【摘要】：斑馬魚最初是作為一種重要的發(fā)育生物學(xué)模式生物而興起的，現(xiàn)在已成為研究人類和魚類疾病的新興脊椎動(dòng)物模型。斑馬魚同時(shí)具有先天性和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)，與人類的非常相似的。近年來，斑馬魚的研究已擴(kuò)展到行為學(xué)、免疫學(xué)和毒理學(xué)。利用斑馬魚作為模型研究細(xì)菌和病毒感染的免疫應(yīng)答已有很多年，，這些研究的結(jié)果將有利于人類和經(jīng)濟(jì)魚類的疫苗研制和相關(guān)預(yù)防性措施建立。大多數(shù)脊椎動(dòng)物都存在肥大細(xì)胞（mast cell，MC），包括許多硬骨魚科。硬骨魚類的肥大細(xì)胞在形態(tài)和功能都與哺乳動(dòng)物的相似。肥大細(xì)胞是一種重要的免疫細(xì)胞，與免疫、腫瘤、炎癥等密切聯(lián)系，是機(jī)體先天性和獲得性免疫應(yīng)答的重要組成部分。關(guān)于它的很多功能已經(jīng)被揭開，但仍有很多未被發(fā)現(xiàn)。 實(shí)驗(yàn)采用瑞氏-姬母薩對(duì)斑馬魚的血涂片和組織印跡片染色，觀察比較了不同的顆粒細(xì)胞以及不同組織中MC的形態(tài)。結(jié)果表明：斑馬魚MC的形態(tài)與嗜中性和嗜堿性顆粒細(xì)胞有明顯的不同。但在肝臟、脾臟、腎臟中，MC的差異不顯著；采用蘇木精-伊紅（HE）法、甲苯胺藍(lán)(TB）法、阿利新藍(lán)-高碘酸雪夫氏反應(yīng)（AB-PAS）法、Masson三色法、May-Grünwald Giemsa（MGG）法5種組化染色法，對(duì)斑馬魚消化道組織和鰓中的MC組化性質(zhì)進(jìn)行研究。結(jié)果表明：AB-PAS和TB顯示的MC效果較好，MGG也可；對(duì)斑馬魚腸道中的MC進(jìn)行透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)斑馬魚腸道MC多為成熟型MC，超微結(jié)構(gòu)類似哺乳動(dòng)物的MC，但其胞質(zhì)中未見形態(tài)多樣的亞結(jié)構(gòu)。 實(shí)驗(yàn)通過對(duì)斑馬魚肝臟、頭腎和脾臟的組織印跡片進(jìn)行瑞氏-姬母薩混合染色，光鏡觀察各種血細(xì)胞的大小、形態(tài)特征，并對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，研究斑馬魚造血組織MC發(fā)生過程。研究發(fā)現(xiàn)，斑馬魚MC發(fā)育大致經(jīng)過3個(gè)階段,即原始階段、幼稚階段和成熟階段。原始粒細(xì)胞在三種器官中都有出現(xiàn)，頭腎最多。可見頭腎是斑馬魚MC主要造血器官，脾臟和肝臟是其輔助造血器官。 采用免疫組化的方法研究遲緩愛德華菌感染的斑馬魚腸道、鰓、肝臟、脾臟和腎臟中MC的分布。結(jié)果表明：使用兔抗人MC類胰蛋白酶單克隆抗體能夠顯示出斑馬魚MC，但陽性細(xì)胞數(shù)量較少。MC在斑馬魚的腸道、鰓、肝臟、脾臟、腎臟中的分布各有特點(diǎn)，但總的來說，存在兩個(gè)共性特點(diǎn)： MC常常分布在器官的淺層； MC常常在血管、神經(jīng)、淋巴管或腺體周圍分布。 采用遲緩愛德華菌誘導(dǎo)的斑馬魚模型，研究腸道炎癥與MC之間的關(guān)系。通過電鏡與光鏡的觀察發(fā)現(xiàn)，斑馬魚感染后，出現(xiàn)明顯的腸道病理變化。MC數(shù)量增多，有向上皮層及血管附近遷移的現(xiàn)象；與對(duì)照組相比，感染組MC脫顆�，F(xiàn)象更嚴(yán)重。綜合以上結(jié)果可推斷，MC與腸道炎癥反應(yīng)有一定的相關(guān)性，可能在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的免疫作用。
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：S917.4;R574

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2583830