發(fā)布時間：2019-06-14 20:34

【摘要】：目的:1、探索klotho蛋白是否對GECs(胃上皮細(xì)胞)增殖率和遷移率有促進(jìn)作用;2、制作一款包裹klotho蛋白能用于內(nèi)鏡下的熱敏型聚合凝膠并對材料進(jìn)行評估;3、通過動物實驗驗證聚合凝膠對胃潰瘍的愈合是否有促進(jìn)作用。方法:1、細(xì)胞增殖實驗(EDU)和細(xì)胞遷移實驗(Transell):將對數(shù)期生長的GECs分為klotho蛋白組和對照組,klotho蛋白組添加klotho,觀察兩組細(xì)胞增殖率和遷移率有無差異。2、聚合凝膠的制作及評估:以β-環(huán)糊精包裹klotho蛋白的制成納米微球,用殼聚糖、F-127、甘油等材料制作成一種溫度敏感性凝膠,納米微球與凝膠混合均勻后通過掃描電鏡觀察,并測定生物材料中klotho蛋白的緩釋速度。3、胃潴留實驗:將8只C57小鼠分為2組,對照組和實驗組,分別灌入含1%亞甲藍(lán)的生理鹽水、klotho蛋白凝膠,在0、30、60、120分鐘后取胃,通過活體熒光成像系統(tǒng)檢測熒光強度。4、動物實驗:將60只SD大鼠隨機分為生理鹽水組,空白凝膠組,奧美拉唑組、klotho蛋白凝膠組4組。各組大鼠成模后每天分別用生理鹽水、空白凝膠、奧美拉唑、Klotho蛋白凝膠灌胃1次治療。在治療的第1、3、7天每組隨機處死5只大鼠取材,測量潰瘍面積及新生毛細(xì)血管數(shù)量。潰瘍標(biāo)本切片后行HE染色、PAS染色、PNCA染色,觀察各組組織學(xué)變化情況。結(jié)果:1、細(xì)胞實驗:klotho蛋白組的增值率是對照組的2.3倍,細(xì)胞遷移數(shù)量是對照組的3.6倍。2、電鏡觀察結(jié)果:納米微球直徑在50-200nm之間,可見納米微球勻稱散布在klotho凝膠上面。3、胃潴留實驗:klotho凝膠的熒光的強度在每個時間段都明顯高于對照組。4、動物實驗:klotho凝膠組愈合情況從肉眼觀和組織學(xué)角度都要優(yōu)于各個對照組。結(jié)論:1、證明了Klotho蛋白在酸性條件下能夠促進(jìn)GECs的增殖遷移。2、制備的包裹klotho蛋白凝膠能夠成功用于內(nèi)鏡下并黏附在胃潰瘍部位。3、證實了klotho蛋白凝膠能夠成功地通過灌胃器導(dǎo)管作用于大鼠胃潰瘍部位,修復(fù)潰瘍組織。
[Abstract]:Aim: 1. To explore whether klotho protein can promote the proliferation and mobility of GECs (gastric epithelial cells); (2) to prepare a klotho protein coated klotho protein can be used in endoscopic thermal polymerization gel and evaluate the material; (3) to verify whether the polymeric gel can promote the healing of gastric ulcer through animal experiments. Methods: 1. Cell proliferation test (EDU) and cell migration test (Transell): divided logarithmic GECs into klotho protein group and control group. Klotho protein group added klotho, to observe whether there was any difference in cell proliferation and mobility between the two groups. 2. Preparation and evaluation of polymeric gel: nano-microspheres coated with 尾-cyclodextrin, chitosan, F 鈮，

本文編號：2499672