【摘要】：目的了解我院2004-2015年間肝硬化患者腹水病原菌分布及耐藥情況,為臨床治療肝硬化患者自發(fā)性腹膜炎合理選用抗菌藥物提供依據(jù),并為后續(xù)快速診斷方法的建立提供病原學(xué)參考。應(yīng)用PCR方法檢測腹水中細(xì)菌16s rDNA基因,初步探討其在輔助診斷肝硬化患者腹水病原菌感染中的臨床應(yīng)用價值。材料與方法資料來源既往12年間我院住院肝硬化患者基本臨床資料與腹水培養(yǎng)的病原菌及其耐藥性結(jié)果來源于我院檢驗(yàn)管理系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫。138例臨床肝硬化失代償期患者腹水臨床資料及腹水標(biāo)本留取于2015年01月至2016年01月我院感染病科住院患者。方法收集2004年1月1日至2015年12月31日我院住院肝硬化患者腹水培養(yǎng)的病原菌及其耐藥性結(jié)果,按時間先后順序,分為A組、B組兩組進(jìn)行回顧性分析。以細(xì)菌16s rDNA基因?yàn)榘行蛄?在保守區(qū)和特異區(qū)分別選取特異性序列合成引物,建立腹水病原菌快速診斷方法。使用建立的方法,檢測138例我院臨床肝硬化失代償期患者腹水中的細(xì)菌DNA,并將其結(jié)果與傳統(tǒng)方法進(jìn)行比較。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組間計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn),雙側(cè)P0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果12年間腹水送檢培養(yǎng)4308例次,陽性219例次(剔除重復(fù)菌株),陽性率5.08%。219例次陽性腹水中,混合感染23例次,共培養(yǎng)出242株細(xì)菌,其中革蘭陽性(G+)菌91株(37.60%),革蘭陰性(G-)菌139株(57.44%),真菌12株(4.96%)。B組G+菌所占比例明顯高于A組,G-菌低于A組,B組中,大腸埃希菌比例較A組有所下降,凝固酶陰性葡萄球菌較A組升高,A、B組真菌培養(yǎng)陽性率無明顯差異。凝固酶陰性的葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物有很高的耐藥率,產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶檢出率達(dá)79.6%,而對萬古霉素、利奈唑胺有較高的敏感性;未檢出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的腸球菌,但腸球菌對其他常見G+常用抗菌藥物耐藥率較高。頭孢菌素類抗菌藥物對大腸埃希菌療效較差,哌拉西林他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦等β-內(nèi)酰胺酶抑制劑類對大腸埃希菌敏感性較好。其中,產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)大腸埃希菌檢出率為7.89%,對碳青霉烯類抗菌藥物敏感性較高。肺炎克雷伯桿菌對青霉素類、頭孢菌素類耐藥率均較高,對哌拉西林他唑巴坦耐藥率為16.24%,對碳青霉烯類抗菌藥物敏感性較好。腹水中檢出的最常見真菌為白色念珠菌,其他檢出率較低的真菌(如:光滑念珠菌、熱帶念珠菌和近平滑念珠菌)在腹水培養(yǎng)中也可被發(fā)現(xiàn)。未發(fā)現(xiàn)對常用抗真菌藥耐藥的菌株。將腹水培養(yǎng)陽性作為診斷SBP的金標(biāo)準(zhǔn),PCR法有100%的靈敏度,37%的特異度,陽性預(yù)測值為21%,陰性預(yù)測值100%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=10.948,P0.01)。將腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽性,或(和)腹水PMN≥250×106/L(且排除繼發(fā)性腹膜炎),作為診斷SBP金標(biāo)準(zhǔn),PCR法靈敏度為100%,特異度為36%,陽性預(yù)測值為29%,陰性預(yù)測值100%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=14.338,P0.01)。將腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽性,或(和)腹水PMN≥250×106/L,結(jié)合患者臨床表現(xiàn),將腹膜刺激征陽性和正規(guī)抗感染治療有效者納入診斷SBP金標(biāo)準(zhǔn),此時PCR法靈敏度為100%,特異度為61%,陽性預(yù)測值為75%,陰性預(yù)測值為100%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=62.858,P0.01)。結(jié)論腸桿菌科細(xì)菌仍然是引起肝硬化失代償期腹水細(xì)菌感染的最主要病原菌,大腸埃希菌位列第一,耐藥性有增加的趨勢。在肝硬化失代償期腹水細(xì)菌感染中,革蘭陽性菌所占比例逐年增加,需引起足夠重視。由真菌引起的腹水細(xì)菌感染,在肝硬化失代償期患者中所占比例趨于穩(wěn)定狀態(tài),腹水中真菌檢出率最高的是白色念珠菌,真菌對臨床常用抗真菌藥物均很敏感,未檢出耐藥菌株。傳統(tǒng)的腹水培養(yǎng)及腹水細(xì)胞學(xué)在診斷肝硬化失代償期的患者SBP感染中,靈敏度低,容易造成漏診。16s rDNA在診斷SBP感染中有較高的靈敏度和特異度,可成為值得探索的方式。結(jié)合腹水培養(yǎng)、腹水細(xì)胞學(xué)、16s rDNA及臨床癥狀能明顯的提高SBP診斷的靈敏度及特異度。
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【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R575.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2290880