【摘要】： 目的研究HBeAg陽性慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B, CHB)患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)全基因組基因變異及其與干擾素α(interferon,IFN)療效的關(guān)系。 方法PCR擴(kuò)增并克隆干擾素治療前慢性乙型肝炎患者血清中HBV全基因組DNA,測序并進(jìn)行基因變異分析。 結(jié)果獲得干擾素治療前慢性乙型肝炎患者來源的33株HBV全基因組DNA,它們均屬于C或B基因型。與標(biāo)準(zhǔn)株相比,HBV缺失變異在B、C基因型間的發(fā)生率分別為14.3%(2/14)和63.2%(12/19)。其中,HBV pre-S2 nt19-nt56缺失突變只發(fā)生在C基因型干擾素治療有效的患者中,發(fā)生率為15.2%(5/33),占C基因型有效病例的50%(5/10)；TP+space區(qū)6株缺失變異HBV全基因組DNA中,5例干擾素治療無效,1例有效。HBV插入突變一例,3460bp,B基因型,干擾素治療無效。HBV點(diǎn)突變結(jié)果顯示：4例C基因型ntG2699T變異為干擾素有效病例,占C基因型有效病例的40%,且發(fā)生在無pre-S2缺失的病例中。因此,pre-S2缺失變異和ntG2699T變異占C基因型有效病例的90%,可作為預(yù)測干擾素應(yīng)答的因素。另外,體外實(shí)驗(yàn)有抗干擾素作用的T1504C、A1762T、G1764AG1896A變異在本研究中對干擾素療效無影響。TP257研究發(fā)現(xiàn),B基因型的H135Y和Q176H,C基因型的N89D和K142Q/K142E可能有抗干擾素作用。 結(jié)論HBV缺失變異在B、C基因型間的發(fā)生率存在顯著性差異；HBV pre-S2缺失突變和ntG2699T變異與C基因型干擾素應(yīng)答相關(guān)；B基因型的H135Y和Q176H,C基因型的N89D和K142Q/K142E可能有抗干擾素作用。
【圖文】：

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.加入400林l等體積的飽和酚(Tris一HCIpH8.0)，振蕩混勻，120009，4“C離心10min。.吸取上層水相約350川，加入350閃等體積的酚/氯仿(酚:氯仿:異醇/25:24:1)，振蕩混勻，120009，4“C離心10min。.吸取上層水相約300林l，加入l/10倍體積3MNaAc(約30林l)、20酵母tRNA、2.5倍體積無水乙醇(約1ml)，顛倒混勻，一20“C沉淀DNA或過夜。.12，0009離心15分鐘，棄去上清，D隊(duì)沉淀溶于50灘滅菌去離子水，，于一20“C保存。2.2HBV基因組DNA克隆如下圖2所示:Hind111SaclHBVS，1821一18413，
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

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1 彭R

本文編號：2654413