發(fā)布時(shí)間：2020-05-28 22:59

【摘要】：目的:研究PERK參與重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠脾淋巴細(xì)胞自噬和凋亡的作用及其分子機(jī)制。方法:成年雄性SPF級(jí)SD大鼠50只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(SO組)、SAP組。SAP組大鼠采用5%�；悄懰徕c胰膽管逆行注射法建立SAP模型,SO組大鼠僅翻動(dòng)胰腺后關(guān)腹。SO組術(shù)后24h取材,SAP組術(shù)后6h、12h、18h、24h取材,HE染色觀察胰腺組織病理?yè)p傷程度并進(jìn)行評(píng)分,紫外分光光度計(jì)測(cè)定血清淀粉酶、脂肪酶,透射電鏡觀察大鼠脾淋巴細(xì)胞自噬體,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞凋亡率和自噬率,RT-qPCR、Western blot檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞PERK、自噬相關(guān)基因(Beclin1、LC3)及凋亡相關(guān)基因Caspase-3mRNA及蛋白的表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)大鼠血清自噬相關(guān)基因(Beclin1、LC3)及凋亡相關(guān)基因Caspase-3含量。結(jié)果:(1)與SO組相比,SAP組PERK的表達(dá)水平隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高,在各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)與SO組相比,透射電鏡下脾淋巴細(xì)胞自噬體數(shù)量隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加;與SO組相比,SAP組脾淋巴細(xì)胞自噬率隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高,在各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);SAP組脾淋巴細(xì)胞凋亡率較SO組升高(P0.05),6h達(dá)高峰,隨后下降,但仍高于SO組。PERK蛋白水平與淋巴細(xì)胞自噬率、凋亡率呈正相關(guān)(P0.05),隨著PERK表達(dá)水平升高,脾淋巴細(xì)胞自噬率、凋亡率升高,提示SAP時(shí)PERK信號(hào)通路激活,使淋巴細(xì)胞自噬、凋亡增加。(3)與SO組相比,自噬相關(guān)基因(Beclin1、LC3)表達(dá)明顯升高,在各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),脾淋巴細(xì)胞PERK蛋白水平與脾淋巴細(xì)胞自噬相關(guān)基因(Beclin1、LC3)蛋白水平呈正相關(guān)(P0.05),隨著PERK表達(dá)水平升高,脾淋巴細(xì)胞自噬相關(guān)基因(Beclin1、LC3)蛋白表達(dá)水平升高,可能是其脾淋巴細(xì)胞自噬增強(qiáng)的重要原因;與SO組相比,凋亡相關(guān)基因Caspase-3表達(dá)水平明顯升高,在各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),脾淋巴細(xì)胞PERK蛋白水平與脾淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Caspase-3蛋白水平呈正相關(guān)(P0.05),隨著PERK表達(dá)水平升高,脾淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Caspase-3蛋白表達(dá)水平升高,可能是其脾淋巴細(xì)胞凋亡增強(qiáng)的重要原因。結(jié)論:(1)SAP大鼠脾淋巴細(xì)胞PERK表達(dá)水平明顯升高,淋巴細(xì)胞自噬及凋亡增加。(2)PERK高表達(dá),使自噬相關(guān)基因Beclin1、LC3及凋亡相關(guān)基因Caspase-3表達(dá)水平升高,可能是SAP脾淋巴細(xì)胞自噬、凋亡增強(qiáng)的重要原因。
【圖文】：

SO 組胰腺腺泡結(jié)構(gòu)基本完整，偶見水腫和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；SAP 組可見胰腺腺泡水腫及結(jié)構(gòu)破壞，間質(zhì)內(nèi)可見紅細(xì)胞滲出、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，，小葉間隔及腺泡間隔增寬，腺泡細(xì)胞有廣泛空泡化、壞死，脂肪液化，偶見腺泡消失，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，病變呈進(jìn)行性加重（圖 2-1）。根據(jù) Schmidt 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，與 SO 組相比，SAP 組各時(shí)間點(diǎn)胰腺病理組織學(xué)評(píng)分有顯著性增加（P＜0.05）（圖 2-2）。

與 SO 組相比aP＜0.05圖 2-2 大鼠胰腺病理?yè)p傷評(píng)分Figure 2-2 Rat pancreatic pathological injury score酶和脂肪酶水平粉酶和脂肪酶水平較低；SAP 組血清淀粉酶和脂肪h 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；SAP 組與 SO 組相比0.05）（表 2-1）。表 2-1 大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶水平（U/L）（ ±s）Table 2-1 Amylase and lipase levels in rat serum (U/L) ( ±s)
【學(xué)位授予單位】：右江民族醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R576

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號(hào)：2685961