【摘要】：研究背景及目的:酒精性慢性胰腺炎(alcoholic chronic pancreatitis,ACP)的發(fā)病率逐年升高,因此,有關(guān)ACP的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制受到科學(xué)家們的關(guān)注。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)G-細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。LPS通過(guò)與模式識(shí)別受體(Toll-like receptor 4,TLR4)結(jié)合引起級(jí)聯(lián)式炎癥反應(yīng)造成器官損傷。但是LPS-TLR4通路在ACP胰腺纖維化的確切作用和機(jī)制尚不十分明確。本研究目的是通過(guò)大鼠整體模型和胰腺星狀細(xì)胞(pancreatic stellate cells,PSC)水平研究LPS-TLR4通路在酒精性性胰腺纖維化形成中的作用與機(jī)制。材料和方法:將48只體重120g±20g SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩大組分別接受Lieber-De Carli酒精飼料和對(duì)照飼料喂養(yǎng)至10周末,于8周末再隨機(jī)分為4組:(1)對(duì)照飼料喂養(yǎng)組;(2)對(duì)照飼料喂養(yǎng)加LPS組;(3)酒精飼料喂養(yǎng)組;(4)酒精飼料喂養(yǎng)加LPS組。8周末開(kāi)始于(2)和(4)組每周經(jīng)尾靜脈注射LPS一次(3mg/kg),共3次,對(duì)照組注射生理鹽水1ml。所有大鼠造模結(jié)束被采集胰腺組織標(biāo)本。采用胰腺星狀細(xì)胞系(RP-2細(xì)胞)進(jìn)行體外研究。采用HE染色評(píng)價(jià)胰腺炎癥程度,苯胺藍(lán)染色評(píng)價(jià)胰腺膠原沉積程度。免疫組化法檢測(cè)FSP-1和F4/80分別識(shí)別PSC和巨噬細(xì)胞。采用免疫熒光雙染法檢測(cè)PSC表達(dá)TLR4,巨噬細(xì)胞表達(dá)TLR4和TGF-β1。采用ELISA法檢測(cè)胰腺I型膠原A1的含量。采用Western blot法檢測(cè)RP-2細(xì)胞上Collagen I,Bambi,p Smad及NF-κB亞單位p65和p50變化。采用熒光定量RT-PCR檢測(cè)胰腺細(xì)胞因子和RP-2細(xì)胞Bambi和Collagen I m RNA轉(zhuǎn)錄變化。結(jié)果:大鼠整體實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):LPS可引起酒精喂養(yǎng)和正常飲食喂養(yǎng)大鼠胰腺炎癥和纖維化程度加重。LPS可激活TLR4通路引起PSC和巨噬細(xì)胞增殖,巨噬細(xì)胞表達(dá)TGF-β1增強(qiáng)。LPS可引起胰腺組織MCP-1、RANTES、TNFα和IL-6等炎癥因子m RNA轉(zhuǎn)錄水平升高。體外研究發(fā)現(xiàn)LPS明顯增加TGF-β1誘導(dǎo)的RP-2細(xì)胞膠原合成,其機(jī)制與LPS-TLR4通路活化可有效抑制RP-2細(xì)胞TGF-β1偽受體Bambi的合成有關(guān),與TGF-β/smad通路無(wú)關(guān)。進(jìn)一步研究結(jié)果顯示:LPS與TLR4結(jié)合可激活RP-2細(xì)胞My D88-NF-κB信號(hào)通路,推測(cè)其與PSC介導(dǎo)I型膠原合成有關(guān)。結(jié)論:LPS是引起酒精性慢性胰腺炎胰腺纖維化形成的重要因素。LPS可以激活胰腺巨噬細(xì)胞和PSC釋放致炎因子和I型膠原的合成。LPS-TLR4通路通過(guò)抑制Bambi上調(diào)TGF-β1誘導(dǎo)PSC合成I型膠原。抑制LPS-TLR4通路可能成為ACP抗胰腺纖維化的重要途徑。
【圖文】：

胰腺腺泡細(xì)胞壞死、水腫以及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度加重（Fig 2.1A）；傷組織學(xué)評(píng)分結(jié)果顯示：反復(fù) LPS 注射可明顯加重酒精喂養(yǎng)大鼠胰的程度（P<0.001）（圖 2.1B）

原 A1 含量進(jìn)行了檢測(cè)，，結(jié)果顯示反復(fù) LPS 注射的酒精喂養(yǎng)大鼠胰腺 I 型膠原 A1 的含量明顯高于單純酒精喂養(yǎng)大鼠（Fig 2.2C）（P<0.001）。結(jié)果提示反復(fù) LPS 注射可以加重酒精性胰腺纖維化的程度。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R576

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱本貴,李昌平;胰腺纖維化[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2003年06期

2 王瑜萍;王瑜真;張智高;尚慶玲;;胰腺纖維化發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J];實(shí)用醫(yī)藥雜志;2011年03期

3 張汝玲,王興鵬,吳愷,龔自華,吳麗穎,董育瑋;1型血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑抑制大鼠胰腺纖維化形成[J];中華肝膽外科雜志;2005年01期

4 黃克楠;梁化印;郭瑞峰;王愛(ài)民;張莉;陳健;;細(xì)胞外基質(zhì)在胰腺纖維化中的作用[J];中華內(nèi)科雜志;2007年11期

5 周霞;徐可樹(shù);;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β3對(duì)肝臟和胰腺纖維化的影響[J];世界華人消化雜志;2007年28期

6 吳愷,張汝玲,王興鵬;甘草酸對(duì)大鼠胰腺纖維化的干預(yù)作用及其機(jī)制[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2003年12期

7 劉華生;林旭紅;周景華;;胰泰復(fù)方對(duì)慢性胰腺炎胰腺纖維化大鼠血清Ⅲ型前膠原氨基端肽含量的影響[J];中國(guó)中醫(yī)急癥;2007年08期

8 李嘉;劉爽;孫海晨;崔葉青;王玉蘭;李非;;結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在胰腺組織纖維化中的作用及機(jī)制探討[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2012年03期

9 梁曉強(qiáng);章學(xué)林;顧宏剛;馬恩偉;王玉鳳;張靜U

本文編號(hào)：2580933