【摘要】： [目的]在慢性乙型肝炎病毒感染的自然史背景下,通過(guò)對(duì)20～40歲年齡段的HBV感染者HBV DNA、HBV M定量及肝功之間的關(guān)系探討,來(lái)發(fā)現(xiàn)它們之間的內(nèi)在聯(lián)系。慢性乙型肝炎的治療策略是基于對(duì)自然病程的認(rèn)識(shí),對(duì)其自然病史的深刻理解,對(duì)改善慢性乙型肝炎的預(yù)后、實(shí)施對(duì)因治療及衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估提供佐證,也為慢性乙肝的發(fā)展規(guī)律提供臨床依據(jù),為其治療提供思路。 [材料與方法] 1.1病例來(lái)源:收集本院2008.7～2009.11月感染病科門(mén)診及住院慢性HBV感染者共1000例,年齡20～40歲,所有病人無(wú)系統(tǒng)使用抗病毒藥物的病史,無(wú)合并其他肝炎病毒感染。診斷符合2005年12月北京公布的《慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。 1.2儀器:美國(guó)PE公司Gene AmP5700定量基因檢測(cè)系統(tǒng)和1235 Auto DELFIA全自動(dòng)時(shí)間分辯熒光免疫分析系統(tǒng);日立7600全自動(dòng)生化分析儀;日本東芝彩色B超儀。 1.3主要試劑:乙型肝炎病毒核酸熒光檢測(cè)試劑盒,由中山大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供;時(shí)間分辯熒光免疫分析乙肝血清標(biāo)志物定量檢測(cè)試劑盒,由蘇州新波生物技術(shù)有限公司提供;ALT檢測(cè)試劑盒,由北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司提供。 1.4方法:①取病人當(dāng)日空腹血,分為3管,分別作HBV DNA定量、HBV M定量和ALT檢測(cè),并同時(shí)進(jìn)行肝臟彩色B超檢查。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。②統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行直線相關(guān)分析、成對(duì)樣本均值用t檢驗(yàn)、多組樣本均值用方差分析,偏態(tài)分布資料的比較采用秩和檢驗(yàn),率的比較采用χ2檢驗(yàn),P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果] 1 20-40歲慢性HBV感染者基本資料 1.1慢性HBV感染者各期的分布狀況:經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件分析,20-40歲慢性HBV感染者在免疫耐受期、免疫清除期、非活動(dòng)性HBV攜帶狀態(tài)、HBeAg陰性慢性乙肝、HBsAg陰性階段所占的比例為28.10%、25.00%、38.50%、8.20%、0.20%。 1.2慢性HBV感染者各期的流病特征:男性患者在免疫清除期和免疫逃逸期的比例明顯高于其在免疫耐受期和非活動(dòng)性HBV攜帶狀態(tài)的比例(P0.05),而女性則相反。慢性HBV感染患者母嬰垂直傳播比例依次降低,垂直傳播感染的患者在免疫耐受期和免疫清除期的比例明顯高于其在免疫控制期和非活動(dòng)性HBV攜帶狀態(tài)的比例(P0.05),而水平傳播則相反。 1.3不同性別在HBV傳播方式上的比較:男、女兩組在垂直傳播和水平傳播這兩種感染途徑的機(jī)率上沒(méi)有顯著性差異(χ2=2.753,P=0.097)。 1.4慢性HBV感染者不同傳播方式其HBsAg水平的結(jié)果比較:垂直傳播的患者HBsAg水平明顯高于水平傳播的患者(t=9.135,P=0.000)。 2 20-40歲慢性HBV感染者臨床資料 2.1通過(guò)對(duì)HBV M含量、ALT與HBV DNA水平之間做Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn),結(jié)果表明HBsAg、HBeAg及ALT與HBV DNA之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.222,P=0.000)、(r=0.780,P=0.000)、(r=0.303,P=0.000); HBeAb與HBV DNA定量之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.755,P=0.000);且HBeAg與HBsAg定量之間有明顯的相關(guān)關(guān)系(r=0.307,P=0.000)。 2.2慢性HBV感染者在HBV DNA各級(jí)水平上HBV M定量的比較:在HBV DNA陽(yáng)性者中,隨著病毒復(fù)制水平的升高,HBsAg水平也是逐漸升高的,而HBeAb水平是逐漸降低的,而HBV DNA在HBeAg陽(yáng)性組明顯高于其在HBeAg陰性組(P0.05)。 2.3慢性HBV感染者ASC組、CHB組、LC組流行病學(xué)特征:ASC組男女比例相當(dāng),但ASC組→CHB組→LC組男性在各組所占的比例明顯增加,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=33.01、23.95、5.01,P=0.000、0.000、0.025);而女性則相反。CHB組、LC組和ASC組在傳播方式比較上沒(méi)有顯著性差異(χ2=0.42、0.08、0.00,P=0.515、0.780、0.968)。 2.4不同臨床類(lèi)型HBV DNA、HBV M定量和ALT之間的比較:HBsAg水平在ASC組、CHB組、LC組逐漸降低(P0.05)。CHB組血清HBeAg定量、HBV DNA水平高于ASC組、LC組(P0.05),而HBeAb水平則明顯低于ASC組、LC (P0.05)。ALT水平在各組間比較具有顯著性差異(P0.05)。 2.5 HBV DNA不同感染模式中HBV M的表達(dá):在1000例慢性HBV感染者中,共出現(xiàn)HBV M陽(yáng)性組合模式9種,主要模式“1,3,5”和“1,4,5”的病毒復(fù)制水平有明顯的差異(t=8.817,P=0.000)。 [結(jié)論] 1.20-40歲慢性HBV感染者處在非活性HBV攜帶狀態(tài)的比例最大,HBsAg陰性階段所占的比例最小。 2.血清中HBV DNA含量與HBsAg、HBeAg定量及ALT之間存在正相關(guān)關(guān)系;HBV DNA與HBeAb定量存在負(fù)相關(guān)關(guān)系;HBsAg和HBeAg定量之間存在正相關(guān)關(guān)系。 3.垂直傳播感染的病例在HbeAg陽(yáng)性組明顯高于其在HbeAg陰性組。 4.男女兩組在傳播方式上沒(méi)有差別,男女在感染機(jī)率是沒(méi)有區(qū)別的,男女對(duì)HBV都普遍易感。 5.傳播途徑可影響慢性HBV感染者的HBsAg水平,垂直傳播的患者HBsAg水平明顯高于水平傳播的患者;低HBsAg水平是免疫控制的標(biāo)志。 6.HBV DNA、HBV M定量及ALT在不同臨床類(lèi)型中的表達(dá)符合慢乙肝的自然病程。
【圖文】：

圖 1. TaqMan 熒光探針工作原理2.2 HBV M 定量檢測(cè)儀為 1235 Auto DELFIA 全自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析系統(tǒng)（美國(guó) PE 公司）TRFIA 技術(shù)的基本原理是以鑭系稀土元素三價(jià)原子銪(Eu3+)及其螯合物作為蹤物，代替熒光物質(zhì)、同位素、酶和化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，標(biāo)記抗原、抗體，當(dāng)與相應(yīng)體或抗原結(jié)合時(shí)，抗原抗體復(fù)合物在增強(qiáng)液中解離，根據(jù) Eu3+離子鰲合物的熒光譜的特點(diǎn)，在特定激發(fā)光激發(fā)下發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光，，并采用解離-增強(qiáng)技術(shù)放有效熒光，最后利用時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀測(cè)定復(fù)合物中稀土離子發(fā)射的熒光強(qiáng)度根據(jù)已知濃度確定的標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)判斷未知樣品的濃度值，從而確定待測(cè)樣品中抗或抗體的濃度值，以達(dá)到定量分析的目的。

圖 1. TaqMan 熒光探針工作原理 HBV M 定量檢測(cè)儀為 1235 Auto DELFIA 全自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫PE 公司）IA 技術(shù)的基本原理是以鑭系稀土元素三價(jià)原子銪(Eu3+)及其螯合替熒光物質(zhì)、同位素、酶和化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，標(biāo)記抗原、抗體，當(dāng)結(jié)合時(shí)，抗原抗體復(fù)合物在增強(qiáng)液中解離，根據(jù) Eu3+離子鰲合物點(diǎn)，在特定激發(fā)光激發(fā)下發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光，并采用解離-增強(qiáng)，最后利用時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀測(cè)定復(fù)合物中稀土離子發(fā)射的熒濃度確定的標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)判斷未知樣品的濃度值，從而確定待測(cè)樣濃度值，以達(dá)到定量分析的目的。
【學(xué)位授予單位】：延安大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2625563