎng)。并于造模1周后，COX-2shRNA治療組予以尾靜脈注射100ulCOX-2shRNA，空載體組予以尾靜脈注射100ul空載體，其余3組均予等量生理鹽水尾靜脈注射，1次/d；同時尼美舒利組予以尼美舒利6mg/kg灌胃，其余4組均予等量0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，1次/d；正常組予以普通飼料喂養(yǎng)。 (2)各組大鼠檢測指標的觀察：觀察各組大鼠一般情況,于干預12周后稱量體重，處死大鼠后取血及肝組織，觀察肝臟大體外觀，并計算肝指數(shù)(肝濕重/體重x100%)，并檢測大鼠血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平；各組肝組織行蘇丹IV染色、HE染色和Masson膠原染色觀察大鼠肝臟組織病理學的改變；采用RT-PCR法檢測大鼠肝臟COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA的表達情況。 結果 (1)COX-2shRNA對大鼠體重、肝指數(shù)的影響：造模結束時各組大鼠的體重均有所增加。與正常組比較，模型組和空載體組大鼠體重增長緩慢，但模型組、空載體組和尼美舒利組肝指數(shù)顯著升高,均有顯著性差異(P0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組大鼠體重增長較模型組和空載體組快，肝指數(shù)低于模型組和空載體組，尤以COX-2shRNA治療組效果更佳(P0.01,0.05)；空載體組與模型組之間體重和肝指數(shù)無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (2)COX-2shRNA對大鼠血清學指標的影響：與正常組比較，模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組及尼美舒利組大鼠血清中ALT、AST、TC、TG水平均明顯升高(P0.01)；除尼美舒利組和空載體組的TG水平無差異性(P0.05)外，尼美舒利組其余指標和COX-2shRNA治療組的各項指標均低于模型組和空載體，其中以COX-2shRNA治療組下降更明顯(P0.01，P0.05)；模型組和空載體組各血清學指標無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (3)COX-2shRNA對大鼠病理學的影響：據(jù)蘇丹IV染色、HE染色及Masson膠原染色所示，模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組、尼美舒利組大鼠病理學評分及膠原面積分析均明顯升高于正常組(P0.01)；COX-2shRNA治療組及尼美舒利組病理學評分及膠原面積分析低于模型組和空載體組，且以COX-2shRNA治療組效果更明顯(P0.01,P0.05)；空載體組與模型組病理學評分及膠原面積分析無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (4)COX-2shRNA對大鼠各基因mRNA表達的影響：模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組和尼美舒利組大鼠肝臟組織中COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA表達水平較正常組均明顯升高(P0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組各個基因mRNA表達水平較模型組和空載體組均下調，以COX-2shRNA治療組下調更明顯(P0.01)；模型組與空載體組比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論 1、COX-2shRNA可降低肝纖維化大鼠血脂，改善其肝功能及肝臟病理學變化，具有肝纖維化保護作用。 2、COX-2shRNA對實驗性肝纖維化的保護作用可能與下調肝組織COX-2、α-SMA、P53、CCL2和CXCL10mRNA的表達有關。 3、COX-2shRNA對肝纖維化保護作用較尼美舒利有更明顯的效果。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R575.2
【圖文】：

各組SD大鼠體重指標觀察

18 圖 2 各組 SD 大 鼠肝 指 數(shù) 指標 觀 察 A： 正 常組 ；B ： 模型 組； C ：C OX - 2 sh R NA 治療 組； D ：空 載體 組 ；E ： 尼美 舒 利 組

【參考文獻】

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本文編號：2714925