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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸黏膜修復(fù)作用的探究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-30 19:30
【摘要】:目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型中受損腸黏膜的修復(fù)作用。方法:BALB/C雌性小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1(DSS+PBS)、實(shí)驗(yàn)組2(DSS+BMSCs),正常對(duì)照組正常飲水,其余2組每天飲用4%的葡聚糖硫酸鈉(Dextran sodium sulfate,DSS)水溶液,造模第8天正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別用磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline,PBS)、BMSCs進(jìn)行干預(yù)治療,并于BMSCs注射后第2、5、9、12、16天處死各組5只小鼠,留取標(biāo)本。根據(jù)小鼠的臨床表現(xiàn)進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分,以評(píng)估疾病的活動(dòng)情況;HE染色檢測(cè)小鼠腸黏膜的損傷及炎癥浸潤情況,免疫組化、酶聯(lián)免疫吸附劑實(shí)驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、實(shí)時(shí)熒光定量(Quantitive Real-time,qRT)-PCR分別檢測(cè)結(jié)腸組織中間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子(c-Mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)、肝細(xì)胞生長因子激活因子(hepatocyte growth factor activator,HGFA)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、干擾素(Interferon,IFN)-γ和結(jié)腸組織緊密連接蛋白的表達(dá)。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組2及實(shí)驗(yàn)組1小鼠DAI評(píng)分和結(jié)腸組織學(xué)損傷評(píng)分均高于正常對(duì)照組,且干細(xì)胞干預(yù)第9天、12天實(shí)驗(yàn)組2評(píng)分低于實(shí)驗(yàn)組1(P0.05);實(shí)驗(yàn)組1小鼠結(jié)腸組織中c-Met、EGFR、PCNA表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組2;BMSCs可影響結(jié)腸黏膜組織中緊密連接蛋白的表達(dá);除干細(xì)胞注射后第2、9天外,實(shí)驗(yàn)組2 HGF的表達(dá)均明顯高于實(shí)驗(yàn)組1(P0.05);HGFA在實(shí)驗(yàn)組1中表達(dá)先下降后上升,但其在三組間的表達(dá)無明顯規(guī)律性差異;實(shí)驗(yàn)組2 IFN-γ的表達(dá)明顯低于實(shí)驗(yàn)組1(P0.05),而TNF-α僅于實(shí)驗(yàn)后期低于實(shí)驗(yàn)組1;結(jié)論:BMSCs對(duì)DSS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型的腸黏膜損傷有促進(jìn)修復(fù)作用。
【圖文】:

小鼠,血便,糞便,棉簽


棉簽均置于酒精燈上加溫片刻,待冷卻(約 1min)%聯(lián)苯胺冰醋酸溶液及 3%過氧化氫液各 2 滴,計(jì)時(shí),觀察顏色及深淺,然后判定結(jié)果。見表 1,圖 1表 1 糞便潛血檢測(cè)Table1 assessment for occult blood in faeces變化 變化快慢 結(jié)果判定或深綠色 立即出現(xiàn) 最強(qiáng)陽性反應(yīng)(++++)淺藍(lán)后漸深藍(lán)或深綠色 30s 內(nèi) 強(qiáng)陽性反應(yīng)(+++)色 30s~1min 陽性反應(yīng)(++) 1~2min 弱陽性反應(yīng)(+)色 2~5min 痕跡反應(yīng)(±)無變化 5min 以后 陰性反應(yīng)(-)涂糞棉簽呈藍(lán)色,而對(duì)照棉簽顏色不變,為陽性反應(yīng);如兩支棉簽均呈藍(lán)色,為假棉簽均不變色,為陰性反應(yīng)。A B

體重下降,情況,水樣便,隱血


大便性狀 大便隱血/肉眼血 正常 正常 松散 隱血陽性 稀便 肉眼血便 方法:聯(lián)苯胺法,見表 1:1.正常大便:成型大便;2.松散大便:不粘附于肛門的呈肛門的呈稀水樣便。濃度 DSS 喂養(yǎng)小鼠體重下降結(jié)果,,3%DSS 組造模時(shí)間長,7%DSS 組小鼠體重進(jìn)行性下降養(yǎng)小鼠體重減輕較其他組平穩(wěn);且結(jié)合各組構(gòu)建結(jié)腸炎所致肝損傷小鼠模型的藥物濃度
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R574.62

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 錢家鳴;楊紅;;中國炎癥性腸病研究的歷史回顧 現(xiàn)狀和展望[J];中國實(shí)用內(nèi)科雜志;2015年09期

2 曹毅;劉濤;尹明麗;張博雅;宋紅麗;;CX3CR1對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)受損腸上皮細(xì)胞的影響[J];世界華人消化雜志;2015年23期

3 連麗瑩;曲波;金世柱;祝芳;仝甲釗;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合干細(xì)胞因子治療炎癥性腸病[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2015年05期



本文編號(hào):2688608

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