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骨髓間充質(zhì)干細胞對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸黏膜修復作用的探究

發(fā)布時間:2020-05-30 19:30
【摘要】:目的:探討骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型中受損腸黏膜的修復作用。方法:BALB/C雌性小鼠隨機分為正常對照組、實驗組1(DSS+PBS)、實驗組2(DSS+BMSCs),正常對照組正常飲水,其余2組每天飲用4%的葡聚糖硫酸鈉(Dextran sodium sulfate,DSS)水溶液,造模第8天正常對照組和實驗組分別用磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline,PBS)、BMSCs進行干預治療,并于BMSCs注射后第2、5、9、12、16天處死各組5只小鼠,留取標本。根據(jù)小鼠的臨床表現(xiàn)進行疾病活動指數(shù)評分,以評估疾病的活動情況;HE染色檢測小鼠腸黏膜的損傷及炎癥浸潤情況,免疫組化、酶聯(lián)免疫吸附劑實驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、實時熒光定量(Quantitive Real-time,qRT)-PCR分別檢測結(jié)腸組織中間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子(c-Mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)、增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)、肝細胞生長因子激活因子(hepatocyte growth factor activator,HGFA)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、干擾素(Interferon,IFN)-γ和結(jié)腸組織緊密連接蛋白的表達。結(jié)果:實驗組2及實驗組1小鼠DAI評分和結(jié)腸組織學損傷評分均高于正常對照組,且干細胞干預第9天、12天實驗組2評分低于實驗組1(P0.05);實驗組1小鼠結(jié)腸組織中c-Met、EGFR、PCNA表達明顯低于正常對照組和實驗組2;BMSCs可影響結(jié)腸黏膜組織中緊密連接蛋白的表達;除干細胞注射后第2、9天外,實驗組2 HGF的表達均明顯高于實驗組1(P0.05);HGFA在實驗組1中表達先下降后上升,但其在三組間的表達無明顯規(guī)律性差異;實驗組2 IFN-γ的表達明顯低于實驗組1(P0.05),而TNF-α僅于實驗后期低于實驗組1;結(jié)論:BMSCs對DSS誘導的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型的腸黏膜損傷有促進修復作用。
【圖文】:

小鼠,血便,糞便,棉簽


棉簽均置于酒精燈上加溫片刻,待冷卻(約 1min)%聯(lián)苯胺冰醋酸溶液及 3%過氧化氫液各 2 滴,計時,觀察顏色及深淺,然后判定結(jié)果。見表 1,圖 1表 1 糞便潛血檢測Table1 assessment for occult blood in faeces變化 變化快慢 結(jié)果判定或深綠色 立即出現(xiàn) 最強陽性反應(++++)淺藍后漸深藍或深綠色 30s 內(nèi) 強陽性反應(+++)色 30s~1min 陽性反應(++) 1~2min 弱陽性反應(+)色 2~5min 痕跡反應(±)無變化 5min 以后 陰性反應(-)涂糞棉簽呈藍色,而對照棉簽顏色不變,為陽性反應;如兩支棉簽均呈藍色,為假棉簽均不變色,為陰性反應。A B

體重下降,情況,水樣便,隱血


大便性狀 大便隱血/肉眼血 正常 正常 松散 隱血陽性 稀便 肉眼血便 方法:聯(lián)苯胺法,見表 1:1.正常大便:成型大便;2.松散大便:不粘附于肛門的呈肛門的呈稀水樣便。濃度 DSS 喂養(yǎng)小鼠體重下降結(jié)果,,3%DSS 組造模時間長,7%DSS 組小鼠體重進行性下降養(yǎng)小鼠體重減輕較其他組平穩(wěn);且結(jié)合各組構(gòu)建結(jié)腸炎所致肝損傷小鼠模型的藥物濃度
【學位授予單位】:桂林醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R574.62

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 錢家鳴;楊紅;;中國炎癥性腸病研究的歷史回顧 現(xiàn)狀和展望[J];中國實用內(nèi)科雜志;2015年09期

2 曹毅;劉濤;尹明麗;張博雅;宋紅麗;;CX3CR1對骨髓間充質(zhì)干細胞修復受損腸上皮細胞的影響[J];世界華人消化雜志;2015年23期

3 連麗瑩;曲波;金世柱;祝芳;仝甲釗;;骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合干細胞因子治療炎癥性腸病[J];胃腸病學和肝病學雜志;2015年05期



本文編號:2688608

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