【摘要】:目的:隨著5%;悄懰徕c鹽溶液逆行胰膽管穿刺給藥誘導(dǎo)的SD大鼠急性胰腺炎模型生存時(shí)間的延長(zhǎng),胰腺炎嚴(yán)重程度的變化,與細(xì)胞凋亡壞死有關(guān)的蛋白c FLIP、Caspase-8的表達(dá)情況及其與急性胰腺炎病情的關(guān)系。方法:用24G靜脈留置針經(jīng)十二指腸乳頭對(duì)側(cè)腸壁胰膽管逆行穿刺并注入5%;悄懰徕c鹽溶液的方法構(gòu)建SD大鼠急性胰腺炎模型,共設(shè)置5組,分別為:實(shí)驗(yàn)組給藥后3h組、6h組、12h組、24h組及對(duì)照組未給藥后12h組。于造模成功后,腹腔麻醉下解剖大鼠,大體觀(guān)察其胰腺、胰腺周?chē)M織、腸系膜、大網(wǎng)膜有無(wú)皂化斑及有無(wú)腹水、腹水的量和性質(zhì)的變化,并利用稱(chēng)重的方法統(tǒng)計(jì)各SD大鼠模型組的腹水量(腹水量=濕棉球重量-干棉球重量)(g);采用HE染色對(duì)胰腺組織標(biāo)本進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分,并于顯微鏡下觀(guān)察標(biāo)本的病理學(xué)改變;采用Western blot技術(shù)分析各模型組的胰腺組織蛋白c FLIP與Caspase-8的表達(dá)情況。結(jié)果:各組SD大鼠急性胰腺炎模型造模成功后,于禁食不禁水的情況下,均達(dá)到了實(shí)驗(yàn)預(yù)定的生存時(shí)間。根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組的要求不同,于相應(yīng)時(shí)間段內(nèi)處理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型后,觀(guān)察到隨著急性胰腺炎動(dòng)物模型生存時(shí)間的延長(zhǎng),其腹水量也逐漸增加,腹水呈淡紅色,并且顏色逐漸加深,其中實(shí)驗(yàn)組術(shù)后12h組和術(shù)后24h組的大鼠大網(wǎng)膜、腸系膜及胰腺周?chē)忻黠@的皂化斑。與未給藥12h組相比,實(shí)驗(yàn)組急性胰腺炎模型的胰腺組織顯示不同的病理?yè)p害,并且隨著SD大鼠生存時(shí)間的延長(zhǎng),其胰腺組織損害程度也逐漸加重,未給藥后12h組VS給藥后3h組VS給藥后6h組VS給藥后12h組VS給藥后24h組(水腫:0.25±0.27 VS 2.17±0.26VS 2.58±0.20 VS 2.92±0.38 VS 3.92±0.20;胰腺腺泡壞死:0 VS 0.50±0.00 VS0.67±0.26 VS 1.58±0.38 VS 3.25±0.52;出血及脂肪壞死:0 VS 0.58±0.20 VS1.00±0.32 VS 1.92±0.38 VS 2.50±0.00;炎癥細(xì)胞浸潤(rùn):0 VS 0.58±0.20 VS1.08±0.20 VS 1.75±0.27 1.75±0.27 VS 2.83±0.26)。隨著急性胰腺炎模型生存時(shí)間的延長(zhǎng),反應(yīng)其凋亡程度的指標(biāo)Caspase-8逐漸降低,給藥后3h組VS給藥后6h組VS給藥后12h組VS給藥后24h組(592.20 VS 457.82 VS 387.50 VS 363.50)。c FLIP-S蛋白表達(dá)水平與Caspase-8呈現(xiàn)相反的表達(dá)趨勢(shì),給藥3h組VS給藥6h組VS給藥12h組VS給藥24h組(430.37 VS 493.49 VS 545.58 VS 595.97)。結(jié)論:隨著SD大鼠急性胰腺炎模型生存時(shí)間的延長(zhǎng),胰腺組織壞死程度逐漸加重,而胰腺細(xì)胞凋亡程度逐漸減輕。Caspase-8的表達(dá)水平與胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡呈正相關(guān),而與胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死呈負(fù)相關(guān)。c FLIP-S與胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死呈正相關(guān),而與胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡呈負(fù)相關(guān)。c FLIP-S、Caspase-8將可以成為臨床上早期評(píng)估AP患者的病情、診療效果和臨床預(yù)后的實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)。
【圖文】:
經(jīng)十二指腸乳頭對(duì)側(cè)腸壁逆行胰膽管穿刺

SD大鼠動(dòng)物模型大體標(biāo)本:給藥術(shù)后12h組和給藥術(shù)后24h組的A、B的位置可見(jiàn)明顯的皂化斑
【學(xué)位授予單位】:廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R576
【參考文獻(xiàn)】
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2666450
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