【摘要】：背景腸道菌群在維持機體健康的過程中發(fā)揮著重要的作用,腸道菌群的紊亂將促進疾病的發(fā)生發(fā)展。長期的高脂飲食可使機體腸道菌群發(fā)生紊亂,誘導機體非酒精性脂肪肝的發(fā)生。隨著高通量測序技術的迅猛發(fā)展,加深了人類對腸道微生物與疾病之間的認識�；诟咄繙y序結(jié)果,以腸道菌群為靶點,探究腸道菌群與非酒精性脂肪肝之間的關系,具有重要的指導意義。目的運用高通量測序及相關生物信息學分析技術,從中篩選出正常飲食小鼠與高脂飲食小鼠腸道菌群的差異性基因,探討其在高脂飲食小鼠誘導的非酒精性脂肪肝和腸道菌群紊亂中的作用。方法實驗一:5周齡的C57BL/6小鼠隨機分為2組,分別為正常飲食組(普通飼料飼養(yǎng))和高脂飲食組(高熱量飼料飼養(yǎng))。18周實驗結(jié)束,麻醉處死小鼠后,提取這兩組小鼠的盲腸腸道菌群的DNA,進行宏基因組測序。實驗二:5-6周齡的C57BL/6小鼠隨機分為3組,分別為:(1)對照組,給予普通飼料飼養(yǎng);(2)高脂組,給予高熱量飼料飼養(yǎng);(3)高脂+左旋-巖藻糖組,給予高熱量飼料飼養(yǎng),且從第8周開始,給予該組小鼠左旋-巖藻糖(0.3 g/kg)灌胃處理,一天一次,直至第18周實驗結(jié)束。同時,對照組和高脂組的小鼠給予等劑量ddH2O灌胃。其中,第15周時,對小鼠進行葡萄糖耐量實驗;第16周時,進行胰島素耐量實驗。18周后收集實驗動物樣本,進行組織學實驗;提取小鼠盲腸腸道菌群DNA進行16S核糖體RNA基因測序。結(jié)果結(jié)果一:宏基因組測序結(jié)果顯示,高脂飲食改變小鼠腸道菌群的基因組功能。根據(jù)設定的篩選條件,發(fā)現(xiàn)與正常飲食組相比,高脂飲食組小鼠腸道菌群中的阿爾法-左旋-巖藻糖苷酶(fuca)基因明顯降低。fuca基因在兩組間的基因豐度差異最顯著,該基因在正常飲食組的基因豐度是高脂飲食組的1.33倍,差異具有統(tǒng)計學意義(p=0.0047),因此我們集中關注fuca基因。其中,阿爾法-左旋-巖藻糖苷酶(FUCA)是fuca基因表達的產(chǎn)物,且FUCA是促使左旋-巖藻糖生成的催化酶。結(jié)果二:與高脂組小鼠相比,高脂+左旋-巖藻糖組小鼠的體重減輕,附睪脂肪、腸系膜脂肪、皮下脂肪累積均減少,肝臟甘油三酯含量下降,肝臟脂肪樣變改善。另外,16S核糖體RNA基因測序結(jié)果發(fā)現(xiàn),左旋-巖藻糖使小鼠腸道菌群的內(nèi)毒素產(chǎn)生菌——脫硫弧菌科減少,在一定程度上恢復了高脂飲食誘導的腸道菌群組成成分和功能成分的紊亂。結(jié)論我們的研究提示著左旋-巖藻糖可能是一種治療高脂飲食誘導的非酒精性脂肪肝和腸道菌群生態(tài)紊亂的新策略。
【圖文】：

否發(fā)生了變化，應用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ＥＬＩＳＡ）的試劑盒檢測健康人（Ｃｏｎ）逡逑以及ＮＡＦＬＤ患者糞便中ＦＵＣＡ的含量。結(jié)果顯示，與Ｃｏｎ組相比，ＮＡＦＬＤ患逡逑者的ＦＵＣＡ含量呈下降的趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義（

Ｆｉｇｕｒｅ邋２－４邋Ｆｕｃ邋ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｄ邋ＨＦＤ－ｉｎｄｕｃｅｄ邋ｈｅｐａｔｉｃ邋ｓｔｅａｔｏｓｉｓ邋ｉｎ邋ｍｉｃｅ逡逑（Ａ）邋Ｐｌａｓｍａ邋ｌｅｖｅｌｓ邋ｏｆ邋ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ邋（ＣＨＯＬ）．邋（Ｂ）邋Ｐｌａｓｍａ邋ｌｅｖｅｌｓ邋ｏｆ邋ｈｉｇｈ－ｄｅｎｓｉｔｙ邋ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ邋（ＨＤＬ）．邋（Ｃ）逡逑Ｈｅｐａｔｉｃ邋ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ邋（ＴＧ）邋ｌｅｖｅｌ．邋（Ｄ）邋Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ邋ｏｆ邋ＨＥ－ｓｔａｉｎｅｄ，邋Ｏｉｌ邋Ｒｅｄ邋Ｏ－ｓｔａｉｎｅｄ，邋ａｎｄ邋ＤＨＥ－逡逑ｓｔａｉｎｅｄ邋ｌｉｖｅｒ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ．邋Ｓｃａｌｅ邋ｂａｒｓ＝邋１００邋ｐｍ．邋ｎ＝邋７－１２．邋Ｄａｔａ邋ａｒｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ邋ａｓ邋ｍｅａｎ邋士邋ＳＥＭ．邋Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ逡逑ｂｅｔｗｅｅｎ邋ｇｒｏｕｐｓ邋ｗｅｒｅ邋ａｓｓｅｓｓｅｄ邋ｂｙ邋ｏｎｅ－ｗａｙ邋ＡＮＯＶＡ．邋＊ｐ邋＜邋０．０５，邋ＨＦＤ邋ｇｒｏｕｐ邋ｖｓ邋ＮＣ邋ｇｒｏｕｐ；邋＃ｐ邋＜邋０．０５，逡逑ＨＦＤ邋ｇｒｏｕｐ邋ｖｓ邋ＨＦＤ邋＋邋Ｆｕｃ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑２．３．５左旋－巖藻糖改善高脂飲食小鼠誘導的腸道菌群組成成分的紊亂逡逑宏基因組測序分析結(jié)果顯示，與正常飲食組小鼠相比，高脂飲食導致小鼠盲逡逑腸內(nèi)容物腸道菌群的／ＭＣｆｌ基因豐度降低（圖１－１邋Ｃ）。緊接著，，為了探宄給予小逡逑鼠Ｆｕｃ灌胃處理后，是否可以使高脂飲食小鼠的腸道菌群紊亂得到改善；因此，逡逑１８周實驗結(jié)束后，收集ＮＣ組、ＨＦＤ組和ＨＦＤ邋＋邋Ｆｕｃ組這三組小鼠的盲腸內(nèi)容逡逑物，提取腸道菌群的ＤＮＡ，進行１６ＳｒＲＮＡ基因測序。首先，觀察１６ＳｒＲＮＡ基逡逑３２逡逑
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R575.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 宋耀虹,馮濤,沈瑛,馬德均,王惠珍;尿中游離L-巖藻糖測定的臨床應用[J];生物化學與生物物理進展;1999年05期

2 李俊林,王大仁,呂昌龍,韓開平;口腔惡性腫瘤患者血清L-巖藻糖含量變化及與腫瘤壞死因子活性關系的研究[J];中國醫(yī)科大學學報;1999年04期

3 董振南,沈文梅;尿L-巖藻糖測定的臨床意義[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;1997年04期

4 吳人鳳;血清與尿中L—巖藻糖的酶法測定[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;1991年04期

5 李修旺;;胃癌胃液可溶性唾液酸型和巖藻糖型糖蛋白的研究——診斷價值[J];腫瘤防治研究;1987年02期

6 孫月霞;癌癥患者血清TSA、LSA和FUC含量的分析[J];上海第二醫(yī)科大學學報;1988年02期

7 楊甲梅,吳孟超,陳漢;α-L巖藻糖甙酶對原發(fā)性肝癌的診斷價值[J];第二軍醫(yī)大學學報;1989年03期

8 陳琪福;α-L巖藻糖甙酶對原發(fā)性肝癌的診斷價值(摘要)[J];解放軍醫(yī)學雜志;1989年05期

9 李偉道,徐建業(yè),張靜蘭,史玲,陳忠良,周福康,楊廷碧,劉興明,張仲國;血清甲胎蛋白正常含量者測定巖藻糖化指數(shù)對肝細胞癌診斷價值的探討[J];臨床肝膽病雜志;1989年02期

10 胡鋒;潘勤;章曉聯(lián);;結(jié)核分枝桿菌對巨噬細胞巖藻糖轉(zhuǎn)移酶家族基因表達的影響[J];中國生化藥物雜志;2016年03期

相關會議論文 前10條

1 孔英;閆一琳;石昕;顧娟;張永蓮;朱正美;;巖藻糖化寡糖抗原在附睪中的表達[A];第十屆全國生殖生物學學術研討會論文摘要集[C];2005年

2 劉漢朋;鄧希賢;;L-巖藻糖的Raman光譜研究[A];中國物理學會光散射專業(yè)委員會成立十周年暨第六屆學術會議論文集（上）[C];1991年

3 洪晶;李建許;賴仞;林東海;;多肽odorranalectin的溶液結(jié)構(gòu)及其與巖藻糖的相互作用[A];第十五屆全國波譜學學術會議論文摘要集[C];2008年

4 Yi-Wei Zhang;Jian-Hui Zhu;David M.Lubman;Xin-Xiang Zhang;;LC-MS方法用于肝癌及肝硬化結(jié)合珠蛋白中巖藻糖化水平研究[A];中國化學會第十一屆全國生物醫(yī)藥色譜及相關技術學術交流會（大會特邀報告及墻報）論文摘要集[C];2016年

5 李妍;林蓓;郝瑩瑩;劉娟娟;嚴麗梅;張帆;朱連成;張淑蘭;;1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因轉(zhuǎn)染對卵巢癌細胞RHG-I裸鼠移植瘤血管內(nèi)皮生長因子的影響[A];東北三省第四屆婦產(chǎn)科學術會議論文匯編[C];2008年

6 閆一琳;孔英;馮伯森;張永蓮;朱正美;;巖藻糖化寡糖抗原在附睪中的表達[A];第八屆全國復合糖生物化學與分子生物學學術會議論文摘要論文集[C];2004年

7 王培勝;楊麗麗;王凱文;邰宗洋;王曉禹;宋哲;王濱;鄒向陽;;仿刺參聚巖藻糖硫酸酯對D-半乳糖致衰老小鼠的保護作用及機制研究[A];第三屆泛環(huán)渤海（七省二市）生物化學與分子生物學會——2012年學術交流會論文集[C];2012年

8 劉瀟瀟;李芹英;吳建東;于廣利;;海參煮液多糖的提取分離、結(jié)構(gòu)表征及抗凝血活性的研究[A];2014年中國藥學大會暨第十四屆中國藥師周論文集[C];2014年

9 郝瑩瑩;林蓓;趙越;歐陽玲;張淑蘭;;α1,2巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因轉(zhuǎn)染對卵巢癌細胞生物學行為的影響[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

10 劉瀟瀟;劉麗麗;蔡超;郎銀芝;趙小亮;單鑫迪;于廣利;;沙蠶(Nereis succinea)多糖的提取分離及其理化性質(zhì)分析[A];全國第二屆海洋與陸地多糖多肽及天然創(chuàng)新藥物研發(fā)學術會議論文集[C];2015年

相關重要報紙文章 前1條

1 鄭衛(wèi)生;4種春生野菜有助于防癌[N];中國中醫(yī)藥報;2008年

相關博士學位論文 前10條

1 王秋雁;α1，3巖藻糖轉(zhuǎn)移酶-Ⅶ對人肝癌細胞信號轉(zhuǎn)導、增殖和凋亡的影響[D];復旦大學;2004年

2 郭齊雅;巖藻糖轉(zhuǎn)移酶Ⅵ在肝癌中的功能研究暨α1,3/4巖藻糖轉(zhuǎn)移酶亞家族的生物信息學分析[D];復旦大學;2011年

3 李八方;羊棲菜功能多糖化學及其生物活性研究[D];中國科學院研究生院（海洋研究所）;2003年

4 吳廣智;L1依賴于PLCγ通路調(diào)節(jié)神經(jīng)細胞表面唾液酸化和巖藻糖化作用的研究[D];吉林大學;2009年

5 劉現(xiàn)偉;四種微生物多糖合成相關酶類的生化性質(zhì)與應用研究[D];山東大學;2009年

6 陳士國;幾種海洋動物酸性多糖的結(jié)構(gòu)和活性研究[D];中國海洋大學;2010年

7 盤賽昆;鳙鰓凝集素的分離純化、理化性質(zhì)及生物學活性研究[D];江南大學;2009年

8 常明;依博素生物合成基因ste7、ste26和ste27性質(zhì)功能的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

9 金維華;褐藻中酸性多糖的結(jié)構(gòu)分析及神經(jīng)保護活性研究[D];中國科學院研究生院（海洋研究所）;2014年

10 劉福龍;硼酸吖啶衍生物的設計、合成與活性研究[D];中國海洋大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 伍廣燕;左旋-巖藻糖在高脂飲食誘導非酒精性脂肪肝及腸道菌群紊亂中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2019年

2 王偉陽;組合酶合成GDP-巖藻糖[D];東北師范大學;2018年

3 吳佳燕;遲緩愛_郴鶩ucP蛋白的生物學功能分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2018年

4 荀超超;蛋白N-糖鏈核心巖藻糖探針的合成[D];南昌大學;2014年

5 李平平;L-巖藻糖及其衍生物的合成與優(yōu)化[D];湖南師范大學;2014年

6 閆一琳;巖藻糖化寡糖抗原在附睪中的表達[D];遼寧師范大學;2005年

7 盧崇敏;L-巖藻糖的合成研究及意外發(fā)現(xiàn)[D];陜西師范大學;2013年

8 劉桐桐;GDP-巖藻糖轉(zhuǎn)運體生物學功能的基礎研究[D];大連醫(yī)科大學;2017年

9 肖駿琦;人肝癌HepG_2細胞α-1，3巖藻糖轉(zhuǎn)移酶Ⅳ基因靶向miRNA干擾載體的構(gòu)建及鑒定[D];廣州醫(yī)學院;2010年

10 高岳;不同產(chǎn)地刺參多糖的分離純化及其組分含量的研究[D];大連海洋大學;2015年

本文編號：2700967