【摘要】：目的觀察磁粒子和熒光染料雙標(biāo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢至大鼠急性損傷肝組織的示蹤。方法以超順磁性氧化鐵(SPIO)和氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)標(biāo)記永生化人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(UE7T-13)。普魯士藍(lán)染色檢測細(xì)胞內(nèi)鐵,熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測CM-Dil標(biāo)記陽性率。建立12只急性肝損傷大鼠模型,分為實(shí)驗(yàn)組(n=6)和對照組(n=6),將標(biāo)記細(xì)胞經(jīng)尾靜脈移植入實(shí)驗(yàn)組大鼠,未標(biāo)記細(xì)胞移植入對照組大鼠。分別于移植前3h、移植后3h、3天、5天、7天應(yīng)用MR T2*W、T2*map對大鼠活體成像,獲得肝臟R2*值。并與肝臟組織切片普魯士藍(lán)染色和CM-Dil熒光表達(dá)情況對照。結(jié)果雙標(biāo)細(xì)胞的SPIO-PLL標(biāo)記率接近100%,流式細(xì)胞儀檢測CM-Dil標(biāo)記陽性率達(dá)99.97%。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞移植后3天、5天肝臟R2*值均較移植前明顯升高(t=7.282、7.608,P均0.01),對照組細(xì)胞移植后各時(shí)間點(diǎn)與移植前比較,R2*值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.99,P0.05)。普魯士藍(lán)陽性細(xì)胞主要分布于肝小葉中央靜脈周圍病變區(qū),熒光顯微鏡下觀察紅色熒光陽性細(xì)胞與普魯士藍(lán)陽性細(xì)胞分布基本一致。結(jié)論 SPIO和CM-Dil可有效標(biāo)記人永生化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(UE7T-13),不影響細(xì)胞增殖能力,臨床應(yīng)用型1.5T MR可對磁粒子標(biāo)記的UE7T-13進(jìn)行肝歸巢活體示蹤,CM-Dil有助于證實(shí)存活干細(xì)胞的肝內(nèi)定植。
[Abstract]:Objective to observe the homing of human bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) with magnetic particles and fluorescent dyes to acute liver injury in rats. Methods immortalized human bone marrow mesenchymal stem cells (UE7T-13) were labeled with superparamagnetic ferric oxide (SPIO) and chloromethylbenzoyl amine (CM-Dil). Intracellular iron was detected by Prussian blue staining, CM-Dil positive rate was detected by fluorescence microscope and flow cytometry. Twelve rat models of acute liver injury were established and divided into two groups: experimental group (n = 6) and control group (n = 6). The labeled cells were transplanted through the tail vein into the experimental group and the unlabeled cells were transplanted into the control group. Rat liver R2 * value was obtained by using MR T2WT2map 3 hours before transplantation and 3 days after transplantation and 5 days and 7 days after transplantation. The results were compared with Prussian blue staining and CM-Dil fluorescence expression in liver tissue sections. Results the SPIO-PLL labeling rate of double labeled cells was close to 100 and the positive rate of CM-Dil labeling was 99.97 by flow cytometry. The R2 * value of liver in the experimental group was significantly higher than that before transplantation on the 3rd day and 5th day after transplantation (t = 7.282n 7.608, P < 0.01), but there was no significant difference between the control group and the control group at all time points and before transplantation (P 0.05). Prussian blue positive cells were mainly located in the lesion area around the central vein of hepatic lobule. The distribution of red fluorescent positive cells was basically consistent with that of Prussian blue positive cells under fluorescence microscope. Conclusion SPIO and CM-Dil can effectively label human immortalized bone marrow mesenchymal stem cells (UE7T-13) and have no effect on cell proliferation. Clinical application of 1.5T MR can be used to trace live liver homing UE7T-13 labeled by magnetic particles. CM-Dil is helpful to confirm the intrahepatic colonization of viable stem cells.
【作者單位】： 廣州市第一人民醫(yī)院放射科;中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院放射科;中山大學(xué)介入放射學(xué)研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81271621;81070349;81172193) 廣東省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2010B031600204)
【分類號(hào)】：R575;R445.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2258756