【摘要】：目的1、證實(shí)在NASH患者肝臟Kupffer細(xì)胞（KCs）中NLRP3炎癥小體的表達(dá)。2、初步探討NLRP3炎癥小體在游離脂肪酸（FFA）激活離體KCs所致炎癥反應(yīng)中可能發(fā)揮的作用。 方法1、收集疑似非酒精性脂肪性肝炎患者肝臟標(biāo)本，進(jìn)行HE、MASSON染色，根據(jù)NAS積分分組：NAS積分4分為NASH組（5例），NAS積分3分為對(duì)照組（4例），同時(shí)進(jìn)行免疫組化檢測(cè)KCs、NLRP3、caspase-1等表達(dá)。2、通過(guò)膠原酶原位灌注+Percoll細(xì)胞分離液密度梯度離心方法分離小鼠KCs，鑒定后給予FFA刺激，觀(guān)察其形態(tài)變化，Western blot檢測(cè)刺激前后NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白的表達(dá)水平明，ELISA進(jìn)一步檢測(cè)KCs分泌的IL-1、IL-18的變化。 結(jié)果1、NASH患者肝臟不僅有肝細(xì)胞廣泛的脂肪變、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、膠原纖維增生，還有KCs大量的聚集與激活，同時(shí)KCs中NALP3炎癥小體及caspase-1表達(dá)也明顯增加。2、離體培養(yǎng)的KCs被FFA刺激后， NLRP3（WB：0.565±0.027）、Caspase-1（WB：0.541±0.031）、ASC（WB：0.594±0.038）蛋白的表達(dá)水平較對(duì)照組NLRP3（WB：0.148±0.018）、Caspase-1（WB：0.122±0.007）、ASC（WB：0.128±0.015）明顯增加（p＜0.001）；IL-1（578±36.21pg/ml）、IL-18（197±27.16pg/ml）表達(dá)水平與對(duì)照組IL-1（26.34±7.36pg/ml）、IL-18（22.17±6.28pg/ml）也隨之增加（p＜0.05）。 結(jié)論1.NASH患者肝臟KCs中存在NLRP3炎癥小體的表達(dá)與激活，KCs中NALP3炎癥小體的激活可能導(dǎo)致炎癥因子的釋放和肝細(xì)胞損傷，在NASH的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。2. FFA對(duì)KCs存在明顯脂毒性，F(xiàn)AA誘導(dǎo)KCs炎癥反應(yīng)可能為NLRP3介導(dǎo)，繼而使NLRP3、ACS、Caspase-1蛋白表達(dá)以及IL-1、IL-18的分泌增加；干擾NLRP3可能會(huì)是治療FAA致肝臟炎性損傷的新方向。
【圖文】：

圖 1 ：NASH 患者肝臟標(biāo)本的 HE 染色（左）及 Masson 染色（右）（光鏡,×400）。Fig.1 HE(left) and Masson(right) staining for the liver specimens（×400）.3.2 免疫組化結(jié)果免疫組織化學(xué)染色檢測(cè) NALP3 蛋白的表達(dá)，棕色顆粒狀物質(zhì)為陽(yáng)性結(jié)果常肝臟組織中棕色顆粒物質(zhì)極少，且均勻分散在肝組織內(nèi)，而 NASH 患者肝織中 NALP3 的表達(dá)明顯上調(diào)，且集中于匯管區(qū)（圖 2）。

圖 1 ：NASH 患者肝臟標(biāo)本的 HE 染色（左）及 Masson 染色（右）Fig.1 HE(left) and Masson(right) staining for the liver specim3.2 免疫組化結(jié)果免疫組織化學(xué)染色檢測(cè) NALP3 蛋白的表達(dá)，棕色顆粒常肝臟組織中棕色顆粒物質(zhì)極少，且均勻分散在肝組織內(nèi)，織中 NALP3 的表達(dá)明顯上調(diào)，且集中于匯管區(qū)（圖 2）。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R575.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 汪謙，夏穗生，姜漢英，楊萍，廖永芳，余源;大鼠肝細(xì)胞、Kupffer和Ito細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;1994年02期

2 沈鈞康,蔣震,周劍影,黃文才,趙培峰,張彩元,陸雪官,田野;放射性肝損傷早期效應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究——Kupffer細(xì)胞數(shù)量與功能評(píng)價(jià)[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2004年06期

3 全宏勛!450003鄭州,鄒丹!450003鄭州,胡群?jiǎn)T!450003鄭州,馬新峰!450003鄭州;Kupffer細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)輻射小鼠粒單系血細(xì)胞發(fā)生的影響[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2001年03期

4 楊漢豐,周翔平,宋彬,陳憲,白紅利,鐘克祥,孫家瑜,張紅英,張青;肝內(nèi)局灶性病變菲立磁增強(qiáng)MRI-組織病理相關(guān)性研究[J];中華放射學(xué)雜志;2005年02期

5 陳平，韓本立，王敖川;Studies　of　the　effects　of　heparin，dexamethasone　and　ibuprofen　on　clearance　function　of　hepatic　Kupffer　cell　complement　recept[J];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)(英文版);1994年03期

6 施鑫,李保仝,黎介壽;大鼠肝Kupffer細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2000年04期

7 李銳，韓本立，李昆，彭志明，，段恒春;急性膽管炎早期Kupffer細(xì)胞激活對(duì)肝細(xì)胞能量代謝的影響[J];中華消化雜志;1996年02期

8 李早榮;王曉君;壽爽;吳秋花;;富含Auer小體的早幼粒細(xì)胞白血病一例[J];浙江檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2007年01期

9 王君,夏雪雁,彭仁t,陳效;當(dāng)歸多糖對(duì)大鼠Kupffer細(xì)胞免疫功能的激活作用[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2004年03期

10 王軒,吳孟超,楊甲梅,許正昌,殷廣福;雷抑素對(duì)肝移植大鼠肝Kupffer細(xì)胞的影響[J];肝膽外科雜志;1998年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 曾天舒;劉豐民;陳璐璐;;清除Kupffer細(xì)胞改善高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟胰島素抵抗[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 劉春秀;余涵燕;王絢;;前列腺液PH值變化與卵磷脂小體變化的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第六屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

3 吳河水;張進(jìn)祥;王琳;張錦輝;王慧;鄭啟昌意;;氯化釓下調(diào)小鼠肝臟部分缺血再灌注損傷模型中缺血肝葉TLR2的表達(dá)及其義[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會(huì)第十二屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

4 沈鈞康;蔣震;周劍影;趙培峰;張彩元;陸雪官;田野;;MRI菲立磁增強(qiáng)掃描對(duì)急性初期肝放射性損傷的初步實(shí)驗(yàn)觀(guān)察[A];全國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議（CMIT-2004）論文匯編[C];2004年

5 劉功祿;趙永波;;額顳癡呆的神經(jīng)病理及分子遺傳學(xué)研究[A];2011全國(guó)老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

6 宮玉香;常志尚;張忠廣;曾憲忠;譚金山;趙蓉;王元松;;卡氏肺孢子蟲(chóng)超微結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步觀(guān)察[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

7 湯自豪;周小鷗;高興政;;雙氫青蒿素體外抗陰道毛滴蟲(chóng)作用的電鏡觀(guān)察[A];全國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

8 黃力;Roger McMacken;;DNA超螺旋在λ噬菌體DNA復(fù)制起始過(guò)程中的作用[A];生命科學(xué)與生物技術(shù)：中國(guó)科協(xié)第三屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];1998年

9 常德貴;尤耀東;張朝德;蔣建春;吳天浪;陳文英;;前泌通片對(duì)氣滯血瘀型慢性前列腺炎患者EPS中IL-8和TNF-α的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十一屆男科學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2011年

10 李朝波;高登慧;李秀富;;黑斑蛙腎的組織結(jié)構(gòu)觀(guān)察[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 張泳;電腦自學(xué)小體會(huì)[N];中國(guó)電腦教育報(bào);2002年

2 ;小信用體系的試點(diǎn)[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年

3 陳學(xué)�！≠苡浧� 張輝;小小體彩銷(xiāo)售機(jī)“絆倒”丹陽(yáng)四官員[N];鎮(zhèn)江日?qǐng)?bào);2009年

4 副主任醫(yī)師 林利華;前列腺液主要含三種成分[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年

5 ;在蒙特卡洛[N];中國(guó)體育報(bào);2000年

6 新華社記者 葉再春;小西瓜大啟示[N];新華每日電訊;2001年

7 ;守住你的法律底線(xiàn)[N];檢察日?qǐng)?bào);2000年

8 天津中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)研究中心 郭義邋王廣軍;經(jīng)絡(luò)形態(tài)學(xué)研究告訴了我們什么[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2008年

9 ;羊的病毒性傳染病[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2009年

10 劉牧　倪志軍;軍人的勇敢、忠誠(chéng)與犧牲[N];解放軍報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 高小鵬;RvE_1對(duì)肝缺血再灌注損傷中Kupffer細(xì)胞活化調(diào)控作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 謝小軍;Kupffer 細(xì)胞調(diào)控Th17細(xì)胞分化及其在大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)中的作用研究[D];浙江大學(xué);2011年

3 成名翔;NBD多肽抑制Kupffer細(xì)胞激活改善大鼠肝移植缺血再灌注損傷的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

4 魏思東;Kupffer細(xì)胞中GITRL促進(jìn)肝臟炎癥與移植排斥反應(yīng)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

5 游海波;Twist-2在Kupffer細(xì)胞內(nèi)毒素耐受形成機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

6 李金政;抑制Kupffer細(xì)胞microRNA-155活性誘導(dǎo)小鼠肝移植免疫耐受的機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

7 侯玉芳;小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜的構(gòu)建[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 姜雪強(qiáng);脂氧素對(duì)急性肝衰竭的保護(hù)作用及其作用機(jī)制探討[D];華中科技大學(xué);2011年

9 朱平;NALP3炎癥小體參與小鼠肝臟缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2011年

10 劉小明;氧化應(yīng)激狀態(tài)下維持黑素小體蛋白低免疫原性的分子機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 朱稀雯;Kupffer細(xì)胞中NLRP3炎癥小體在非酒精性脂肪肝炎中的作用機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

2 黃海t;非酒精性脂肪性肝病中Kupffer細(xì)胞激活方式的研究[D];浙江大學(xué);2013年

3 柴躍龍;參附改善大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer細(xì)胞激活的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

4 王子愷;膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大鼠肝臟Kupffer細(xì)胞膽汁酸受體TGR5及其mRNA表達(dá)的作用[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

5 蔡華忠;Clodronate脂質(zhì)體對(duì)急性壞死性胰腺炎大鼠Kupffer細(xì)胞凋亡的作用[D];江蘇大學(xué);2010年

6 張利利;非酒精性脂肪肝大鼠Kupffer細(xì)胞表型及抗原提呈功能研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

7 連崢嶸;HDAC11對(duì)脂多糖處理的Kupffer細(xì)胞免疫耐受誘導(dǎo)功能的影響及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

8 陳芳艷;肝纖維化發(fā)生發(fā)展及逆轉(zhuǎn)過(guò)程中kupffer細(xì)胞表型的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

9 方潮;弓形蟲(chóng)感染與NLRP3炎癥小體相關(guān)性的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

10 張瑩;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)果糖誘發(fā)的小鼠肝臟SREBP-1c激活和脂質(zhì)沉積：Kupffer細(xì)胞的關(guān)鍵作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2671840