【摘要】：第一部分四氯化碳致小鼠肝脂肪變性的分子機(jī)制 目的：探討四氯化碳(CCl4)促進(jìn)小鼠肝細(xì)胞脂肪變性的分子機(jī)制。 方法：將6~8周齡的C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(control)（n=6）和CCl4組(CCl4)（n=6）。對(duì)照組和CCl4組分別給予皮下注射生理鹽水（NS）和CCl42周，2周后處死小鼠，留取肝臟�；瘜W(xué)酶促比色法檢測(cè)小鼠肝臟總膽固醇（TC）含量，油紅O染色觀察肝臟脂肪變程度，實(shí)時(shí)熒光定量PCR和western bot檢測(cè)小鼠LDLr、SCAP和SREBP-2的基因和蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：CCl4組的肝組織的TC含量表達(dá)比對(duì)照組的明顯升高（P＜0.05），油紅O染色顯示CCl4組肝組織可見大量的脂質(zhì)堆積。CCl4組的LDLr、SREBP-2、SCAP的mRNA和蛋白表達(dá)比對(duì)照組明顯增高(P均＜0.05)。 結(jié)論：CCl4可能通過上調(diào)肝細(xì)胞LDLr、SREBP-2、SCAP的表達(dá)，導(dǎo)致小鼠肝細(xì)胞脂質(zhì)異常堆積。 第二部分炎癥促進(jìn)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠脂肪變肝細(xì)胞脂質(zhì)集聚的相關(guān)指標(biāo)變化 目的：探討炎癥促進(jìn)CCl4所致的脂肪變肝細(xì)胞進(jìn)一步脂質(zhì)集聚形成脂肪肝的分子機(jī)制。 方法：將6~8周齡的C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（n=6）和炎癥組（n=6）。2組均預(yù)先CCl4皮下注射2周，再分別給予對(duì)照組（CCl4+NS）和炎癥組(CCl4+casein)生理鹽水(NS)和酪蛋白(casein)皮下注射16周，18周后留取小鼠血清及肝組織，稱量小鼠體質(zhì)量及肝質(zhì)量計(jì)算肝指數(shù)評(píng)估肝臟受損情況，，ELISA法檢測(cè)血清炎癥因子，酶法檢測(cè)小鼠血清脂質(zhì)水平,化學(xué)酶促比色法檢測(cè)小鼠肝組織的脂質(zhì)水平，油紅O染色觀察小鼠肝組織的脂質(zhì)集聚情況，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)小鼠SREBP-1、SREBP-2、LDLr、SCAP、HMGCR的基因表達(dá)水平，免疫組化和western blot檢測(cè)上述靶基因的蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：炎癥組的肝指數(shù)較對(duì)照組升高（P＜0.05）,炎癥組的血清淀粉樣蛋白（SAA）、IL-6和TNF-α的表達(dá)均比對(duì)照組的明顯升高（P均＜0.05），炎癥組的血清HDL-C、LDL-C、TC比對(duì)照組的明顯降低（P均＜0.05）,肝臟TC含量較對(duì)照組升高（P＜0.05），HE及油紅O染色顯示炎癥組可見大量的脂質(zhì)堆積。炎癥組的LDLr、SREBP-2、SCAP、SREBP-1、HMGCR的mRNA和蛋白表達(dá)比對(duì)照組明顯增高(P均＜0.05)。 結(jié)論：炎癥可能通過上調(diào)肝細(xì)胞LDLr、SREBP-2、SCAP、SREBP-1,HMGCR的表達(dá)，導(dǎo)致CCl4刺激下的脂肪變肝細(xì)胞攝入外源性膽固醇和內(nèi)源性合成增加，加重肝臟脂質(zhì)的異常集聚。
【圖文】：

圖 1.1 各組小鼠肝臟油紅 O 染色Figure 1.1 The Oil Red O staining of livers in C57BL/6J mice in each group/6J mice were treated by NS injection (Control,A) and CCl4injection (CCl4he lipid accumulation of livers was checked by Oil Red O staining, the lipidined in red (original magnification×400).

圖 1.1 各組小鼠肝臟油紅 O 染色Figure 1.1 The Oil Red O staining of livers in C57BL/6J mice in each group.7BL/6J mice were treated by NS injection (Control,A) and CCl4injection (CCl4,B) fek. The lipid accumulation of livers was checked by Oil Red O staining, the lipid dropre stained in red (original magnification×400).
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R575.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2571039