【摘要】：目的 :研究間苯三酚(phloroglucinol,Phlo)在肝臟缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)中的作用。方法 :將40只C57BL/6小鼠隨機分為假手術(shù)(sham)組、IR組、IR+Phlo組、IR+磷酸緩沖鹽(phosphate buffer saline,PBS)組4組,每組10只。Sham組僅分離暴露門靜脈,不夾閉。另3組建立小鼠部分肝缺血再灌注模型(70%)。利用小鼠正常巨噬細胞系RAW264.7,進行體外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激,建立體外模型。通過血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase,ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase,AST)的水平和組織病理學評價肝臟損傷,利用實時熒光定量PCR檢測肝內(nèi)IL-1β和TNF-α的m RNA水平變化,細胞培養(yǎng)上清液IL-1β和TNF-α的水平由ELISA檢測,RAW264.7細胞內(nèi)p-p65蛋白表達情況經(jīng)Western blot進行測定。結(jié)果 :IR+Phlo組小鼠肝損傷情況明顯低于IR組與IR+PBS組(P0.01),肝內(nèi)IL-1β和TNF-α的m RNA水平均降低(P0.05)。體外試驗證實間苯三酚與RAW264.7共培養(yǎng)時,可減少其分泌的IL-1β和TNF-α(P0.05),細胞中NF-κB的活性也明顯下降。結(jié)論:間苯三酚在小鼠肝臟缺血再灌注損傷中具有保護作用,該作用部分是通過間苯三酚抑制巨噬細胞內(nèi)NF-κB的活性實現(xiàn)。
【圖文】：

昂笥誄上?儀上讀齲1．3統(tǒng)計學方法以SPSS13．0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。結(jié)果以均數(shù)±標準差（x±s）示。用單因素方差分析進行統(tǒng)計學處理，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用One-wayANOVA和Newman-Kelus-test多重比較t檢驗分析。P≤0．05為差異有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果2．1間苯三酚可減輕缺血再灌注造成的肝損傷血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指標。sham組小鼠肝功能無損害，IR組、IR＋PBS組和IR＋Phlo組的ALT、AST水平均較sham組升高，但IR＋Phlo組的ALT、AST明顯比IR組和IR＋PBS組低（P＜0．01，圖1），說明間苯三酚可以減輕IR造成的肝功能損傷。HE染色可見IR組肝葉組織結(jié)構(gòu)較sham組出現(xiàn)明顯改變，表現(xiàn)為肝竇堵塞，肝細胞腫脹、變性、壞死，炎癥細胞浸潤。IR＋Phlo組較IR組肝葉結(jié)構(gòu)改變較小，肝細胞腫脹、變性程度較輕，炎癥細胞浸潤較少。IR＋PBS組與IR組改變相似（圖2）。Suzuki’s評分同樣提示IR組與IR＋PBS組肝損傷較重，IR＋Phlo組損傷較IR組明顯減輕（P＜0．01，圖3）。與IR組比較，*P＜0．01。圖1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham組；B：IR組；C：IR＋Phlo組；D：IR＋PBS組。圖2肝組織HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis評分IR＋Phlo*IRIR＋PBS與IR組比較，*P＜0．01。圖3Suzuki’s評分Figure3Suzuki’sscore2．2間苯三酚可減少肝內(nèi)IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝內(nèi)炎癥介質(zhì)IL-1β和TNF-α的mRNA水平顯示?

2結(jié)果2．1間苯三酚可減輕缺血再灌注造成的肝損傷血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指標。sham組小鼠肝功能無損害，IR組、IR＋PBS組和IR＋Phlo組的ALT、AST水平均較sham組升高，但IR＋Phlo組的ALT、AST明顯比IR組和IR＋PBS組低（P＜0．01，圖1），說明間苯三酚可以減輕IR造成的肝功能損傷。HE染色可見IR組肝葉組織結(jié)構(gòu)較sham組出現(xiàn)明顯改變，表現(xiàn)為肝竇堵塞，肝細胞腫脹、變性、壞死，炎癥細胞浸潤。IR＋Phlo組較IR組肝葉結(jié)構(gòu)改變較小，肝細胞腫脹、變性程度較輕，炎癥細胞浸潤較少。IR＋PBS組與IR組改變相似（圖2）。Suzuki’s評分同樣提示IR組與IR＋PBS組肝損傷較重，，IR＋Phlo組損傷較IR組明顯減輕（P＜0．01，圖3）。與IR組比較，*P＜0．01。圖1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham組；B：IR組；C：IR＋Phlo組；D：IR＋PBS組。圖2肝組織HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis評分IR＋Phlo*IRIR＋PBS與IR組比較，*P＜0．01。圖3Suzuki’s評分Figure3Suzuki’sscore2．2間苯三酚可減少肝內(nèi)IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝內(nèi)炎癥介質(zhì)IL-1β和TNF-α的mRNA水平顯示（圖4）：IR組較sham組均明顯上升（P＜0．01），而IR＋Phlo組的水平較IR組明顯下降（P＜0．05），IR＋PBS組水平較IR組幾乎不變。2．3間苯三酚可減少RAW264．7分泌IL-1β和TNF-α的水平RAW264．7細胞受LPS刺激后（LPS組），IL-1β和TNF-α的分泌量較sham組明顯上升（P＜0．0
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學附屬常州第二人民醫(yī)院普外科;
【分類號】：R575

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Koichi Ogawa;Tadashi Kondo;Takafumi Tamura;Hideki Matsumura;Kiyoshi Fukunaga;Tatsuya Oda;Nobuhiro Ohkohchi;;Influence of Kupffer cells and platelets on ischemia-reperfusion injury in mild steatotic liver[J];World Journal of Gastroenterology;2013年09期

2 Lin-Zhong Cui;Biao Wang;Li-Yan Chen;Jie Zhou;;The effect of ischemic precondition to IL-6 on rat liver ischemiareperfusion injury in transplantation[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2013年05期

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張敉;吳亞男;尹華峰;張景R

本文編號：2524339