【摘要】：炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一類慢性非特異性腸道炎癥疾病,包括潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis,UC)和克羅恩病(Crohn’s Disease,CD),其臨床癥狀主要表現為腹瀉、腹痛和腸梗阻,并有惡變傾向,增加了大腸癌的發(fā)病風險。機體Th1/Th2型免疫失衡是炎癥性腸病發(fā)病的重要免疫學因素,而維持腸黏膜免疫平衡成為IBD防治的新方法。本課題采用三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)誘導Th1型免疫主導的小鼠炎癥性腸病為模型,探討白介素(IL)-33在炎癥性腸病中的作用及潛在機制,為臨床治療炎癥性腸病提供新的方法與思路。研究目的:1.明確IL-33在TNBS誘導Th1型細胞介導的炎癥性腸病中的作用,探討相關的免疫學機制;2.過繼IL-33誘導的替代活化巨噬細胞(AAM),檢測其在炎癥性腸病中的作用及相關機制,為炎癥性腸病防治提供新的理論知識和實驗依據。研究方法:建立TNBS誘導的炎癥性腸病模型,觀察IL-33在炎癥性腸病中的作用。依據組織病理學檢查判斷IL-33治療效果,免疫熒光技術檢測結腸損傷部位巨噬細胞表型的表達情況,實時定量PCR技術檢測結腸損傷部位細胞因子以及巨噬細胞相關基因的表達水平。替代活化巨噬細胞過繼至炎癥性腸病小鼠,通過組織病理學檢查、免疫熒光檢測及RT-PCR等實驗技術,觀察替代活化巨噬細胞對炎癥性腸病的治療效果,同時過繼綠色熒光蛋白(GFP)標記的F4/80+巨噬細胞,檢測巨噬細胞在炎癥性腸病小鼠結腸組織中的分布情況。研究結果:1.IL-33緩解TNBS誘導的炎癥性腸病結腸病理損傷建立小鼠IBD模型,腹腔給予IL-33治療后,臨床病理表現如腹痛、腹瀉、食欲不振等癥狀有明顯的改善,炎癥情況明顯好轉,組織病理損傷減輕;PCR結果顯示小鼠結腸損傷部位促炎性細胞因子TNF-α表達降低;組織免疫熒光以及PCR結果顯示結腸組織中M2型巨噬細胞特異標記基因Arg1、YM1表達升高。2.IL-33對巨噬細胞極化的影響在正常小鼠體內,IL-33腹腔注射可誘導巨噬細胞向M2型極化,并上調M2型相關分子表達;同時IL-33誘導體外腹腔巨噬細胞向M2型極化。3.替代活化巨噬細胞過繼治療緩解炎癥性腸病病理損傷IL-33誘導的替代活化巨噬細胞過繼治療能明顯抑制TNBS誘導的炎癥性腸病進展,減輕結腸組織病理損傷程度,降低結腸損傷部位TNF-α表達,同時GFP標記的F4/80+巨噬細胞主要分布于結腸粘膜下層及固有層部位。結論:IL-33處理能明顯緩解TNBS誘導的IBD病情進展,其免疫學機制可能與誘導替代活化巨噬細胞生成相關。
【圖文】：

模型組小鼠在造模后的 24 h，體重出現明顯降低，并且隨著時間增長體重下顯，第四天時達-24.79±1.29%。IL-33 治療組小鼠體重也有降低，至第 2 天15.28±0.74%），，隨后體重逐漸回升，從第 3 天至第 4 天，體重由-13.08±為-5.98±1.05%。對照組小鼠體重有輕微增加，但是無明顯改變。各實驗組變化統(tǒng)計結果見下表：.4 第 1-4 天各實驗組小鼠體重變化百分率（與 TNBS 組相比較*P < 0.05，**P<0.01）Day 1 Day 2 Day 3 Day4-10.55±0.66 -17.62±2.35 -21.99±1.43 -24.79±L-33 -9.16±1.17 -15.28±0.74 -13.08±1.33* -5.98±1

廣東藥科大學碩士研究生學位論文分病活動指數評分結果見圖 2.2。乙醇空澤，活動正常，大便性狀無變化。模型亂失去光澤，慵懶，活動明顯減少，2-便；第 4 天，程度更加嚴重， DAI 評分為毛發(fā)失去光澤，活動不靈敏，食欲不好始有稀便，第 3 天稀便但是精神、食欲況開始改變，體重有明顯回升，毛發(fā)也AI 評分為 4±0.57。IL-33 治療組小鼠與差異，且差異具有統(tǒng)計學意義（*P<0.0
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R574

【參考文獻】

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1 倪倩;胡世蓮;尹輝;;IL-33與人類疾病關系的研究進展[J];國際免疫學雜志;2013年05期

本文編號：2540883