發(fā)布時間：2020-05-23 20:52

【摘要】： 目的取大鼠腹腔肥大細胞(PMC)進行體外培養(yǎng),探討內(nèi)毒素對大鼠PMC脫顆粒的影響。 方法取健康雄性Wistar大鼠36只,分離培養(yǎng)大鼠PMC,倒置顯微鏡下觀察細胞的形態(tài);臺盼藍染色觀察細胞活力;甲苯胺藍染色計算細胞純度。加入不同濃度內(nèi)毒素,將細胞分為5個組:①無LPS處理組;②0.5μg/ml LPS處理組;③1μg/ml LPS處理組;④2μg/ml LPS處理組;⑤4μg/ml LPS處理組;置于37℃、5%CO_2培養(yǎng)箱培養(yǎng),2h后在倒置顯微鏡下再次觀察細胞的形態(tài);臺盼藍染色觀察細胞活力;甲苯胺藍染色觀察細胞脫顆粒情況;熒光法測定上清液中組胺水平;專性底物α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-P-硝基苯胺(BAPNA)法測定上清液中類胰蛋白酶水平;ELISA法檢測上清液中細胞因子IL-4、IL-10的濃度;放免法檢測上清液中細胞因子TNF-α的濃度。 結(jié)果 1、倒置顯微鏡下觀察大鼠PMC半貼壁生長,細胞呈圓形或橢圓形,邊緣清晰,胞漿內(nèi)可見大小不等的顆粒。甲苯胺藍染色顯示:不同濃度LPS處理組與無LPS處理組相比大鼠PMC脫顆�，F(xiàn)象較明顯,在1μg/ml LPS處理組時,細胞脫顆粒最明顯。 2、加入不同濃度LPS培養(yǎng)2h后: 1)各組中大鼠PMC的存活率均在90%以上,且各組間無顯著性差異(P＞0.05)。 2)不同濃度LPS處理組中大鼠PMC釋放組胺和類胰蛋白酶水平均高于無LPS處理組,其差別顯著,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),但不同濃度LPS組之間無顯著性差異(P＞0.05)。 3)不同濃度LPS處理組中大鼠PMC釋放細胞因子IL-4、IL-10、TNF-α水平均高于無LPS處理組,其差別顯著,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),但不同濃度LPS組之間無顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論經(jīng)LPS處理后大鼠PMC脫顆粒明顯,釋放組胺、類胰蛋白酶及細胞因子IL-4、IL-10、TNF-α均增加,但釋放量與LPS無明顯劑量依賴性,表明LPS可以誘導(dǎo)PMC脫顆粒釋放炎癥因子,導(dǎo)致肝病病情進展,提示在治療腸源性內(nèi)毒素血癥的同時抑制MC脫顆�？赡軠p輕肝炎的發(fā)生發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R575

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10 傅穎s

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