【摘要】：乙肝表面抗原HBs Ag是乙肝疫苗的主要組分。從轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平以及翻譯后水平對其進行優(yōu)化,實現(xiàn)了HBs Ag在重組釀酒酵母中的高效異源表達。與組成型啟動子TEF1、TDH3、HXT7、ADH1相比,誘導型啟動子GAL1可大幅度提高HBs Ag的表達;與GCCACC和AAAAAA相比,kozak序列TACACA最有利于HBs Ag的翻譯表達;而共表達二硫鍵異構(gòu)酶pdi對HBs Ag的活性表達具有顯著的促進作用。通過3種水平的優(yōu)化,HBs Ag活性從最初的8.87 IU/g提高至151.08 IU/g;最終,利用Ni柱親和層析成功獲得純化的HBs Ag,活性為3.32 IU/m L。
[Abstract]:Hepatitis B surface antigen (HBs Ag) is the main component of hepatitis B vaccine. The heterologous expression of HBs Ag in recombinant Saccharomyces cerevisiae was achieved by optimizing the transcription level, translation level and post-translation level. Compared with the constitutive promoter TEF1,TDH3,HXT7,ADH1, the inducible promoter GAL1 significantly increased the expression of HBs Ag, and compared with GCCACC and AAAAAA, kozak sequence TACACA was the most favorable for HBs Ag translation expression. The co-expression of disulfide isomerase pdi significantly promoted the expression of HBs Ag. The, HBs Ag activity was improved from 8.87 IU/g to 151.08 IU/g; at three levels, and the purified HBs Ag, activity was 3.32 IU/m L by Ni affinity chromatography.
【作者單位】： 江南大學工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室;江南大學生物工程學院;希森美康生物科技無錫有限公司;江南大學糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室;
【基金】：國家863計劃重點項目(2011AA100905) 教育部長江學者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃項目(IRT1135) 國家博士后基金面上項目(2013 M540414) 江蘇省優(yōu)勢學科項目
【分類號】：R512.62

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2333712