【摘要】： 幽門螺桿菌(HP)是一種人群感染率已高達50%以上的常見致病菌,是慢性胃炎和消化性潰瘍的重要致病因子,也是形成胃腺癌、胃MALT淋巴瘤的主要危險因素。目前,臨床主要采取含抗生素的三聯(lián)或四聯(lián)藥物治療HP感染,但由于藥物的副作用以及耐藥性等多種問題的存在,根除治療的失敗率仍較高。近年來,隨著微生態(tài)學(xué)的發(fā)展,有人開始嘗試通過微生態(tài)療法達到控制細菌感染的目的,并已經(jīng)成為研究的熱點。嗜酸乳桿菌是人類胃腸道內(nèi)主要的益生菌,有研究表明,嗜酸乳桿菌屬的某些菌株對HP具有拮抗作用,但其作用機制尚不清楚,因此,如何開發(fā)和利用嗜酸乳桿菌并對其作用機制進行深入的探討無疑具有重要的臨床意義。 本實驗室已通過體內(nèi)外實驗篩選到對HP國際標準菌株具有明顯拮抗作用的兩株(L4和L6)嗜酸乳桿菌菌株,本研究就抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對不同慢性胃病來源HP臨床分離株的抑制作用做了進一步的研究并對其可能的作用機制進行了深入探討,同時通過在HP感染C57BL/6小鼠體內(nèi)應(yīng)用,進一步對該株抗HP嗜酸乳桿菌(L6)預(yù)防和治療HP感染的實用價值進行評價。主要研究結(jié)果如下: 1、抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對不同慢性胃病來源HP臨床分離株的體外抑制效應(yīng)。將抗HP嗜酸乳桿菌(L6)與不同慢性胃病來源HP臨床分離株進行混合培養(yǎng)后,對HP的菌落計數(shù)及尿素酶活性進行檢測,結(jié)果表明,本實驗室建立的抗HP嗜酸乳桿菌(L6)在液體培養(yǎng)條件下對不同慢性胃病來源HP臨床分離株的生長具有抑制效應(yīng),對HP尿素酶活性具有明顯的抑制作用;抗HP嗜酸乳桿菌(L6)上清液在固體培養(yǎng)條件下對不同慢性胃病來源的HP臨床分離株的生長同樣顯示出抑制效應(yīng)。 2、抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對不同慢性胃病來源HP與SGC-7901細胞黏附的抑制效應(yīng)及其對IL-8產(chǎn)生的拮抗作用分析。通過形態(tài)學(xué)檢查分析抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對SGC-7901細胞的黏附指數(shù)及經(jīng)抗HP嗜酸乳桿菌拮抗后不同慢性胃病來源HP黏附指數(shù)的變化以及通過ELISA方法觀察SGC-7901在不同條件下的IL-8產(chǎn)生能力,證實抗HP嗜酸乳桿菌(L6)與胃粘膜上皮細胞具有黏附性,且黏附后并不影響胃粘膜上皮細胞的存活率;抗HP嗜酸乳桿菌可通過占位效應(yīng)對不同慢性胃病來源HP與胃粘膜上皮細胞的黏附發(fā)揮拮抗作用;抗HP嗜酸乳桿菌可通過拮抗HP誘導(dǎo)胃粘膜上皮細胞分泌IL-8進而抑制炎癥反應(yīng)。 3、抗HP嗜酸乳桿菌預(yù)防及長期治療C57BL/6小鼠HP感染的實驗研究。采用先灌飼抗HP嗜酸乳桿菌再灌飼HP菌株,或于灌飼HP菌株后再灌飼抗HP嗜酸乳桿菌的方法,并觀察小鼠胃粘膜組織的尿素酶活性、HP定植情況及中性粒細胞淋巴細胞浸潤程度和組織中HP分離培養(yǎng)結(jié)果,評價抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對HP感染的預(yù)防及治療作用。結(jié)果表明,預(yù)防性接種抗HP嗜酸乳桿菌(L6)可以明顯降低C57BL/6小鼠的HP感染率,并減輕HP感染導(dǎo)致的胃粘膜損傷;HP感染后,再灌飼抗HP嗜酸乳桿菌(L6)也可取得明顯療效,并可以明顯降低胃粘膜組織HP定值密度,減輕胃粘膜病理損傷及降低血中HP-IgG抗體水平,但需進行長期治療,而且長期應(yīng)用抗HP嗜酸乳桿菌(L6)還可明顯降低C57BL/6小鼠的HP再感染率。 總之,本研究探討了本實驗室篩選后建立的抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對不同慢性胃病來源HP臨床分離株的抑制效應(yīng)及其可能的作用機制,評價了該株抗HP嗜酸乳桿菌(L6)對C57BL/6小鼠HP感染的預(yù)防及治療價值,為該株抗HP嗜酸乳桿菌(L6)在臨床的開發(fā)和利用提供了可靠的依據(jù)。
【圖文】：

、抗 HP 嗜酸乳桿菌與 SGC-7901 細胞黏附后對細胞濃度為 109CFU/ml 的抗 HP 嗜酸乳桿菌與 SGC-79用臺盼藍染色觀察抗 HP 嗜酸乳桿菌黏附后對 SGC-。結(jié)果表明抗 HP 嗜酸乳桿菌黏附 3、4 和 5 小時的率與單純細胞培養(yǎng)組相比無顯著差異，，見圖 3。859095100 2 抗 HP 嗜酸乳桿菌與 SGC-7901 細胞培養(yǎng) 1 小時后的掃描電鏡觀察結(jié)果

皮細胞的黏附作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同慢性胃病來源 HP 對 S有粘附能力，且不同疾病組之間無明顯差異，見圖4。HP與S養(yǎng) 1 小時后的掃描電鏡觀察結(jié)果見圖 5。0510152025303540451 2 3 4 5 （時間h）PH附指數(shù)(%)黏慢性胃炎組胃潰瘍組十二指腸潰瘍圖 4 不同慢性胃病來源 HP 與 SGC-7901 細胞粘附效應(yīng)分析
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R573

【參考文獻】

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1 邢詠梅,賈繼輝,王紅艷,陳春燕,周亞濱,閻世坤,于修平;兩種生物狀態(tài)腸道益生菌的粘附和粘附拮抗效應(yīng)的對比研究[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2004年02期

2 王錦鴻;王江濱;李巖;焦健;張學(xué)英;;抗Hp嗜酸乳桿菌的篩選及其相關(guān)生物學(xué)特性的研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2007年04期

本文編號：2598756