【摘要】： 目的: 以形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)等技術(shù),觀察腸易激綜合征(IBS)模型大鼠的皮毛、呼吸、氣道反應(yīng)性(PC20值)、肺組織病理形態(tài)改變、肺組織中P物質(zhì)(Substence P ,SP)的含量改變、蛋白表達(dá)、基因表達(dá)和受體NK1的蛋白表達(dá),以及肝組織中SP的含量改變,探討“肺與大腸相表里”理論的科學(xué)內(nèi)涵,為該理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法: 將24只SPF級(jí)Wistar雄性大鼠按隨機(jī)法分為對(duì)照組和IBS模型組(下稱模型組)兩組,每組12只。采用18天循環(huán)接受六種不同的慢性應(yīng)激刺激(冷水游泳、夾尾、禁水、禁食、電擊、晝夜顛倒),同時(shí)每天采用紙帶束肩,前肢及胸部以限制其搔抓頭面部的束縛方法建立大鼠腸易激綜合征(D-IBS)病理模型。造模成功后,觀察大鼠的一般狀態(tài)的變化;采用氣道反應(yīng)性實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定引起大鼠氣道內(nèi)壓Paw升高20%的組胺濃度即PC20值;采用HE染色法觀察大鼠肺組織的病理形態(tài)改變;用ELISA方法檢測(cè)大鼠肺組織和肝組織中SP的含量;用免疫組化方法檢測(cè)兩組大鼠肺組織中SP和NK1蛋白的表達(dá);用RT-PCR方法檢測(cè)兩組大鼠肺組織SPmRNA表達(dá)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。 結(jié)果: 1一般狀態(tài):對(duì)照組大鼠活潑好動(dòng),皮毛有光澤,呼吸均勻,呼吸頻率平均為74.21次/分鐘等;模型組大鼠則出現(xiàn)泄瀉、激惹好斗、皮毛雜亂無(wú)光澤、呼吸不平穩(wěn),呼吸頻率平均為109.64次/分鐘與對(duì)照組比較明顯加快(P0.01)。 2光鏡觀察:對(duì)照組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰,連續(xù),肺泡壁完整,未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn);模型組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)不連續(xù),肺泡壁不完整,肺泡腔擴(kuò)大,間質(zhì)偶有出血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。 3 PC20值:模型組大鼠氣道內(nèi)壓Paw升高20%的組胺濃度(PC20)為(0.06±0.02)與對(duì)照組(0.46±0.12)比較,明顯下降(P0.01)。 4肺組織SP含量:模型組大鼠肺組織SP含量(298.62±12.58)與對(duì)照組(73.04±9.45)比較,明顯高于對(duì)照組(P0.01)。 5肝組織SP含量:模型組大鼠肝組織中SP含量(51.27±8.51)與對(duì)照組(48.93±5.40)比較,沒(méi)有差別(P0.05)。 6肺組織SP蛋白表達(dá):模型組大鼠肺組織SP蛋白陽(yáng)性指數(shù)(PI值)(28.34±10.38)與對(duì)照組(16.58±6.43)比較,明顯高于對(duì)照組(P0.01)。 7肺組織SP基因表達(dá):模型組大鼠的肺組織SPmRNA/β-actin(灰度)為0.52±0.16與對(duì)照組((0.46±0.09)比較,,表達(dá)明顯上調(diào)(P0.01)。 8肺組織NK1蛋白表達(dá):模型組大鼠肺組織NK1蛋白陽(yáng)性指數(shù)(PI值)(16.13±7.58)與對(duì)照組(10.56±4.23)比較,明顯高于對(duì)照組(P0.01)。 結(jié)論: 1 IBS模型大鼠的皮毛雜亂無(wú)光澤,呼吸不平穩(wěn)且頻率加快。 2 IBS模型大鼠氣道敏感性明顯增強(qiáng)。 3 IBS模型大鼠肺組織中SP的含量升高,而肝組織中SP的含量則無(wú)明顯變化。 4 IBS模型大鼠肺組織中SP和NK1蛋白表達(dá)上調(diào)。 5 IBS模型大鼠肺組織中的SPmRNA表達(dá)上調(diào)。
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R574

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2592147