發(fā)布時間：2020-03-26 03:20

【摘要】：背景:多種原因?qū)е碌某掷m(xù)性肝損傷使瘢痕組織逐漸替代正常肝小葉結(jié)構(gòu),引發(fā)肝臟的纖維化,進一步發(fā)展為肝硬化。迄今為止,由于缺少有效的治療手段,肝纖維化依舊是世界范圍的健康難題。肝星狀細胞是肝臟纖維發(fā)生的關(guān)鍵。自然殺傷(Natural Killer,NK)細胞通過抑制肝星狀細胞,進而抑制肝纖維化進展的現(xiàn)象已有報導(dǎo)。在我們實驗室的前期研究中發(fā)現(xiàn),Toll樣受體3的配體poly I:C可以誘導(dǎo)肝Kupffer細胞分泌IL-18,繼而激活NK細胞。由此,我們假設(shè)poly I:C與IL-18可以協(xié)同激活NK細胞,而激活后的NK細胞具有對肝星狀細胞的抑制作用。如果假設(shè)成立,進一步研究NK細胞的激活及其對肝星狀細胞發(fā)揮抑制功能的相關(guān)機制。方法:為了驗證NK細胞的激活,我們首先從健康成人的外周血分離純化NK細胞,體外使用IL-18、poly I:C刺激,通過流式細胞術(shù)檢測NK細胞表型,通過細胞內(nèi)染色與ELISA檢測IFN-γ的分泌。為了研究NK細胞激活的信號傳導(dǎo),我們使用western blot檢測IL-18、poly I:C單獨與共同刺激時,NK細胞內(nèi)部分信號分子的磷酸化。通過細胞共培養(yǎng),研究NK細胞與研究激活后的NK細胞對肝星狀細胞的調(diào)控。肝星狀細胞的凋亡通過PI、AnnexinV的染色鑒定。結(jié)果:IL-18與poly I:C協(xié)同激活NK細胞的CD69和TRAIL的表達,以及IFN-γ的分泌。IL-18與poly I:C通過p38 MAPK/PI3K信號通路激活NK細胞。激活后的NK細胞通過脫顆粒效應(yīng)殺傷肝星狀細胞。激活的NK細胞膜上表達的TRAIL參與了NK細胞對肝星狀細胞的脫顆粒效應(yīng)以及殺傷作用。結(jié)論:IL-18與poly I:C通過p38 MAPK/PI3K協(xié)同激活的NK細胞,通過TRAIL參與的脫顆粒效應(yīng)殺傷肝星狀細胞。
【圖文】：

肝星狀細胞的功能

圖 1.2 NK 細胞殺傷 HSC 的機制[80]基于 IL-18 與 poly I:C 可以提高 NK 細胞的 IFN-γ 的分泌水平以及 TRAIL 的表達水平，我們假設(shè)激活后的 NK 細胞可以殺傷 HSC。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R575

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2600873