【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV, Hepatitis B Virus)感染是常見的傳染性疾病之一,不僅能引起急、慢性病毒性肝炎,而且與肝纖維化、肝細胞癌的發(fā)生發(fā)展密切相關,嚴重威脅人類的健康。目前,治療乙肝的藥物主要有兩類：干擾素與核苷類似物。干擾素(IFN)是由干擾素誘生劑誘導生物細胞后所產(chǎn)生的一類高活性多功能的糖蛋白。1976年Greenberg等首先報道用人白細胞干擾素治療4例慢性活動性乙肝,治療后有2(?)HBeAg消失。此后,干擾素一直被視為治療乙肝的首選藥物,且在歐洲取得了較滿意的治療效果。在亞洲,僅有20-30%的乙肝患者對干擾素治療敏感。前人報導干擾素可以調(diào)節(jié)肝細胞中microRNA-122的表達,且microRNA-122與HBV息息相關。本文通過Real-time PCR,Nanodrop等方法旨在于研究microRNA-122介導干擾素抗HBV復制的可能機制。 首先,通過用IFN-α體外處理Huh7細胞,qRT-PCR檢測Huh7細胞中microRNA-122表達量的變化,發(fā)現(xiàn)1000IU/ml IFN-α可以顯著下調(diào)細胞中microRNA-122的表達。其次,本文成功構建pSuper-miR-122真核表達載體。用pSuper-miR-122或miR-122-mimic與pHBV1.3轉染HepG2細胞,發(fā)現(xiàn)miR-122在體外可以抑制HBV的復制。同時,用miR-122-inhibitor與HBV1.3轉染Huh7細胞,結果表明miR-122-inhibitor在Huh7細胞中具有促進HBV復制的作用。兩項結果分別從正反面表明：miR-122在體外可抑制HBV的復制。再次,為了探求為什么miR-122能抑制HBV, HBV1.3-luci報告基因與miR-122共轉染Huh7細胞,發(fā)現(xiàn)miR-122可能作用于HBV-C的5'非編碼區(qū)。最后,本研究對干擾素、HBV與miR-122進行了綜合實驗分析,得出miR-122負向調(diào)節(jié)IFN抗HBV復制的結論。這個結果對于治療乙肝提供了一條新的方案,主要體現(xiàn)在兩個方面：一、也許可以通過某種方法抵消miR-122在IFN抗HBV復制過程中所起到的負調(diào)控作用而增強IFN治療乙肝的能力；二、可以從miR-122自身出發(fā)設計RNA藥物,直接進行乙肝治療。
【學位授予單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R512.62

【參考文獻】

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1 陳敏,張軍,陳睦傳,夏寧邵;乙型肝炎病毒受體研究進展[J];病毒學報;2002年02期

2 ;Construction and Identification of a Human Liver Specific MicroRNA Eukaryotic Expression Vector[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年06期

3 茹松偉;申衛(wèi)紅;楊鵬程;趙屹;邵啟祥;;microRNA靶基因預測算法研究概況及發(fā)展趨勢[J];生命科學;2007年05期

4 邵虹;張磊;邵晨;許文娟;;乙肝研究的歷史回顧及其哲學思考[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2007年03期

5 王亞文;惠凌云;譚鞏誠;胡志國;王富中;;拉米呋啶治療后病人HBV DNA載量及血清標志物的變化[J];西北藥學雜志;2007年01期

6 邵飛,朱鳳群;乙型肝炎病毒基因分型的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2005年03期

7 范金水,莊輝,李遠貴,朱曉潔,徐德忠,馬為民,王躍民,陳雅潔,婁國強,馬廷賢;我國8城市HBsAg陽性和陰性乙肝患者的病毒血清型和基因型分析[J];中華微生物學和免疫學雜志;1998年02期

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本文編號：2644248