本文關(guān)鍵詞：腹瀉患者和生態(tài)環(huán)境香港海鷗菌的檢測及多序列分型研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南方醫(yī)科大學(xué)》 2015年

腹瀉患者和生態(tài)環(huán)境香港海鷗菌的檢測及多序列分型研究

王祉蘊  

【摘要】：研究背景香港海鷗菌(Laribacter hongkongensis, LH)是一種可能致人類嚴重腹瀉的新發(fā)現(xiàn)病原菌。該菌2001年首次在香港肝硬化病人的肝和血液中分離到并被鑒定為新種屬,隨著對該菌研究的進一步深入,除腹瀉病人外,香港海鷗菌還在淡水產(chǎn)品中(如草魚、鳙魚、虎紋蛙等)及環(huán)境水體中被檢測出,并被證實進食魚類和異地旅游是感染香港海鷗菌的危險因素。香港海鷗菌作為一個新發(fā)現(xiàn)的病原菌,其可能的源頭、不同宿主之間可能存在的關(guān)聯(lián)、造成人類的可能感染方式,不同來源的菌株間的本質(zhì)差異、遺傳多樣性、耐藥性等問題都亟待解決。目前對LH只能采用基因分型方法進行分型,如PFGE分型、ERIC-PCR分型、MLST分型,馮嘉麗在論文中對LH在廣州市售涉淡水產(chǎn)品中分離株進行PFGE和ERIC-PCR分型。香港大學(xué)Woo等[3]針對香港淡水魚及人分離株進行MLST分型�；诜肿臃中偷腖H分子特征研究,比表型分型更加精細和穩(wěn)定,既能用于流行病學(xué)調(diào)查和疾病爆發(fā)的溯源,還能從遺傳進化的角度分析LH菌株間的關(guān)系。而目前,中國大陸尚缺乏LH陽性株的MLST分型結(jié)果及相關(guān)研究分析。研究目的1.收集廣州市醫(yī)院門診腹瀉病例的糞便標(biāo)本進行香港海鷗菌檢測并收集相關(guān)信息,計算發(fā)病率以了解廣州地區(qū)香港海鷗菌所致腹瀉的發(fā)病狀況,并探索危險因素；2.采集廣州市的淡水魚、食用蛙、食用螺(中華圓田螺、福壽螺)進行香港海鷗菌檢測,收集陽性菌株,以了解目前廣州市淡水產(chǎn)品中香港海鷗菌的感染情況及各宿主之間聯(lián)系；3.檢測廣州市環(huán)境水體中香港海鷗菌以探索其攜帶狀況；4.為深入闡明LH的耐藥性及分子遺傳特征,進行以下研究：分析LH分離株抗生素耐藥表型；運用多位點序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技術(shù)對不同宿主來源的LH分離株進行分型分析,評價菌株間的遺傳親緣關(guān)系。研究方法1.廣州市某綜合醫(yī)院門診腹瀉病人糞便標(biāo)本、廣州市農(nóng)貿(mào)市場淡水產(chǎn)品(淡水魚、食用蛙、福壽螺)及水庫水樣中香港海鷗菌檢出情況的調(diào)查研究1.1標(biāo)本收集和資料獲�。�2013年5月至2014年11月收集醫(yī)院感染疾病科門診,消化科門診和急診科胃腸炎腹瀉患者的糞便標(biāo)本；病人的一般情況、臨床表現(xiàn)及流行病學(xué)資料通過自制的《感染性腹瀉調(diào)查表》獲得；2013年12月至2014年5月選擇廣州市4家農(nóng)貿(mào)市場,采集淡水產(chǎn)品,包括草魚、虎紋蛙、中華圓田螺,所采樣品單獨采集后室溫狀態(tài)即時送實驗室檢測。在廣州市內(nèi)各區(qū)(白云區(qū)、天河區(qū)、黃浦區(qū)、花都區(qū)、番禺區(qū)、蘿崗區(qū))分別選擇一個水庫(和龍水庫、新塘水庫、黃埔水庫、金鐘水庫、渾坑水庫、新陂水庫)共6個水庫進行采樣,所取水樣按無菌原則采集后立即送檢。1.2實驗室檢測：1.2.1香港海鷗菌培養(yǎng)及生化鑒定收集到的腹瀉病人標(biāo)本所采集糞便標(biāo)本立即放入Cary-blair氏運送培養(yǎng)基,48h內(nèi)送到實驗室進行細菌培養(yǎng)鑒定,糞便標(biāo)本直接劃線改良頭孢哌酮酮MacConkey瓊脂(CMA)平皿,頭孢哌酮濃度為16mg/L, CMA培養(yǎng)皿置37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,試驗均以HKU1菌株(香港大學(xué)微生物學(xué)系袁國勇教授惠贈)作為陽性對照菌株�？梢杉毦M行革蘭染色、過氧化氫酶、氧化酶、脲酶和三糖鐵等關(guān)鍵生化試驗篩選,以上均符合者再采用API鑒定。淡水產(chǎn)品標(biāo)本在本實驗室經(jīng)相應(yīng)處理后得到的腸道棉拭子接種LH選擇性培養(yǎng)基,及改良頭孢哌酮MacConkey瓊脂(CMA)平皿,后檢測步驟同上。水庫水樣采集需在24h內(nèi)送回實驗室進行檢測,采用濾膜法進行加壓過濾,然后將濾膜置于改良頭孢哌酮MacConkey瓊脂(CMA)平皿進行培養(yǎng),后檢測步驟同上。1.2.2香港海鷗菌基因鑒定1.2.2.1特異性片段聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增目的片段是香港海鷗菌16S rRNA基因特異性序列,上游序列為：5'-ATCCCTAAGGCTAATACCCT-3',下游序列為：5'-TCTCTTCGAGGTTCGGTA-3',擴增片段大小為550bp。反應(yīng)體系：總體積：50μL,其中10xPCR緩沖液25mmol/L MgC12 4μL,2.5 mmol/L dNTPs 4μL,5U/μL TaqDNA聚合酶0.25μL,0.6mmol/L引物各1μL,模版DNA 5μL,雙蒸水29.75μL。反應(yīng)條件為94.0℃ 5min,94.0℃ 30S,53.0℃ 40S,72.0℃ 40S,35個循環(huán),72.0℃ 5min。用DL2000作為PCR擴增產(chǎn)物的Marker,以LH人源株(HKUI,香港大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)系袁國勇教授惠贈)為陽性對照,以大腸桿菌ATCC25922為陰性對照。1.2.2.3 16S rRNA PCR擴增與測序方法同上,引物設(shè)計參照文獻[1],擴增16S rRNA基因序列,序列為：LPW264:5'-GAGTTTGATCMTGGCTCAG-3', LPW265: 5'-GNTACCTTGTTACGACTT-3',長度為1495bp。PCR擴增產(chǎn)物送華大基因公司進行序列測定。2.紙片擴散法確定LH人源分離株的抗生素敏感性采用WHO推薦的K-B紙片擴散法測,判定標(biāo)準按美國CLSI/NCCLSM100-519抗微生物藥物敏感性試驗執(zhí)行標(biāo)準(2009版)腸桿菌科抑制圈直徑的解釋標(biāo)準執(zhí)行。敏感(susceptible,s)率、中介(intermediate,I)率、耐藥(resistant,R)率分別用S%、I%、R%表示。并用大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923作質(zhì)控。3.香港海鷗菌分離株的MLST分型選擇本實驗室保存的采集自廣州市、江門市的香港海鷗菌分離株,提取DNA并純化,采用港大的香港海鷗菌MLST方案,即選擇rho、acnB、trpE、ftsH、 thiC、ilvC、eno等7個基因位點進行PCR擴增,擴增產(chǎn)物送華大基因進行正反測序后,進行拼接,得到等位基因序列,將其提交港大進行比對分析,獲得相應(yīng)的等位基因編號及根據(jù)等位基因譜得出的ST型號。采用eBURST、START2、 mega6等軟件對等位基因編號、ST型號、核苷酸序列進行分析。研究結(jié)果1.廣州市人群現(xiàn)場LH研究于2013年5月-2014年11月采集廣州市某綜合醫(yī)院門診腹瀉患者545例(編號：1004-1548)糞便進行香港海鷗菌的檢測,目前未發(fā)現(xiàn)香港海鷗菌感染陽性病例。2.廣州市部分淡水產(chǎn)品LH檢測結(jié)果324份淡水產(chǎn)品中共檢出香港海鷗菌53株,陽性率為16.36%(53/324),其中草魚256份,香港海鷗菌在草魚的陽性率為17.97%(46/256),15只虎紋蛙中檢出7只陽性,陽性率為46.67%。中華圓田螺53份,未檢出LH。3.廣州市各區(qū)水庫水樣LH檢測結(jié)果于白云區(qū)和龍水庫的水樣培養(yǎng)分離出香港海鷗菌,經(jīng)過生化鑒定及16SrRNA基因序列測定,,并與GenBank中登錄的香港海鷗菌(菌株號HKUI)進行序列比對,其同源性均為99%,這是目前廣東省廣州市水庫中首次發(fā)現(xiàn)香港海鷗菌。水庫分離株菌落形態(tài)：CMA培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)48h后,菌落呈灰白色、半透明、圓形、略凸起、直徑在1.0一1.5mm之間、光滑、不粘連,略顯濕潤,革蘭氏染色鏡檢為革蘭氏陰性,形狀呈螺旋桿狀或展翅海鷗形狀。水庫分離株的生化檢測結(jié)果：均為革蘭氏陰性菌,氧化酶、過氧化氫酶、脲酶、精氨酸雙水解酶、硝酸鹽還原酶、甘露醇、葡糖酸鹽、癸酸鹽等陽性,三糖鐵、鳥氨酸脫羧酶、色氨酸脫羧酶、賴氨酸脫羧酶、硫化氫、吲哚、3-羥基丁酮、明膠酶、p一半乳糖苷酶、纖維糖、山梨醇、鼠李糖、蔗糖、蜜二糖、苦杏仁苷、阿拉伯糖、葡萄糖等陰性。4.廣州市分離株藥敏結(jié)果54株LH分離株對10個種類常用抗生素中的19種藥物均表現(xiàn)不同程度的耐藥性。耐藥率從高到低依次如下：頭孢哌酮(53/54,98.15%),頭孢唑啉(52/54,96.30%),頭孢噻吩(51/54,94.44%),氨芐西林(44/54,81.48%),利福平(38/54,70.37%),紅霉素(15/54,27.78%),哌拉西林(11/54,20.37%),四環(huán)素(10/54,18.52%),頭孢他啶(8/54,14.81%),環(huán)丙沙星(7/54,12.96%),頭孢吡肟(6/54,11.11%),氨曲南(5/54,9.26%),鏈霉素(4/54,7.41%),頭孢呋辛(4/54,7.41%),復(fù)方新諾明(3/54,5.56%),氯霉素(2/54,3.70%),亞胺培南(1/54,1.85%),阿米卡星(1/54,1.85%),慶大霉素(0/54,0%)。各種分離株均發(fā)現(xiàn)對頭孢菌素類抗生素表現(xiàn)耐藥,大多數(shù)對第一、三代頭孢菌素表現(xiàn)耐藥,而對第二、四代頭孢菌素表現(xiàn)較低的耐藥性。大多數(shù)分離株對利福平表現(xiàn)耐藥。5.LH分離株MLST分型結(jié)果5.1 ST型分布結(jié)果ST型分布：本研究LH分離株共分為72個ST型,3株人源分離株中,產(chǎn)生3個ST型,其中一個為已發(fā)現(xiàn)ST型,另外兩個ST型為新發(fā)現(xiàn)型號；55株魚分離株中,產(chǎn)生23個基因型,其中,其中有21個新發(fā)現(xiàn)型號,其余2個已發(fā)現(xiàn)型為ST42、ST45；4株福壽螺分離株,產(chǎn)生4個基因型,均為新型；51株蛙源分離株,產(chǎn)生42個基因型,出現(xiàn)36個新ST型。本次研究的香港海鷗菌分離株中,ST45型出現(xiàn)頻率最高,共28個LH分離株,其中僅有魚來源分離株,地點分布于廣州市與江門市。其次為ST117,共4個LH分離株,且全部屬于蛙來源分離株,采樣地點均在廣州市。再次,ST42、ST23、 ST106均有3個LH分離株。ST101在江門市腹瀉患者來源LH分離株JM-623與廣州市野生虎紋蛙來源LH分離株GZ-W59中均出現(xiàn),提示其可能的傳播途徑。5.2 eBURST軟件進一步分析結(jié)果運用eBURST軟件對等位基因號及ST型號進行分析,可以將所有ST型分成10組克隆復(fù)合體,第一組(group 1) ST45為預(yù)測基礎(chǔ)型(概率為83%)。第二組(group2)包括ST42、ST156、ST143 (ST42為預(yù)測基礎(chǔ)型)；第三組(group3)包括ST128、ST137;第四組(group4)包括ST123、ST122;第五組(group5)包括ST119、ST150;第六組(group6)包括ST117、ST159;第七組(group7)包括ST112、ST160;第八組(group8)包括ST102、ST135;第九組(group9)包括ST101、ST27;第十組(group10)包括ST23、ST149。5.3 START2軟件進一步分析結(jié)果5.3.17個管家基因基因成分及多態(tài)位點分析對于香港海鷗菌的各分離株中所選7個管家基因的等位基因進行堿基組成分析,各管家基因之間與分離株之間的平均G+C%含量差異不大,提示未出現(xiàn)從外源的細菌或其他物種的基因水平轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。對rho、trpE、ilvC、thiC、eno,其dN/dS值0.05(平均值：0.0221,0.0000-0.0417), acnB、ftsH的dN/dS值1。5.3.27個管家基因基因重組測試結(jié)果rho、thiC等2個管家基因?qū)?yīng)SSCF P值與SSUF P值均0.05,其余5個管家基因acnB、ftsH、trpE、ilvC、eno等的SSCF P值與SSUF P值均0.05,二值提示結(jié)論一致,增加了thiC基因重組的可信度。5.3.3 7個管家基因的連鎖不平衡分析魚來源LH分離株、蛙來源LH分離株及螺來源LH分離株中的等位基因均存在連鎖不平衡現(xiàn)象,表明LH分離株不同管家基因之間相互不獨立。而且魚來源分離株ISA最大,其次是螺來源分離株ISA,最后是蛙來源分離株ISA。人源分離株(3株)的等位基因顯示連鎖平衡,但由于其菌株數(shù)目有限,結(jié)果可靠性值得考究。對于所有分離株進行連鎖不平衡分析：方法1 (Haubold):ISA =0.583(P=0.000);方法2 (Maynard Smith):ISA=3.4978(P=0.000)。兩種方法的結(jié)果一致顯示,所有分離株的等位基因存在連鎖不平衡現(xiàn)象,表明LH分離株不同基因座之間相互不獨立。5.3.4所有香港海鷗菌分離株聚類分析廣州市內(nèi)首次檢出的水庫株GZ-SHUI (ST151型)與廣州市內(nèi)多株魚來源分離株及蛙來源分離株有較近的親緣關(guān)系。作為新發(fā)現(xiàn)的江門市來源的福壽螺分離株,其中JM-L16與JM-L143親緣關(guān)系很近,JM-L10與其的親緣關(guān)系僅次之,JM-L2的親緣關(guān)系相對較遠,追溯采樣地點,發(fā)現(xiàn)JM-L143采自東郊魚塘,而其余3株則采自西郊稻田。人源分離株HZ242. JM-623. JM-679的ST型分別為ST100、ST101、ST63,其中ST63在香港也有檢出,為魚源分離株,ST100、ST101為新型,HZ242的親緣關(guān)系與廣州2株蛙源分離株GZ-W334、GZ-W338相近,JM-623與廣州1株蛙源分離株GZ-W59的ST型一致。廣州市來源香港海鷗菌分離株與江門市來源香港海鷗菌分離株存在很多相同ST型,如ST45、ST42、ST106、ST101等,其中ST45及ST42型均在香港有檢出過,且為優(yōu)勢ST型。研究結(jié)論1.本次研究對廣州市某綜合醫(yī)院545例門診腹瀉患者糞便進行香港海鷗菌的檢測,目前未發(fā)現(xiàn)香港海鷗菌感染陽性病例。324份淡水產(chǎn)品中共檢出香港海鷗菌53株,其中香港海鷗菌在草魚的陽性率為17.97%,虎紋蛙中陽性率為46.67%。中華圓田螺中未檢出。本研究在廣州市水庫水樣中分離出香港海鷗菌,證明了在天然水環(huán)境中存在香港海鷗菌。因此,攜帶香港海鷗菌的水庫水可能為香港海鷗菌的感染渠道。同時,水庫是淡水魚類等淡水產(chǎn)品的常見生活環(huán)境,因而作為香港海鷗菌傳播途徑的環(huán)境媒介,對香港海鷗菌的流行具有重要意義。2.各種分離株均發(fā)現(xiàn)對頭孢菌素類抗生素表現(xiàn)耐藥,大多數(shù)對第一、三代頭孢菌素表現(xiàn)耐藥,而對第二、四代頭孢菌素表現(xiàn)較低的耐藥性。大多數(shù)分離株對利福平表現(xiàn)耐藥。大多數(shù)分離株對亞胺培南、慶大霉素、阿米卡星等藥物較敏感。3.本研究所采用的MLST研究方案為選取rho、ancB、ftsH、trpE、ilvC、 thiC、eno等7個管家基因,7個管家基因的多態(tài)位點總數(shù)目為298個。本次研究針對7個管家基因進行基因重組分析,提示rho、thiC等2個管家基因可能存在基因內(nèi)基因重組現(xiàn)象；同時其余5個管家基因acnB、ftsH、trpE、ilvC、eno等未存在基因內(nèi)基因重組現(xiàn)象。該次研究針對各管家基因進行連鎖不平衡分析,結(jié)果顯示等位基因均存在連鎖不平衡現(xiàn)象,表明LH分離株不同管家基因之間相互不獨立。本次對香港海鷗菌進行MLST分型,LH分離株采自廣州市與江門市,選取人源、魚源、蛙源、螺源、水庫來源香港海鷗菌菌株進行研究。研究結(jié)果顯示共檢出63個新ST型(ST99-ST161),說明菌株異質(zhì)性較高,同時對香港海鷗菌MLST數(shù)據(jù)庫進行了補充,可供其他實驗室進行數(shù)據(jù)分享及比較。廣州市內(nèi)檢出的水庫株GZ-SHUI (ST151型)與廣州市內(nèi)多株魚來源分離株及蛙來源分離株有較近的親緣關(guān)系,可能有共同的遺傳祖先。提示水庫水與魚、蛙同時作為海鷗形菌的儲存宿主,可能其間存在傳播環(huán)。作為新發(fā)現(xiàn)的江門市來源的福壽螺分離株,產(chǎn)生4個ST型,均為新型,其親緣關(guān)系與采樣地點無關(guān)。人源分離株HZ242的親緣關(guān)系與廣州2株蛙源分離株相近,人源分離株JM-623與廣州1株蛙源分離株ST型一致。該結(jié)果提示人感染香港海鷗菌可能與進食未煮熟的魚、蛙等導(dǎo)致。LH的某些ST型存在地域較廣,且出現(xiàn)頻率較高,可以為今后的優(yōu)勢流行株的預(yù)測提供科學(xué)依據(jù),也可對這若干種優(yōu)勢ST型對應(yīng)菌株進行進一步的分析研究其毒力、致病性以及耐藥性的相關(guān)特征,為今后的防治策略的制定提供基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R574.62;R446.5
【目錄】：

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【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 羅毓婷;陳定強;楊羚;林勇平;吳愛武;;香港海鷗型菌四環(huán)素耐藥性及其耐藥分子機制研究[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2013年04期

2 申志新;張淑紅;申玉學(xué);王英豪;韓艷青;侯鳳伶;關(guān)文英;;河北省淡水魚首次檢出香港海鷗菌[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2008年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李春輝;艱難梭菌多位點序列分型及感染危險因素的流行病學(xué)[D];中南大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張書蕭;大腸桿菌O157的分子流行病學(xué)調(diào)查和毒力因子研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳道利;詹圣偉;;香港海鷗形菌及其研究[J];安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

2 高璐璐;陳志永;陳清;;香港海鷗型菌的研究進展[J];中國感染控制雜志;2009年05期

3 孫貴娟;趙鵬;;香港海鷗菌研究進展[J];應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2013年03期

4 張金寶;李曉娜;王桂琴;;大腸埃希菌毒力基因研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2014年08期

5 胡靜;朱江峰;鄭南才;陳清;劉志華;吳敏;張歐;馮嘉麗;陳冰;;廣東省江門市淡水產(chǎn)品中香港海鷗菌的檢測[J];疾病監(jiān)測;2013年07期

6 高苗;楊金廣;孫航軍;劉旭;劉偉;王鳳龍;;一株大腸埃希菌烈性噬菌體ΦTRI-1的分離及特性分析[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2015年05期

7 張淑紅;韓艷青;申玉學(xué);王英豪;史紅;申志新;關(guān)文英;侯鳳伶;;河北省淡水魚香港海鷗型菌分布及耐藥性研究[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年11期

8 朱麗東;肖鋒;楊羚;陳定強;;香港海鷗型菌對喹諾酮耐藥性的檢測分析[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2014年19期

9 孫菲;戴華;梁朝霞;彭飛武;王曉春;;湖南省市售淡水魚中香港海鷗菌污染狀況調(diào)查與研究[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年03期

10 朱江峰;鄭南才;廖如燕;陳茂余;張歐;馮嘉麗;賈宇靜;胡靜;陳清;謝金娣;陳胤瑜;俞守義;;廣東省香港海鷗菌感染性腹瀉1例分析[J];中國公共衛(wèi)生;2011年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 朱江峰;江門市腹瀉患者和淡水產(chǎn)品中香港海鷗形菌的檢測和病原學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

2 趙姝靜;大腸桿菌腸毒素卵黃抗體的制備及其抗毒素特性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

3 孟相秋;黑龍江省犢牛腹瀉糞便中大腸桿菌的毒力基因和耐藥性調(diào)查[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王建,沈莉萍,劉佩紅,周錦萍,徐鋒,薛霞;上海市動物及其產(chǎn)品中大腸埃希菌O157:H7帶菌情況的調(diào)查[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2005年04期

2 易力;汪洋;王秋蕓;郭亞飛;王瑩瑩;;大腸埃希菌生物被膜研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2011年01期

3 王晶;李春輝;杜鵬程;曹波;陳晨;盧金星;李中杰;余宏杰;程穎;;中國部分地區(qū)艱難梭菌PCR-核糖體分型及毒素基因多態(tài)性研究[J];中國感染控制雜志;2014年01期

4 朱啟;朱啟;戴賢君;章鐵鋒;張菊芳;;大腸桿菌O_(157)SYBR GreenⅠ實時定量PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2009年09期

5 張平平;朱葉飛;董晨;錢慧敏;朱鳳才;;江蘇省113株大腸桿菌O157:H7的擴增片段長度多態(tài)性分析[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2010年01期

6 顧寶柯,許學(xué)斌,金匯明,胡培玉,席曼芳;上海地區(qū)家畜、家禽及肉制品大腸桿菌O_(157)∶H_7監(jiān)測[J];上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2002年11期

7 楊麗華,許學(xué)斌,劉繼倩,陳秀華,付曄,駱玲飛,汪萍;上海市閔行區(qū)家禽畜大腸桿菌O157∶H7帶菌狀況監(jiān)測[J];上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年07期

8 葛萃萃;鐘青萍;張旺;歐陽鑫;;雙抗夾心ELISA檢測食品中大腸桿菌O157:H7方法研究[J];食品科學(xué);2007年01期

9 周勇;萬成松;;大腸桿菌O157:H7的毒力島與毒力因子的研究進展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進展;2006年02期

10 朱向玲;嚴亞賢;陸承平;劉佩紅;王建;沈莉萍;;MGB(Minor Groove Binder)復(fù)合探針二重實時定量PCR檢測大腸桿菌O157[J];微生物學(xué)通報;2007年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王少輝;禽致病性大腸桿菌DE205B黏附及侵襲相關(guān)因子的致病作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 席美麗;食源性革蘭氏陰性腸道病原菌PFGE分型和大腸桿菌耐藥性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 曹娜娜;免疫PCR技術(shù)檢測腸出血性大腸埃希菌O157：H7[D];吉林大學(xué);2010年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉天乙;;美國1970～1983年非脊髓灰質(zhì)炎腸道病毒分離株的時間及地理模式[J];國外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊;1987年01期

2 張月清，石宏，吳趙永，王虹，許熾　;我國旋毛蟲分離株同工酶分析[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;1995年02期

3 高翔;趙紅慶;甄博珺;張?zhí)m榮;張沖;鄒林;李洪軍;趙愛蘭;王寶蘭;劉曉峰;熊衍文;;北京地區(qū)腹瀉就診患者中腸致病性大腸埃希菌分離株特征分析[J];疾病監(jiān)測;2013年05期

4 王瀟瀟;郝春生;李懿;吳蘊怡;郭會杰;劉宇;馬淑花;李秀玲;;33株柯薩奇病毒A組16型分離株的全基因序列分析[J];中國生物制品學(xué)雜志;2013年03期

5 韋平,韋天超,楊宗維,李莉萍,王林果,韋正吉,韋信賢,李康然,劉祿;禽Ⅰ型副粘病毒各種禽源分離株毒力及其相關(guān)基因的研究[J];病毒學(xué)報;2005年01期

6 華政輝;用生物標(biāo)記的感染性幼蟲體壁蛋白及分泌蛋白對弓蛔蟲和弓蛔線蟲分離株和種的比較[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);1992年04期

7 耿建新;陸承平;范紅結(jié);;馬鏈球菌獸疫亞種10株國內(nèi)豬源分離株對小鼠免疫效力的評價[J];中國人獸共患病學(xué)報;2007年02期

8 聶磊;張慶霞;韓宗璽;邵昱昊;榮駿弓;劉勝旺;孔憲剛;;中國1995~2004年雞傳染性支氣管炎病毒地方分離株膜蛋白基因的遺傳變異分析[J];病毒學(xué)報;2007年04期

9 楊益超;黎學(xué)銘;歐陽頤;謝祖英;;中國兩地旋毛蟲分離株COX1序列分析[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年02期

10 朱敬先;朱海軍;高順強;林元珠;;林生地霉皮損分離株和血液分離株致病性的實驗研究[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2008年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉建奎;魏春華;楊小燕;戴愛玲;李曉華;;福建省PRRSV分離株Nsp2基因不同變異序列鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

2 黃偉堅;連慧香;羅廷榮;陸芹章;蔣小紅;余克倫;劉芳;溫榮輝;韋英益;;5株豬圓環(huán)病毒2型地方分離株的克隆、序列測定及進化分析[A];廣西微生物學(xué)會2003年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2003年

3 韋平;韋正吉;王秀英;磨美蘭;李孟;陳秋英;;廣西不同時期傳染性支氣管炎病毒分離株的分子流行病學(xué)與血清學(xué)的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2009年

4 金文杰;劉岳龍;秦愛建;崔治中;;63株不同地區(qū)傳染性法氏囊病病毒分離株單抗反應(yīng)譜分析[A];第四屆中國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2001年

5 韋莉;楊兵;周文平;韓蘇平;劉爵;;雞傳染性貧血病毒分離株凋亡素基因的克隆與序列測定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)會分會第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2000年

6 郭抗抗;張彥明;張紅;劉華科;寧蓬勃;王晶鈺;;豬圓環(huán)病毒2型分離株優(yōu)勢基因型分析與檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第四次豬病防控學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

7 祝令偉;劉軍;孫洋;齊翀;紀雪;李鵬;田園;馮書章;;豬鏈球菌2型分離株中基因島的鑒定和分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第三屆豬病防控學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

8 何秀苗;韋平;王桂軍;秦愛建;;近年來我國雞傳染性法氏囊病及其病毒分離株的變化特點[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

9 付寶權(quán);劉明遠;姚春雨;李文卉;李永光;王艷華;吳秀萍;張德林;才學(xué)鵬;Radu Blaga;Pascal Boireau;;應(yīng)用PCR技術(shù)鑒定我國旋毛蟲分離株的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

10 任濤;廖明;曹偉勝;辛朝安;;雞傳染性支氣管炎病毒中國地方分離株膜蛋白基因的克隆及序列分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 余志平;[N];中國醫(yī)藥報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 徐愛強;新型人類腸道病毒山東分離株的分子流行病學(xué)及其基因組特征研究[D];山東大學(xué);2012年

2 王晶鈺;雞腎型傳染性支氣管炎病毒陜西分離株N、M和S1基因的分子遺傳變異研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

3 付寶權(quán);旋毛蟲分子鑒定研究與半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因家族的克隆、表達及初步鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

4 段旭基;基因Ⅸ型新城疫病毒病原學(xué)監(jiān)測與不同禽源分離株毒力和遺傳進化研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

5 梁俊文;新城疫分離株P(guān)和HN基因分子進化與致病性的相關(guān)研究[D];山東師范大學(xué);2010年

6 蔣貽海;傳染性支氣管炎致腺胃病變毒株變異的分子基礎(chǔ)及我國和東南亞分離株的分子流行病學(xué)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

7 陳燕芬;布魯氏菌中國分離株遺傳多態(tài)性研究[D];吉林大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：腹瀉患者和生態(tài)環(huán)境香港海鷗菌的檢測及多序列分型研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：214257