【摘要】：目的:探討長鏈脂酰輔酶A合成酶(long-chain acyl-Co A synthetase,Acsl)抑制劑triacsin C對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖的影響。方法:應(yīng)用不同濃度的Acsl抑制劑triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞不同時(shí)間段;利用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(cell counting kit-8,CCK-8)檢測(cè)triacsin C對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖的影響。同時(shí),應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR,q PCR)檢測(cè)triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞前后Acsl m RNA的表達(dá)。結(jié)果:1.不同濃度(500μg/L、1000μg/L、1500μg/L、2000μg/L)triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞24 h,細(xì)胞存活率分別為(12.76±6.25)%、(17.91±9.31)%、(16.76±15.89)%、(12.22±13.50)%,48 h后細(xì)胞存活率分別為(1.64±1.61)%、(0.64±1.82)%、(1.57±2.85)%、(0.19±2.59)%。在該濃度范圍內(nèi),各時(shí)間段triacsin C對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖抑制作用顯著(P0.05)。HSC-T6細(xì)胞生長抑制率隨著triacsin C作用時(shí)間延長而增加,但并未隨著triacsin C作用濃度增大而出現(xiàn)相應(yīng)改變。2.較小劑量(1μg/L、10μg/L、100μg/L、1000μg/L)triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞24 h,細(xì)胞存活率分別為(85.40±11.13)%、(88.45±8.97)%、(34.96±6.23)%、(11.53±5.30)%,48 h后細(xì)胞存活率分別為(88.61±5.78)%、(92.86±8.03)%、(39.13±3.71)%、(2.36±0.70)%。1μg triacsin C作用24 h、10μg/L triacsin C作用24h、48 h對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖無明顯抑制作用(P0.05)。1μg triacsin C作用48 h對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖有明顯抑制作用(P0.05)。在100μg/L、1000μg/L時(shí),HSC-T6細(xì)胞生長抑制率隨著triacsin C作用濃度增加而增加,但并未隨著triacsin C作用時(shí)間延長而出現(xiàn)相應(yīng)改變。3.更小劑量(0.01μg/L、0.1μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L)triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞24 h,細(xì)胞存活率分別為(89.91±6.31)%、(88.08±5.68)%、(85.33±6.68)%、(58.55±9.64)%,48 h后細(xì)胞存活率分別為(89.52±5.68)%、(92.75±3.60)%、(88.83±5.54)%、(62.80±4.85)%。在該濃度范圍內(nèi),各時(shí)間段triacsin C作用各時(shí)間段對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖抑制作用顯著(P0.05)。在該濃度范圍內(nèi),HSC-T6細(xì)胞生長抑制率并未隨著隨著triacsin C作用濃度增加和作用時(shí)間延長而出現(xiàn)相應(yīng)改變。4.Triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞前,HSC-T6細(xì)胞中Acsl家族m RNA均有表達(dá),其中Acsl5 m RNA表達(dá)量最高,相當(dāng)于內(nèi)參GAPDH的(4.74±0.06)%,而Acsl6表達(dá)量最低,僅相當(dāng)于Acsl5的0.04%。HSC-T6細(xì)胞中Acsl m RNA表達(dá)量的高低依次為Acsl5Acsl3Acsl4Acsl1Acsl6。5.在100μg/L triacsin C作用HSC-T6細(xì)胞24 h后,Acsl1、Acsl4表達(dá)降低,與DMSO組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.在一定濃度范圍內(nèi),triacsin C對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,并呈現(xiàn)時(shí)間依賴性。2.HSC-T6細(xì)胞中Acsl家族成員均有表達(dá),但表達(dá)量不同,以Acsl5表達(dá)量最高,Acsl6表達(dá)量最低。3.Triacsin C主要通過下調(diào)Acsl1、Acsl4的表達(dá)抑制HSC-T6細(xì)胞增殖。
【圖文】：

故其具有酸性，也被認(rèn)為是一種，triacsins 的 IC50 值反映出在抑制細(xì)胞增riacsin C 的能力最強(qiáng)，故一般利用 triacsin 中的作用[40]。胞增殖多采用 MTT 法，而近年來越來越實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響。CCK-8 與 M體中被某些脫氫酶還原成橙黃色的甲佨，相較于常用的 MTT 法，CCK-8 法靈敏度更 法還原后的甲佨并非脂溶性，可免去之后K-8 法觀察了在 24 h、48 h 2 個(gè)時(shí)間段內(nèi)的關(guān)系。1000 μg/L、1500 μg/L、2000 μg/L triacsin圖 5.1 Triacsins 的分子結(jié)構(gòu)

故其具有酸性，也被認(rèn)為是一種，triacsins 的 IC50 值反映出在抑制細(xì)胞增riacsin C 的能力最強(qiáng)，，故一般利用 triacsin 中的作用[40]。胞增殖多采用 MTT 法，而近年來越來越實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響。CCK-8 與 M體中被某些脫氫酶還原成橙黃色的甲佨，相較于常用的 MTT 法，CCK-8 法靈敏度更 法還原后的甲佨并非脂溶性，可免去之后K-8 法觀察了在 24 h、48 h 2 個(gè)時(shí)間段內(nèi)的關(guān)系。1000 μg/L、1500 μg/L、2000 μg/L triacsin圖 5.1 Triacsins 的分子結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R575.2

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2579778