【摘要】：研究背景 乙型肝炎(hepatitis B,簡稱乙肝)是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹鞑⒖梢鸲嗥鞴贀p害的一種傳染性疾病。該病呈世界范圍流行,易病程遷延,轉(zhuǎn)為慢性肝炎、肝硬化和肝癌,據(jù)世界衛(wèi)生組織報道,全球約20億人曾感染乙肝病毒,每年約100萬人死于HBV感染導(dǎo)致的肝硬化、肝功能衰竭和肝癌等疾病。因此,HBV感染是一個嚴重危害全世界人類健康的公共衛(wèi)生問題。 不同地區(qū)HBV感染的流行強度差異很大,WHO按人群乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)攜帶率將全球劃分為高、中、低3個流行區(qū)域,我國屬于HBV感染高流行區(qū)。而我國不同地區(qū)HBsAg流行率分布也不一致。安徽省一項乙肝流行現(xiàn)況調(diào)查顯示皖江地區(qū)為乙肝的高流行區(qū),自然人群HBsAg流行率達9.8%。而我省農(nóng)村地區(qū)由于基礎(chǔ)條件落后,知識匱乏,資源短缺,乙肝疫苗接種質(zhì)量相對較差,可能導(dǎo)致乙肝流行現(xiàn)況更不容樂觀,因此,為了解我省農(nóng)村地區(qū)人群中乙型肝炎的流行狀況及知識水平,課題組擬對我省某市農(nóng)村地區(qū)展開流行病學(xué)調(diào)查。 不同個體感染HBV后,結(jié)局差異很大,除了病毒本身的影響外,個體的遺傳因素可能是導(dǎo)致HBV感染出現(xiàn)不同結(jié)局的主要原因。近年來,隨著分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于流行病學(xué)研究,大量疾病的相關(guān)易感基因不斷被發(fā)現(xiàn),國內(nèi)外對乙型病毒性肝炎宿主遺傳易感性的研究成果也不斷被報道。整合素是位于細胞膜表面上一類跨膜糖蛋白受體家族分子,在生理和病理過程中發(fā)揮著各種不同的重要功能,研究顯示,肝臟中整合素和ECM蛋白的表達與HBV感染及肝癌的發(fā)展密切相關(guān),在受損的肝臟中,活化的肝星狀細胞表達整合素水平增加。整合素αV(ITGAV)是整合素蛋白之一,一項對韓國乙肝患者的研究顯示,ITGAV基因可能與韓國人群HBV感染和感染后的肝癌遺傳易感性有關(guān),但在中國人群中尚無相關(guān)報道。因此,在中國漢族人群中探討HBV感染慢性化的機理,從個體遺傳易感性的角度探討HBV感染不同結(jié)局的原因可能具有重要的理論和實際意義。同時,越來越多的證據(jù)表明,HBV基因型與肝臟疾病的病情進展、傳播方式和臨床轉(zhuǎn)歸均有一定聯(lián)系,因此課題組對我省某市級醫(yī)院收集HBV感染者進行HBV基因型檢測分析,以了解我省HBV基因型分布特點并探討基因型與肝炎嚴重程度、疾病進展的關(guān)系。研究分為乙肝流行現(xiàn)況和遺傳易感性研究2個部分。 第一部分安徽省某市農(nóng)村地區(qū)乙型肝炎流行現(xiàn)況 目的了解安徽省某市農(nóng)村地區(qū)人群乙型肝炎(簡稱乙肝)的流行狀況及相關(guān)知識掌握情況。 方法以安徽省合肥市為研究現(xiàn)場,對合肥市農(nóng)村地區(qū)居民2038人進行問卷調(diào)查,并采集靜脈血標本3ml,用ELISA方法進行HBsAg及抗-HBs檢測。 結(jié)果在2038例血清標本中,乙肝HBsAg標化流行率為6.44%,抗-HBs標化流行率為46.85%, HBsAg流行率在性別之間無統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=0.559,P0.05),農(nóng)民HBsAg流行率最高,達9.06%,學(xué)生群體HBsAg流行率最低為2.70%。1992年之后出生的群體HBsAg流行率顯著低于1992年之前出生的群體(χ2=8.120,P0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。乙肝疫苗的標化接種率為38.87%,學(xué)生乙肝疫苗接種率最高為85.41%,農(nóng)民乙肝疫苗接種率最低,僅12.19%。乙肝知識得分調(diào)查農(nóng)民群體最低;乙肝知識的三大獲取途徑依次是電視、廣播以及報刊書籍。 結(jié)論調(diào)查地區(qū)人群中HBsAg流行率為6.44%,低于全國平均水平,但抗-HBs水平偏低,農(nóng)村居民對乙型肝炎相關(guān)知識的了解程度偏低,應(yīng)加強農(nóng)村地區(qū)乙肝知識的健康教育,提高乙肝疫苗接種率。 第二部分乙型肝炎的遺傳易感性研究 目的1、探討中國漢族人群ITGAV (rs1839123)對慢性乙肝的易感性。2、了解安徽省某市級醫(yī)院乙型肝炎病毒(HBV)感染住院患者的HBV基因型分布狀況,并探討HBV基因型與肝炎嚴重程度、疾病進展的關(guān)系。 方法1、搜集兩所醫(yī)院的314例HBV感染者和健康對照476例,按性別和年齡進行匹配,所有病人的HBsAg都通過ELISA進行檢測與診斷,同時排除其他類型肝病,如酒精性肝病,自身免疫性肝病和代謝性肝病者均未列入病例組中。此外,抗HCV陽性者也未被納入病例組。設(shè)計問卷,采集研究對象的臨床、實驗室和一般流行病學(xué)資料及外周血,提取DNA凍存,結(jié)合ABI 7300 PCR儀的基因分型技術(shù),檢測ITGAV (rs1839123)基因型和等位基因頻率;利用χ2檢驗比較位點在病例組和對照組中是否達到遺傳平衡以及兩組間分布是否存在差異,以P0.05判定為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 2、選取一所醫(yī)院48例HBV感染者進行基因型檢測分析:采用PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù),進行熒光PCR分型檢測。HBV血清標志物的檢測應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法(CMIA)。HBV-DNA含量應(yīng)用實時熒光定量方法檢測。 結(jié)果1、ITGAV (rs1839123)基因多態(tài)性與HBV感染者遺傳易感的相關(guān)性研究:(1)哈迪-溫伯格平衡(HWE)檢驗:經(jīng)χ2檢驗,無論病例組還是對照組,位點rs1839123的基因型頻率均符合HWE定律(病例組:χ2=0.099,P=0.754;對照組:χ2=0.464,P=0.496)。 (2)相關(guān)性結(jié)果:病例組中A,G等位基因頻率依次為17.68%和82.32%,GG,GA,AA基因型頻率依次為67.52%,29.62%和2.86%。研究結(jié)果表明ITGAV(rs1839123)多態(tài)性與HBV感染不具有相關(guān)性。2、HBV基因型檢測分析:48例HBV感染患者中HBV B基因型1例(占2.08%),C基因型35例(占72.92%),未分型12例(占25.00%),未發(fā)現(xiàn)B、C混合型和D型。不同基因型在性別、年齡方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);在HBV攜帶者、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝細胞癌中B、C基因型的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);C基因型中HBeAg陽性率為42.86%。HBV-DNA陽性率在各基因型間分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論1、ITGAV(rs1839123)的基因型頻率符合HWE定律,其基因多態(tài)性與HBV感染遺傳易感性的關(guān)系研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)任何等位基因或者基因型與慢性乙肝具有相關(guān)性,因此,ITGAV(rs1839123)的基因多態(tài)性可能與中國漢族人群慢性乙肝的遺傳易感性無關(guān)。 2、調(diào)查市HBV基因型分布以C型為主,HBV-DNA水平在基因型間的差異提示C基因型感染者可能與肝炎病情發(fā)展有關(guān)。
【圖文】：

2.6.2 實驗質(zhì)量控制(1)專人負責(zé)實驗室質(zhì)量控制，嚴格按照《實驗室操作規(guī)程》進行實驗室工作；(2)按照實驗操作技術(shù)和試劑盒檢測說明書的要求進行規(guī)范操作；(3)盡量保證每次實驗條件的一致性，實驗室條件穩(wěn)定后進入正式實驗；(4)實驗操作過程和實驗資料由專人監(jiān)督，確保無誤；(5)兩名專業(yè)實驗技術(shù)人員分別完成實驗結(jié)果的判讀，不一致的判讀結(jié)果由第三人重新核對，，確定最后結(jié)果。3 結(jié)果3.1 ITGAV (rs1839123)基因多態(tài)性與 HBV 感染者遺傳易感的相關(guān)性研究結(jié)果3.1.1 ITGAV (rs1839123)基因多態(tài)性位點的基因分型結(jié)果(圖 1)
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R512.62

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳科偉;熊自忠;;乙肝病毒基因型研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2010年04期

2 何明嬌;徐玉苑;賴雪梅;丘保華;林錦絨;奚麗鸞;籃蘭英;黃少賢;;乙肝免疫球蛋白對乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦初乳的影響及其母乳喂養(yǎng)的研究[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年07期

3 湯小湄;肖小敏;酈愛貞;范yN;;HBV攜帶產(chǎn)婦不同喂養(yǎng)方式對嬰兒的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年04期

4 張智;張珍;李楠;李澤泳;李亞紅;;185例廣東人乙型肝炎病毒基因分型及耐藥基因檢測[J];廣東醫(yī)學(xué);2008年01期

5 王曉軍,張榮珍,胡苑笙,梁曉峰;我國病毒性肝炎流行現(xiàn)狀研究[J];疾病監(jiān)測;2004年08期

6 劉懷珠,劉旭祥,陸群,張慶枝,劉先敏,徐鳳霓,王海;合肥市病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查[J];疾病控制雜志;2003年05期

7 謝琴秀,許家璋,李平,楊志國,孟運運,李旭;江蘇地區(qū)乙型肝炎病毒基因分型及其臨床意義[J];疾病控制雜志;2005年02期

8 李瑞芳;鄧建;張連山;馬艷霞;郭娜娜;郭瑞玲;;母親乙型肝炎病毒攜帶狀況與新生兒乙肝疫苗免疫效果關(guān)系的探討[J];中華疾病控制雜志;2010年01期

9 宋婷婷;單芙香;程錦泉;尹平;;乙肝疫苗和免疫球蛋白阻斷乙肝母嬰傳播效果研究[J];中華疾病控制雜志;2011年06期

10 蘇成豪;許龍善;;乙型肝炎流行病學(xué)研究進展[J];旅行醫(yī)學(xué)科學(xué);2008年01期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 馮曉明;池州市貴池區(qū)農(nóng)村人群乙型肝炎感染現(xiàn)況研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

2 周麗鴻;安徽省皖江部分地區(qū)自然人群乙型肝炎流行現(xiàn)況[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號：2653895