本文關(guān)鍵詞：BCL-2，NF-kB，血管緊張素I I-I受體在大鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《瀘州醫(yī)學(xué)院》 2013年

BCL-2，NF-kB，血管緊張素I I-I受體在大鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及其機(jī)制研究

石海燕  

【摘要】：目的：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)近年來(lái)發(fā)病率逐年增高,是一種嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康的常見(jiàn)疾病，是在患者無(wú)過(guò)量飲酒史的情況下，發(fā)生的與酒精性肝病(ALD)相似的肝臟病理學(xué)變化，其病理生理改變主要是肝細(xì)胞發(fā)生炎癥、壞死和凋亡,病程逐漸向脂肪性肝炎、肝纖維化，肝硬化發(fā)展�，F(xiàn)有研究認(rèn)為非酒精性肝病,是一種與遺傳基因易感性以及胰島素抵抗密切相關(guān)的應(yīng)激性代謝性肝損傷。本研究通過(guò)建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型，隨著其病變進(jìn)展在不同時(shí)間點(diǎn)觀察肝細(xì)胞凋亡，炎癥，纖維化，以及相關(guān)的蛋白BCL-2、NF-KB、血管緊素Ⅱ-1受體的表達(dá)情況，從而探討以上三種相關(guān)蛋白在非酒精性肝病中的作用及其機(jī)制，并研究通過(guò)抑制NF-KB表達(dá)后，所致的肝臟病理形態(tài)變化及BCL-2,血管緊素ΙΙ-1受體的表達(dá)改變情況，為研究NAFLD發(fā)病機(jī)制及治療方案提供新的研究佐證。方法：健康成年雄性Spague-Dawlay(SD)大鼠42只按隨機(jī)表為三組3組：正常組18只（普通飼料喂養(yǎng)），模型組18只（高脂飲食喂養(yǎng)），干預(yù)組6只（高脂飲食飼養(yǎng)10周后PDTC腹腔注射4周），分別于6,10,14周末處死各組大鼠6只，每組大鼠處死后以心臟采血，并測(cè)定各組大鼠血脂和轉(zhuǎn)氨酶值，取肝組織標(biāo)本測(cè)定肝指數(shù)（處死大鼠開(kāi)腹后迅速取出肝臟，稱(chēng)肝濕重，（計(jì)算方法:肝濕質(zhì)量/體質(zhì)量×100%），固定并切片后蘇木精-伊紅（HE）染色觀察肝組織病理改變（脂肪變，炎癥，纖維化等）；采用TUNEL法測(cè)肝細(xì)胞凋亡百分?jǐn)?shù)法測(cè)肝細(xì)胞凋亡百分?jǐn)?shù)；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bcl-2，NF-KB在肝組織中表達(dá)情況；RT-PCR法(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)檢測(cè)肝臟血管緊張素二-1受體（AT1R）的表達(dá)。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±S）表示，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同時(shí)間段正常組與模型組組間比較，模型組與正常組組間比較，14周干預(yù)組，模型組，正常組三組比較采用方差分析，并進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，齊者采用單因素方差分析。結(jié)果：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的42只大鼠全部存活，都進(jìn)入結(jié)果進(jìn)行分析。⑴隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，6周末及10周末均成功構(gòu)建非酒精性脂肪肝及非酒精性肝炎模型，14周末模型組出現(xiàn)4只大鼠肝纖維化，干預(yù)組出現(xiàn)1只大鼠纖維化。（2）6、10、14周模型組大鼠在肝濕變數(shù)、血脂、血清轉(zhuǎn)氨酶水平等方面逐步增高，肝組織脂肪變、炎癥程度逐漸加重，后期出現(xiàn)纖維化表現(xiàn)；而干預(yù)組在上述方面亦有增高。（3）HE染色提示模型組6、10、14周動(dòng)物肝組織出現(xiàn)脂肪變性并隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)而加重，，都明顯高于正常組(P0.01);10組大鼠肝臟可見(jiàn)少許氣球樣肝細(xì)胞及程度不等的肝細(xì)胞壞死和小葉內(nèi)炎癥、腺泡內(nèi)散在個(gè)別點(diǎn)灶狀壞死，部分可見(jiàn)點(diǎn)灶狀壞死增多，門(mén)管區(qū)輕中度炎癥。模型組6,10周大鼠未見(jiàn)肝組織纖維化，但造模14周及干預(yù)組14周分別有4/6、1/6只大鼠出現(xiàn)肝細(xì)胞竇周纖維化。6,10,14周模型組大鼠的肝臟活動(dòng)度積分均高于正常組(P0.01），14周末時(shí)，干預(yù)組肝組織的活動(dòng)度積分低于模型組(P0.05）。(4)肝細(xì)胞凋亡百分?jǐn)?shù)隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,模型組6周、10周、14周分別為11.15±0.82、16.19±1.23、19.23±2.31，正常組6周、10周、14周分別為1.11±0.15、1.26±0.11、1.15±0.20,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；⑷蛋白免疫組化顯示：BCL-2蛋白在模型組的細(xì)胞漿，細(xì)胞膜呈棕色表達(dá)，并隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)，染色程度加深，面積增大；Bcl-2在正常組的表達(dá)均為散在弱陽(yáng)性，模型組組6、10、14周陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)漸增加，干預(yù)組Bcl-2表達(dá)低于14周模型組(P0.05),NF-КB細(xì)胞染色呈黃色或綜黃色為陽(yáng)性，定位于細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞核，模型組6、10、14周大鼠肝細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)NF-КB明顯活化，相對(duì)于同時(shí)間段正常組表達(dá)之間差別有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)，而且隨造模時(shí)間延長(zhǎng)，其表達(dá)隨之增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，14周干預(yù)組表達(dá)受較14周造模組受到抑制，但是較正常組比較其表達(dá)也是明顯增高的(P0.05)。(5)RT-PCR法檢測(cè)肝臟AT1RmRNA顯示：AT1RmRNA表達(dá)量在造模組中隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)，表達(dá)量逐漸增加，且每?jī)山M模型組組間都存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p0.05）造模組AT1RmRNA表達(dá)量均明顯高于同時(shí)間段正常組（p0.01），14周末，模型組，正常組，干預(yù)組三組間AT1RmRNA表達(dá)量存在差異（p0.05）。結(jié)論：1.在非酒精性脂肪性肝病大鼠模型中，隨著肝臟病變的加重,其細(xì)胞凋亡,炎癥及纖維化愈加明顯,其表現(xiàn)為Bcl-2,NF-KB,血管緊素ΙΙ-1受體的表達(dá)增加。2在NAFLD發(fā)生發(fā)展過(guò)程中對(duì)NF-KB進(jìn)行抑制調(diào)控后,NAFLD肝細(xì)胞炎癥,纖維化也受到抑制,同時(shí)也出現(xiàn)Bcl-2,血管緊素ΙΙ-1受體表達(dá)的降低,NF-KB可能通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl-2,血管緊素ΙΙ-1受體,的表達(dá)在NAFLD病程中發(fā)揮作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R575.5
【目錄】：

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8 韓紀(jì)昌;李紅兵;張逸捷;李四紅;王伯章;;阿魏酸鈉對(duì)慢性低氧大鼠肺動(dòng)脈壓的影響及機(jī)理研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

9 修麗娟;魏品康;林暉明;龐彬;;消痰解郁方對(duì)慢性應(yīng)激后荷瘤大鼠的行為學(xué)影響及機(jī)制研究[A];第三屆江浙滬中西醫(yī)結(jié)合高峰論壇論文匯編[C];2011年

10 楊鑒冰;孟巧絨;陳梅;劉東平;朱麗紅;;祛異康對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥模型大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的影響[A];全國(guó)第八次中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉華;[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2004年

2 ;[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2005年

3 張艷 方素清 姜?jiǎng)P 宋婷婷;[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2006年

4 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院中醫(yī)學(xué)院 任秀玲;[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

5 姜之炎 吳玉晶;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

6 張超群 范曉莉;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

7 記者　王華鋒;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 張中橋;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

9 張中橋;[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2006年

10 ;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王建楓;鋅對(duì)大鼠肝臟硬脂酰輔酶A去飽和酶-1（SCD-1）的影響及其調(diào)控機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2008年

2 周春雷;五肽化合物PLNPK對(duì)大鼠抗GBM腎炎的治療作用及其作用機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

3 云宇;缺血后處理抗大鼠腎缺血—再灌注損傷的作用機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

4 劉明;梓醇對(duì)腦缺血損傷大鼠恢復(fù)早期神經(jīng)功能的影響及其機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 沙瑩;粒細(xì)胞集落刺激因子對(duì)腦缺血再灌注大鼠的治療及其作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2010年

6 李國(guó);白介素-6中和抗體及索拉菲尼對(duì)野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓的作用及其機(jī)制[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

7 莫雪安;同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療血管性癡呆大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

8 鄒彬;電刺激干預(yù)對(duì)廢用性肌萎縮大鼠線粒體生物合成和呼吸功能的影響[D];北京體育大學(xué);2011年

9 孫鳳平;參芪復(fù)方對(duì)GK大鼠腎臟NF-κB及PPARγ的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 陳笛;藁苯內(nèi)酯對(duì)大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王強(qiáng);升降散對(duì)系膜增生性腎小球腎炎大鼠TLR4、NF-kB表達(dá)的影響[D];青島大學(xué);2010年

2 于明明;硫酸化殼聚糖衍生物對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠脂肪肝的防治作用研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

3 王冠棟;大強(qiáng)度間歇游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠肥胖及炎癥因子的影響[D];河南大學(xué);2010年

4 石海燕;BCL-2，NF-kB，血管緊張素I I-I受體在大鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及其機(jī)制研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2013年

5 劉艦杭;創(chuàng)傷性休克對(duì)大鼠血脂、TNF-α的影響[D];石河子大學(xué);2009年

6 汪濤;膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠呼吸機(jī)所致肺損傷的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

7 宋標(biāo);大鼠腦基底動(dòng)脈EDHF反應(yīng)及外源性EDHF對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

8 許黎忠;螺內(nèi)酯對(duì)百草枯中毒大鼠肺纖維化的干預(yù)作用及其作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

9 詹增土;慢性全腦低灌注大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)改變及MMP-2，3和7的表達(dá)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

10 向永紅;慢性間斷性低氧大鼠氧化應(yīng)激狀態(tài)與RAS相關(guān)性研究及NAC干預(yù)作用[D];中南大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：BCL-2，NF-kB，血管緊張素I I-I受體在大鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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