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幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片在臨床胃粘膜標本檢測中的應(yīng)用評價

發(fā)布時間:2017-03-01 09:23

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《河南中醫(yī)學(xué)院》 2014年

幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片在臨床胃粘膜標本檢測中的應(yīng)用評價

豆峰娜  

【摘要】:目的:幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是已知的引起胃炎、消化性潰瘍等一系列上消化道感染疾病的病原菌,甚至能引起胃癌和胃粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤。質(zhì)子泵抑制劑(PPI)和兩種抗生素聯(lián)用的三聯(lián)療法,廣泛應(yīng)用于幽門螺桿菌的根除治療,但是其根除率在逐年下降,已從最初的90%下降至80%甚至更低[1-4]。幽門螺桿菌根除治療失敗的主要原因是抗生素耐藥、宿主基因多態(tài)性以及患者的依從性不好[5-7]。有效治療和控制幽門螺桿菌感染的關(guān)鍵在于針對患者的情況進行個體化治療[8-9],而實現(xiàn)個體化治療的前提是快速準確的檢測幽門螺桿菌的耐藥性。本研究的目的是考察幽門螺桿菌個體化治療基因芯片檢測法對幽門螺桿菌的檢出率和耐藥檢測的準確性,探討幽門螺桿菌個體化治療基因芯片的臨床應(yīng)用價值;探討幽門螺桿菌對克拉霉素和左氧氟沙星的耐藥表型和基因型的關(guān)系。 方法:胃鏡下取胃粘膜,HP分離培養(yǎng),進行左氧氟沙星和克拉霉素E-Test藥敏試驗,讀取最低抑菌濃度(MIC)值,判斷耐藥性。提取胃粘膜DNA,使用幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片對樣本進行檢測;用PCR測序體系擴增2C19基因片段并進行測序檢測。提取胃粘膜臨床分離株DNA,進行基因芯片檢測,PCR擴增23S rRNA和gyrA基因片段并進行測序檢測。PCR擴增菌株23S rRNA和gyrA基因片段,構(gòu)建質(zhì)粒,挑取單克隆進行細菌培養(yǎng),并測序分析。 結(jié)果:1.幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片與藥敏試驗兩種方法檢測克拉霉素和左氧氟沙星耐藥的一致率達80%以上。2.幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片與測序兩種方法檢測克拉霉素和左氧氟沙星耐藥的一致率達90%以上。3.幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片與測序兩種方法檢測2C19基因型的一致率達75%以上。4.幽門螺桿菌存在混合感染。 結(jié)論:幽門螺桿菌個體化治療檢測基因芯片對胃粘膜幽門螺桿菌耐藥檢測靈敏度高,特異性好。對克拉霉素和左氧氟沙星耐藥檢測結(jié)果與E-Test藥敏試驗結(jié)果一致性好(Kappa值大于0.75);蛐酒ǹ焖佟蚀_、成本低、工作量小,在一次實驗檢測中可同時獲得質(zhì)子泵抑制劑代謝類型和克拉霉素、左氧氟沙星耐藥情況,提供PPI和抗生素的選擇依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:河南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R440;R573
【目錄】:

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本文編號:246517

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