【摘要】： 目的通過尾靜脈注射刀豆蛋白A建立小鼠免疫性肝炎模型,觀察肝勻漿中P物質(zhì)(substance P,SP)含量及其受體神經(jīng)激肽-1受體(Neurokinin-1receptor,NK-1R)在肝組織中的表達(dá),以揭示SP介導(dǎo)的神經(jīng)源性炎癥在肝炎的發(fā)生、發(fā)展中的可能作用;同時從血清學(xué)、組織學(xué)和細(xì)胞因子表達(dá)方面研究NK-1R受體阻滯劑L-703,606對小鼠免疫性肝炎模型的干預(yù)作用,進(jìn)一步證實肝炎的起始和擴(kuò)大中的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制,并為臨床上各型肝炎的治療提供實驗依據(jù)。 方法60只雌性小鼠隨機(jī)平分為三組:①生理鹽水對照組:予尾靜脈注射生理鹽水0.2ml;②刀豆球蛋白A(Con A)免疫性肝炎模型組:尾靜脈注射ConA(20 mg/kg);③L-703,606干預(yù)組:在接受等量ConA注射前30分鐘尾靜脈注射L-703,606(10 mg/kg)。給藥6小時后,水合氯醛麻醉小鼠,眼眶取血,然后處死所有小鼠并取出肝臟,分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法與RT-PCR法測定對照組和模型組肝臟組織中P物質(zhì)含量及其受體NK-1R mRNA的相對定量表達(dá);同時分別檢測各組血清中ALT、AST水平,HE染色觀察肝臟病理變化,實時熒光定量PCR測定肝臟組織中TNF-α和IFN-γmRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果(1)模型組肝組織勻漿中SP含量顯著高于對照組;而且模型組NK-1R mRNA的表達(dá)顯著上調(diào);(2)病理觀察:模型組可見肝細(xì)胞索破壞,肝竇稍增寬,內(nèi)有大量瘀血,肝細(xì)胞彌漫性腫脹,核固縮、溶解甚至消失,點、灶狀及片狀壞死多見,匯管區(qū)及中央靜脈肝竇內(nèi)可見中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤;而干預(yù)組上述肝組織病理改變明顯減輕,肝細(xì)胞腫脹壞死及淋巴細(xì)胞浸潤也較模型組明顯改善;(3)模型組與干預(yù)組血清AST、ALT水平均大幅升高(P＜0.01),但與模型組相比,干預(yù)組ALT和AST明顯下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);(4)干預(yù)組肝組織TNF-α和IFN-γmRNA表達(dá)水平較模型組顯著下調(diào)(P＜0.05)。 結(jié)論 1.本實驗成功建立了小鼠免疫性肝炎模型,組織病理顯示模型組肝臟點、灶狀及片狀壞死多見,匯管區(qū)及中央靜脈肝竇內(nèi)可見中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤。 2.模型組肝組織勻漿SP含量及其受體NK-1R mRNA的表達(dá)顯著高于對照組,證明SP介導(dǎo)的神經(jīng)源性炎癥在肝炎的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮重要的作用。 3.NK-1R受體阻滯劑L-703,606干預(yù),可使血清AST、ALT水平、肝臟組織病理變化及肝組織TNF-α和IFN-γmRNA表達(dá)水平明顯下降,證明阻滯SP與其受體結(jié)合對肝臟炎癥具有一定的抑制和治療作用。 【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R575.1

【圖文】：

模型組鏡下病理改變(淋巴細(xì)胞浸潤)HEX200

SP檢測ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 李成仁,蔡文琴,鄧曉林,肖茂磊,楊忠,何家全,肖光夏;P物質(zhì)對大鼠脾細(xì)胞免疫功能的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1999年12期

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本文編號：2711918