發(fā)布時間：2020-05-06 13:37

【摘要】：目的：HCV感染后大約80％可發(fā)展成慢性丙型肝炎（chronic hepatitisC，CHC），目前HCV感染慢性化的確切機(jī)制尚不明確。在感染初期機(jī)體缺乏強(qiáng)有力的HCV特異性CD4~+和CD8~+T淋巴細(xì)胞免疫應(yīng)答可能是其呈慢性化發(fā)展的主要原因之一。程序性死亡受體-1（programmed death-1，PD-1）是表達(dá)于T細(xì)胞和B細(xì)胞表面的負(fù)性共刺激分子，在T、B細(xì)胞的免疫應(yīng)答中起負(fù)向調(diào)控作用。PD-1與其配體PD-L1或PD-L2結(jié)合，可以削弱、限制或終止T細(xì)胞發(fā)揮功能。最近有研究發(fā)現(xiàn)，慢性HCV感染患者外周血T細(xì)胞PD-1的表達(dá)明顯高于正常人，同時T細(xì)胞處于功能耗竭狀態(tài)。然而，在應(yīng)用干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療的過程中，隨著HCV-RNA的下降，T淋巴細(xì)胞及其表面PD-1的表達(dá)變化情況鮮有報(bào)道。本研究旨在探討在CHC抗病毒治療過程中，隨著HCV-RNA的下降，外周血CD4~+T細(xì)胞和CD8~+T細(xì)胞及其表面PD-1的表達(dá)變化情況及其意義。 方法：選取慢性HCV感染者25例，其中男性患者11例，女性患者14例，所有患者均符合抗病毒治療標(biāo)準(zhǔn)，且半年之內(nèi)未經(jīng)其他抗病毒治療及免疫調(diào)節(jié)治療，所有患者均應(yīng)用聚乙二醇干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療，以抗病毒治療的0周、4周、12周、24周及48周分組。健康對照10例。 1所有受試者留取新鮮抗凝外周靜脈血，采用密度梯度離心法分離外周血單核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC），用CD3-ECD、CD4-FITC、CD8-PE-Cy5、PD-1-PE抗體進(jìn)行染色，并應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血CD4~+T細(xì)胞和CD8~+T細(xì)胞及其表面的PD-1的表達(dá)情況。 2所有受試者留取新鮮抗凝外周靜脈血，密度梯度離心法分離PBMC，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）的方法，檢測PBMC上PD-1mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1臨床轉(zhuǎn)歸：25例患者中18例（72%）獲得RVR；5例（20%）獲得EVR；2例（8%）獲得PVR；25例（100%）獲得ETVR。 2CHC患者在抗病毒治療過程中，T細(xì)胞亞群的變化：與正常對照組相比，丙型肝炎患者CD4~+T增高，CD8~+T降低，，CD4~+/CD8~+增高，除48周組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他各組均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療后，與0周組比較，CD4~+T細(xì)胞逐漸降低，除4周組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他各組均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；CD8~+T細(xì)胞逐漸升高，均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；CD4~+/CD8~+逐漸降低，均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 3CHC患者在抗病毒治療過程中，CD4~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)變化：與正常對照組（2.92±0.87）相比，丙型肝炎患者CD4~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)（0、4、12、24、48周組：8.95±1.55，6.53±1.06，6.42±0.87，5.12±0.58，4.42±0.58）明顯升高（P＜0.01）；干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療后，CD4~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)逐漸降低，與0周組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 4CHC患者在抗病毒治療過程中，CD8~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)變化：與正常對照組（1.11±0.39）相比，丙型肝炎患者CD8~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)（0、4、12、24、48周組：5.12±0.87，3.52±0.58，2.62±0.58，1.81±0.29，1.51±0.39）明顯升高（P＜0.01）；干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療后，CD8~+T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)逐漸降低，與0周組比較差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 5RT-PCR法檢測PBMC上PD-1mRNA的表達(dá)：與正常對照組（0.81±0.01）相比，丙型肝炎患者PBMC上PD-1mRNA的表達(dá)（0、4、12、24、48周組：1.48±0.09，1.36±0.02，1.19±0.01，1.02±0.01，0.82±0.03）明顯升高（P＜0.01或0.05）；干擾素聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療后，PBMC上PD-1mRNA的表達(dá)逐漸降低（P＜0.01或0.05）。 結(jié)論： 1慢性丙型病毒性肝炎患者體內(nèi)存在著T細(xì)胞亞群失衡，抗病毒治療可以使失衡的T細(xì)胞亞群趨于恢復(fù)正常，提示T細(xì)胞亞群失衡與HCV感染的慢性化有關(guān)，T淋巴細(xì)胞在清除HCV中發(fā)揮重要作用。 2慢性丙型肝炎患者，CD4~+T和CD8~+T細(xì)胞表面PD-1及PBMC上PD-1mRNA的表達(dá)增強(qiáng)，隨著抗病毒時間的延長和HCV-RNA的降低，其表達(dá)逐漸降低，提示PD-1的高表達(dá)與HCV-RNA的復(fù)制有關(guān)，PD-1的表達(dá)變化可以預(yù)測CHC抗病毒治療的療效。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R512.63

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 楊秀華;劉冰熔;姜洪池;李樹臣;;干擾素α-2b聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎患者肝內(nèi)免疫細(xì)胞的變化[J];中華肝臟病雜志;2006年12期

本文編號：2651350