【摘要】：目的 初步研究COX-2shRNA對CCL4復(fù)合因素誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的防治作用及其作用機(jī)制。 方法 (1)實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化模型的建立：50只清潔級SD大鼠正常喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組：正常組、模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組、尼美舒利組，每組10只。除正常組外，其它各組均以CCl4溶液(40%CCl4花生油，2ml/kg次5d)灌胃，同時予以高脂飲食(普通飼料基礎(chǔ)上加2%膽固醇、10%豬油)喂養(yǎng)。并于造模1周后，COX-2shRNA治療組予以尾靜脈注射100ulCOX-2shRNA，空載體組予以尾靜脈注射100ul空載體，其余3組均予等量生理鹽水尾靜脈注射，1次/d；同時尼美舒利組予以尼美舒利6mg/kg灌胃，其余4組均予等量0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，1次/d；正常組予以普通飼料喂養(yǎng)。 (2)各組大鼠檢測指標(biāo)的觀察：觀察各組大鼠一般情況,于干預(yù)12周后稱量體重，處死大鼠后取血及肝組織，觀察肝臟大體外觀，并計(jì)算肝指數(shù)(肝濕重/體重x100%)，并檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平；各組肝組織行蘇丹IV染色、HE染色和Masson膠原染色觀察大鼠肝臟組織病理學(xué)的改變；采用RT-PCR法檢測大鼠肝臟COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果 (1)COX-2shRNA對大鼠體重、肝指數(shù)的影響：造模結(jié)束時各組大鼠的體重均有所增加。與正常組比較，模型組和空載體組大鼠體重增長緩慢，但模型組、空載體組和尼美舒利組肝指數(shù)顯著升高,均有顯著性差異(P0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組大鼠體重增長較模型組和空載體組快，肝指數(shù)低于模型組和空載體組，尤以COX-2shRNA治療組效果更佳(P0.01,0.05)；空載體組與模型組之間體重和肝指數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (2)COX-2shRNA對大鼠血清學(xué)指標(biāo)的影響：與正常組比較，模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組及尼美舒利組大鼠血清中ALT、AST、TC、TG水平均明顯升高(P0.01)；除尼美舒利組和空載體組的TG水平無差異性(P0.05)外，尼美舒利組其余指標(biāo)和COX-2shRNA治療組的各項(xiàng)指標(biāo)均低于模型組和空載體，其中以COX-2shRNA治療組下降更明顯(P0.01，P0.05)；模型組和空載體組各血清學(xué)指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (3)COX-2shRNA對大鼠病理學(xué)的影響：據(jù)蘇丹IV染色、HE染色及Masson膠原染色所示，模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組、尼美舒利組大鼠病理學(xué)評分及膠原面積分析均明顯升高于正常組(P0.01)；COX-2shRNA治療組及尼美舒利組病理學(xué)評分及膠原面積分析低于模型組和空載體組，且以COX-2shRNA治療組效果更明顯(P0.01,P0.05)；空載體組與模型組病理學(xué)評分及膠原面積分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (4)COX-2shRNA對大鼠各基因mRNA表達(dá)的影響：模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組和尼美舒利組大鼠肝臟組織中COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA表達(dá)水平較正常組均明顯升高(P0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組各個基因mRNA表達(dá)水平較模型組和空載體組均下調(diào)，以COX-2shRNA治療組下調(diào)更明顯(P0.01)；模型組與空載體組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1、COX-2shRNA可降低肝纖維化大鼠血脂，改善其肝功能及肝臟病理學(xué)變化，具有肝纖維化保護(hù)作用。 2、COX-2shRNA對實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的保護(hù)作用可能與下調(diào)肝組織COX-2、α-SMA、P53、CCL2和CXCL10mRNA的表達(dá)有關(guān)。 3、COX-2shRNA對肝纖維化保護(hù)作用較尼美舒利有更明顯的效果。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R575.2
【圖文】：

各組SD大鼠體重指標(biāo)觀察

18 圖 2 各組 SD 大 鼠肝 指 數(shù) 指標(biāo) 觀 察 A： 正 常組 ；B ： 模型 組； C ：C OX - 2 sh R NA 治療 組； D ：空 載體 組 ；E ： 尼美 舒 利 組

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 田耕;環(huán)氧合酶-2與肝病的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(消化系疾病分冊);2001年04期

2 馮海娟;陸翠華;;肝纖維化的基因治療研究進(jìn)展[J];國際消化病雜志;2009年01期

3 廖明;李彥;舒?zhèn)?;Genistein對大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖及TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表達(dá)的影響[J];世界華人消化雜志;2010年03期

4 葉偉東;陳永平;徐少杰;黃淵;朱憶凌;潘陳為;許維丹;;肝纖維化大鼠肝臟Bcl-2、Bax、增殖細(xì)胞核抗原的表達(dá)及重組轉(zhuǎn)化生長因子β1疫苗對其表達(dá)的影響[J];中華傳染病雜志;2007年07期

5 中華肝臟病學(xué)會肝纖維化學(xué)組;肝纖維化診斷及療效評估共識[J];中華肝臟病雜志;2002年05期

6 ;非酒精性脂肪性肝病診療指南[J];中華肝臟病雜志;2006年03期

7 周筱艷,陽學(xué)風(fēng);環(huán)氧合酶-2抑制劑尼美舒利對大鼠肝纖維化的影響[J];中華消化雜志;2004年07期

8 付德才;張煒婷;樊麗萍;孫鈺瑋;;甲珠對肝纖維化大鼠肝組織α-SMA表達(dá)的影響[J];中國老年學(xué)雜志;2011年17期

9 成揚(yáng);平鍵;劉成;徐列明;;姜黃素激活過氧化物酶體增殖因子活化受體γ信號對大鼠肝星狀細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2、9活性和胞核核因子-κBp65表達(dá)的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2007年05期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 孫治坤;慢性腦缺血大鼠腦白質(zhì)損傷及尼美舒利治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2005年

2 梅燕;老鼠|乙醇提取物對大鼠肝纖維化TGF-β_1和COX-2等表達(dá)的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號：2714925