本文關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒抗體的雙抗原夾心檢測方法的初步建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河南師范大學(xué)》 2014年

丙型肝炎病毒抗體的雙抗原夾心檢測方法的初步建立

李德志  

【摘要】：丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）感染而引起的丙型肝炎現(xiàn)已呈全球分布，將近1.8億人為丙型肝炎的感染者，約占世界人口的3%，我國的感染率約為3.2%。 目前采用的第三代間接ELISA檢測方法由于其在方法學(xué)上的固有缺陷，容易造成假陽性檢測結(jié)果和漏檢；發(fā)展雙抗原夾心ELISA法檢測試劑是試劑發(fā)展的方向，由于HCV抗原的分子量相對較小，用酶來對HCV抗原直接標記時，極易造成空間位阻，使抗體與抗原的進一步結(jié)合受到較大的抑制，所以對HCV抗原的標記是建立抗丙型肝炎病毒抗體雙抗原夾心ELISA檢測法的主要難點，也是目前國內(nèi)外該領(lǐng)域中研究的熱點。 本研究通過生物素親和素系統(tǒng)的放大效應(yīng)來減少抗原標記時的空間位阻，建立抗HCV抗體的雙抗原夾心ELISA檢測方法。利用實驗室已經(jīng)構(gòu)建好的質(zhì)粒載體，表達并純化出夾心ELISA法所用的抗原，將抗原偶聯(lián)到活化的長臂生物素上，制備成長臂生物素化的丙肝抗原，作為夾心抗原，用辣根過氧化物酶標記鏈霉親合素作為酶結(jié)合物，利用辣根過氧化物酶催化底物進行顯色，建立雙抗原夾心檢測法。 采用本研究建立的雙抗原夾心法與對照試劑平行檢測500份臨床標本，對檢測結(jié)果不一致的樣品采用HCV RNA定量檢測試劑盒進行確定驗證。結(jié)果顯示：檢測結(jié)果一致的樣品有493份，其中包括48份陽性樣品和445份陰性樣品，檢測結(jié)果不一致的樣品有7份，其中間接法陽性而夾心法陰性的有4份，HCV RNA檢測均為陰性；夾心法陽性而間接法陰性的有3份，HCV RNA檢測陽性的有2份。 經(jīng)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，本研究建立的雙抗原夾心法與間接法的特異性分別為99.78%、98.89%，靈敏度分別為100%、96%。表明該研究建立的雙抗原夾心法的靈敏度和特異性均優(yōu)于間接法，值得進一步深入研究。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R512.63;R392
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李志梁,錢洪津,焦保明 ,陸青,王素華;鏈酶親和素-生物素ELISA檢測人心肌肌鈣蛋白T[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年04期

2 李麗,張建瓊,夏梅,孟繼鴻;血液透析患者丙型肝炎病毒型特異性PCR基因分型[J];臨床檢驗雜志;2003年04期

3 張賀秋;王國華;陳坤;宋曉國;馮曉燕;王祎;查祎;邱艷;李少波;;丙型肝炎病毒抗體雙抗原夾心法酶聯(lián)免疫試劑的初步臨床評價[J];臨床輸血與檢驗;2006年01期

4 何梅芳;趙紅霞;陳敏;潘玉琴;何幫順;渠利利;徐勇飛;;HCV-RNA和抗-HCV的聯(lián)合檢測在丙型肝炎確診中的臨床意義[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2010年24期

5 張曉春;生物素-親和素技術(shù)的研究進展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2001年04期

6 程勇前,聶青和,周永興;丙型肝炎病毒母嬰傳播機制研究[J];世界華人消化雜志;2002年04期

7 謝立,吳曉東;丙型肝炎病毒檢測方法的研究進展及其臨床意義[J];世界華人消化雜志;2005年07期

8 趙璐;馮悅;夏雪山;;HCV基因型的差異性流行與進化[J];遺傳;2012年06期

9 于洋,祁自柏,周誠,谷金蓮,楊振,張庶民,張華遠,李河民;國產(chǎn)抗HCV酶聯(lián)免疫診斷試劑質(zhì)量分析[J];中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年03期

10 周誠,祁自柏,谷金蓮,張庶民,楊振,于洋,張華遠,李河民;抗HCV國家參考品的研制[J];中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2002年01期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫聿修,朱亮,王嵐,徐敏;軟肝抗纖方對慢性乙型肝炎的抗肝纖維化和改善肝功能作用[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2004年05期

2 郭偉,王桂芬,劉少杰,唐長金;中藥涼血解毒化瘀對慢性重型肝炎治療作用的觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2004年05期

3 李芹;李丹;張良宏;;重肝合劑對慢性重型肝炎肝功能指標的改善作用[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2006年04期

4 孫平;;復(fù)方丹參注射液聯(lián)合甘利欣治療慢性乙型肝炎療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2007年03期

5 谷燦立;張振強;付月簫;李新強;楊韶峰;;中西醫(yī)結(jié)合治療HBeAg陰性慢性乙型肝炎102例[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2007年06期

6 楊小軍;張國梁;楊素霞;施衛(wèi)兵;蔡淑玲;劉永華;;赤茵糖漿治療慢性乙型黃疸性肝炎療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2009年03期

7 朱秀娟;;重用赤芍治療瘀膽型肝炎臨床觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2010年02期

8 方偉;;自擬軟肝煎抗肝纖維化療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2010年02期

9 劉麗麗;張國梁;劉永華;方基水;竇紅漫;楊曉軍;;拉米夫定聯(lián)合中藥清肝排毒飲對慢性乙型肝炎患者肝組織病理學(xué)的影響[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2011年10期

10 劉雯;;中藥聯(lián)合替比夫定治療慢性乙型肝炎療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2012年07期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊沛華;王擁澤;;川芎嗪抗肝纖維化作用機制研究[A];首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)研討會、首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

2 吳寶靈;錢剛;涂鳴漢;張克勤;余海濱;吳敏;劉金明;;肝硬化肝臟儲備功能的評估與臨床分析[A];首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)研討會、首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

3 尹燕耀;肖影群;;慢乙肝患者肝組織內(nèi)CD_4~+,CD_8~+T淋巴細胞表達特點[A];首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)研討會、首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

4 梁青;;乙型肝炎肝硬化患者院內(nèi)感染78例臨床分析[A];首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)研討會、首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

5 聶廣;;重型肝炎的分型、分期與分級[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

6 熊明芳;韓裕斌;胡佳;王莉平;謝慧群;徐云;徐珊珊;項風(fēng)梅;楊衛(wèi)星;;軟堅化瘀法治療血吸蟲性肝硬化的臨床研究[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

7 李小平;余志強;;幽門螺旋桿菌感染與肝硬化肝性腦病發(fā)病的相關(guān)性分析[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

8 尹燕耀;宗亞力;林云華;;中藥全結(jié)腸灌注透析治療肝性腦病的臨床研究[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

9 肖影群;鄒正宇;呂定英;鄧茜;章萍;鐘青梅;;慢性隱匿性乙型肝炎臨床與病理[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

10 龍慶華;廖九女;涂德幸;孫秀光;付小一;涂利民;;肝活檢對轉(zhuǎn)氨酶輕度升高的慢性乙型肝炎的臨床意義[A];全國中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展講習(xí)班、江西省第二次中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 那坤;柔肝顆粒對肝纖維化大鼠TGF-β_1/Smads信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

2 喬胃娟;加減三甲散及其拆方滋陰養(yǎng)血藥調(diào)控肝纖維化TGF-β/Smads通路的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2010年

3 周新穎;加減三甲散及其蟲類藥對肝纖維化大鼠TGF-β/Smads信號通路及MMPs/TIMPs體系影響的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 張愛民;中國HBV基因型分布特點和臨床意義及慢加急性肝衰竭患者HBV基因突變的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2011年

5 劉云霞;耐多藥結(jié)核病影響因素的生態(tài)學(xué)研究[D];山東大學(xué);2011年

6 陳明麗;超聲定量分析方法評價肝纖維化的動物實驗和臨床研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 趙飛;鄉(xiāng)鎮(zhèn)尺度釘螺分布的高風(fēng)險區(qū)域分析與Bayesian時空建模[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 單麗;清代古典霍亂流行研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

9 倪燕君;慢性乙型肝炎患者整合素αvβ3的表達和肝纖維化無創(chuàng)診斷模型的評價[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 劉姝娜;基于內(nèi)切酶特異性剪切作用的疾病DNA電化學(xué)分析方法研究[D];南京師范大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 莊靜;新型超聲造影劑對肝纖維化-肝硬化定量診斷的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 楊靜靜;丙型肝炎病毒基因型及F蛋白與丙型肝炎慢性化、肝癌細胞凋亡的關(guān)系研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

3 劉云;估計人群日本血吸蟲感染狀態(tài)的數(shù)學(xué)模型研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

4 王昊鵬;丙型肝炎病毒F抗體血清分布特點及F蛋白的功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

5 婁清濤;河南省常見惡性腫瘤死亡率趨勢面分析[D];鄭州大學(xué);2010年

6 李衛(wèi)國;重組人干擾素α2b聯(lián)合胸腺肽α1治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎的臨床研究[D];鄭州大學(xué);2010年

7 張柏盛;慢性HBV感染者病原學(xué)特點與肝腎損害、治療及轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 賀希;中西結(jié)合治療慢性乙型重型肝炎的療效觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

9 王雅;鱉龍軟肝片治療慢性乙型肝炎肝纖維化臨床觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

10 楊水才;參仙乙肝靈聯(lián)合阿德福韋酯治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎的臨床研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王樂斌,趙久法;抗-HCV陰性獻血員丙肝病毒感染及意義[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2000年06期

2 郭滿盈,李謀深,李保仝,楊毓華;獻血者血清中HCV NS3和核心蛋白抗原的檢測及臨床意義[J];中國輸血雜志;2001年02期

3 徐衛(wèi)平,施素月,林福地,喬杰;HCV RNA熒光定量PCR法與抗-HCV ELISA法的比較[J];中國輸血雜志;2005年03期

4 朱陽泉;徐長根;李浩;;丙型肝炎病毒及其檢測的實驗研究進展[J];中國輸血雜志;2007年05期

5 ;病毒性肝炎防治方案[J];傳染病信息;2000年04期

6 李志梁，傅朝平，錢學(xué)賢，，黎梅蘭，陸青，王素華;人心肌肌鈣蛋白T的純化和初步鑒定[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1996年02期

7 劉劍榮;黃永建;夏洪嬌;張勇;;丙型肝炎基因型分布特點及流行分析[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2010年12期

8 黃山;王燕;令狐穎;周曉泉;田禾;;酶聯(lián)免疫吸附試驗雙抗體夾心法檢測丙型肝炎病毒抗原的臨床符合性研究[J];貴州醫(yī)藥;2006年01期

9 宋曉國,凌世淦,張賀秋,陳坤,孫柯兒,朱翠霞;重組丙型肝炎病毒表位抗原的研究[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2001年02期

10 桂亞萍;鄭惠;沃琤;孔令和;;九江地區(qū)丙型肝炎病毒基因分型[J];實驗與檢驗醫(yī)學(xué);2010年05期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳萬琪,沈一負,熊太平,徐清云,彭延風(fēng),龍軍愛;卵黃與豬血水兩種雙抗瓊脂平板培養(yǎng)基檢出腦膜炎雙球菌的比較[J];湖南醫(yī)學(xué);1987年06期

2 樊得英;馮若飛;李向茸;張海霞;凡靜靜;沈心亮;馬忠仁;;腦心肌炎病毒抗體雙抗原夾心ELISA檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J];中國生物制品學(xué)雜志;2012年01期

3 張瑞鎬,薛德義;抗HBs的雙抗原夾心BA-ELISA檢測和應(yīng)用[J];上海免疫學(xué)雜志;1989年06期

4 王璋瑜;;單抗之后雙抗將接踵而來嗎?[J];生物技術(shù)通報;1991年01期

5 陳曉釬;雙特異性單克隆抗體的再導(dǎo)向細胞毒作用研究[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;1997年06期

6 肖冰,金迎春,王春;雙抗膠原膜引導(dǎo)牙周組織再生術(shù)患者的護理[J];護理學(xué)雜志;2005年14期

7 汪志輝,侯夢芹,陳霞,陳錦生,鐘永榮;雙抗原酶斑點-ELISA快速檢測幽門螺桿菌抗體的研究[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2005年05期

8 劉萱,李平,石玉玲,易艷萍,任冽,匡鐵吉,段昭輝,王云龍,馬清鈞,曹誠;臨床應(yīng)用重組SARS病毒雙抗原夾心診斷試劑盒的檢測效果評價[J];病毒學(xué)報;2004年02期

9 張帥清;;影響雙抗原夾心ELISA法檢測HIV抗體因素研究[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2008年02期

10 額爾敦,其其格,郭美香,韓玲,劉士山,張麗民,陳杞,張慶榮;雙抗HBsAg抗體夾心時間分辨免疫熒光分析方法的建立[J];中國免疫學(xué)雜志;1999年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 詹林盛;李保昌;孫萍;楊淑華;王全立;;生物素化HCV多表位融合抗原的表達及其在雙抗原夾心檢測方法中的應(yīng)用[A];中國輸血協(xié)會第四屆輸血大會論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 本報記者 宋遜風(fēng);[N];農(nóng)民日報;2002年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 黃龍江;金銀花抗病毒有效成分雙抗素類似物的合成研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

2 李弟灶;金銀花抗病毒有效成分雙抗素類似物的合成與活性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

3 湯雁波;金銀花抗病毒有效成分雙抗素類似物的合成與活性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李德志;丙型肝炎病毒抗體的雙抗原夾心檢測方法的初步建立[D];河南師范大學(xué);2014年

2 康彥紅;PON1遺傳及表觀遺傳變異與雙抗抗血小板治療臨床效應(yīng)的相關(guān)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

3 番登榜;經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)后縮短阿司匹林與氯吡格雷治療時間的有效性與安全性系統(tǒng)評價[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)機構(gòu)

>南方醫(yī)科大學(xué)

>河南師范大學(xué)

>中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)

>廣西醫(yī)科大學(xué)

相關(guān)作者

>康彥紅 >番登榜

>李弟灶 >湯雁波

>李德志 >黃龍江

《中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）》電子雜志社有限公司
同方知網(wǎng)數(shù)字出版技術(shù)股份有限公司
地址：北京清華大學(xué) 84-48信箱 大眾知識服務(wù)
京ICP證040441號
互聯(lián)網(wǎng)出版許可證 新出網(wǎng)證（京）字008號
出版物經(jīng)營許可證 新出發(fā)京批字第直0595號

訂購熱線：400-819-9993 010-62982499
服務(wù)熱線：010-62985026 010-62791813
在線咨詢：
傳真：010-62780361
京公網(wǎng)安備11010802020475號

  本文關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒抗體的雙抗原夾心檢測方法的初步建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：192456