【摘要】： 目的:通過體外實(shí)驗(yàn)研究NF-κB信號(hào)通路在幽門螺桿菌引起慢性胃炎的機(jī)制中所起的作用,以及評(píng)價(jià)特異性調(diào)節(jié)NF-κB活性對(duì)于減輕幽門螺桿菌引起的慢性炎癥反應(yīng)的作用,為將來的動(dòng)物及臨床實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備,為阻斷慢性炎癥向胃癌發(fā)展這一進(jìn)程提供依據(jù),從而為最終解決由幽門螺桿菌所引起的慢性胃炎等疾病提供有效的方案。 方法:分別培養(yǎng)幽門螺桿菌11637標(biāo)準(zhǔn)菌株以及人胃粘膜上皮細(xì)胞(GES-1),將GES-1細(xì)胞分為3組:空白組、GES-1+Hp組及GES-1+Hp+NF-κB抑制劑組,每組各做10例,在后兩組中按細(xì)胞與細(xì)菌為1:50的量加入Hp11637菌株,共培養(yǎng)24小時(shí)后,提取上清液用ELISA法檢測(cè)IL-8、TNF-α的含量,裂解細(xì)胞,用Western Blot法檢測(cè)NF-κB的表達(dá)含量。以空白組為對(duì)照分別比較Hp及NF-κB抑制劑對(duì)于NF-κB信號(hào)通路的影響作用。 結(jié)果:1、成功培養(yǎng)Hp11637標(biāo)準(zhǔn)菌株及GES-1細(xì)胞。2、在GES-1細(xì)胞中加入Hp菌株后共培養(yǎng)24小時(shí)后提取上清液再次進(jìn)行Hp培養(yǎng),Hp培養(yǎng)成功。3、在GES-1細(xì)胞中按比例加入定量的Hp菌株,共培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)上清液中的IL-8、TNF-α含量,較空白組明顯升高(p0.05),裂解細(xì)胞后檢測(cè)裂解液中的NF-κB表達(dá)量較空白組升高(p0.05)。4、在GES-1細(xì)胞中加入定量的Hp菌株以及特異性NF-κB信號(hào)通路抑制劑,共培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)上清液中的IL-8、TNF-α含量,與僅加入Hp的干預(yù)組相比,表達(dá)量有所降低(p0.05),裂解細(xì)胞后檢測(cè)裂解液中的NF-κB表達(dá)量較干預(yù)組降低(p0.05),但較空白組升高(p0.05)。 結(jié)論:NF-κB信號(hào)通路在幽門螺桿菌引起慢性胃炎的發(fā)病機(jī)制中起到核心作用,采用特異性阻斷NF-κB信號(hào)通路的方法可以有效減少幽門螺桿菌誘導(dǎo)的炎性因子的分泌。
【圖文】：

27圖 10本實(shí)驗(yàn)首先進(jìn)行了細(xì)菌及細(xì)胞的分別培養(yǎng)，，擴(kuò)增了 Hp 標(biāo)準(zhǔn)菌株（11637 菌株，CagA+），以及人胃粘膜上皮細(xì)胞株 GES-1 細(xì)胞，為試驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⒌於顺醪降幕A(chǔ)。其次，利用培養(yǎng)的 Hp11637 菌株感染 GES-1 細(xì)胞，在細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境中培養(yǎng)了24 小時(shí)[28]，觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，可見細(xì)胞受損嚴(yán)重，出現(xiàn)變圓、腫脹，甚至出現(xiàn)碎裂、崩解的現(xiàn)象。提取此時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)液，接種于特制的 Hp 培養(yǎng)基上，2 天后可見Hp 菌落生長(zhǎng)，掛下細(xì)菌進(jìn)行 Hp 的鑒定，革蘭染色后可于油鏡下（10×100 倍）見到革蘭氏陰性的短桿菌，快速尿素酶試驗(yàn)為強(qiáng)陽性。說明 Hp 可定植于胃粘膜細(xì)胞上，可
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R573.3;R735.2

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 苗益輝;煤礦工人幽門螺桿菌感染胃癌細(xì)胞系NF-κB表達(dá)水平的研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2669462