RNAi介導(dǎo)大鼠腺苷A1和A2A受體基因沉默對乙醛誘導(dǎo)的肝星狀細(xì)胞活化增殖的影響
本文選題:腺苷A受體 + 腺苷AA受體 ; 參考:《中國藥理學(xué)通報》2015年01期
【摘要】:目的研究大鼠腺苷A1受體(A1R)和腺苷A2A(A2AR)受體的siRNA分別轉(zhuǎn)染大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)對乙醛誘導(dǎo)的HSC活化增殖的影響。方法采用乙醛誘導(dǎo)HSC-T6建立離體的大鼠酒精性肝纖維化HSC模型,設(shè)計并合成A1R和A2AR小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)序列,通過脂質(zhì)體LipofectamineTM2000瞬時轉(zhuǎn)染至HSC-T6細(xì)胞內(nèi),熒光倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測HSC-T6細(xì)胞增殖變化;利用Real-Time q PCR及Western blot法分別檢測HSC-T6的A1R、A2AR、α-SMA、Collagen I mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果將A1R和A2AR siRNA轉(zhuǎn)染至HSC-T6細(xì)胞內(nèi),A1R和A2AR基因及蛋白的表達(dá)水平明顯降低;同時α-SMA、Collagen I mRNA及蛋白表達(dá)水平亦明顯降低;靶向封閉A1R或A2AR基因的表達(dá)可明顯抑制HSC-T6細(xì)胞的活化增殖。結(jié)論靶向封閉A1R或A2AR基因的表達(dá)可明顯抑制HSC-T6細(xì)胞的活化增殖,A1R和A2AR可能是潛在的酒精性肝纖維化的治療靶點。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of adenosine A1 receptor (A1R) and adenosine A2A1R (A2A2ARR) on HSC activation and proliferation induced by acetaldehyde in rat hepatic stellate cells (HSCs). Methods A rat model of alcoholic liver fibrosis (HSC) was established by acetaldehyde induced HSC-T6 in vitro. A1R and A2AR small interfering RNA(small interfering siRNAs were designed and synthesized. The transfection efficiency of A1R and A2AR small interfering RNA(small interfering siRNAs was observed by fluorescence inverted microscope, and transient transfection of A1R and A2AR into HSC-T6 cells was observed by liposome LipofectamineTM2000. The proliferation of HSC-T6 cells was detected by MTT assay, and the expression of A1RN A2ARand 偽 -SMACollagen I mRNA and protein of HSC-T6 were detected by Real-Time Q PCR and Western blot, respectively. Results the expression levels of A1R and A2AR genes and proteins in HSC-T6 cells were significantly decreased after transfection of A1R and A2AR siRNA, and the expression levels of 偽 -SMA-Collagen I mRNA and protein were also significantly decreased. Blocking the expression of A1R or A2AR genes could significantly inhibit the activation and proliferation of HSC-T6 cells. Conclusion targeting blocking the expression of A1R or A2AR gene can significantly inhibit the activation and proliferation of HSC-T6 cells. A1R and A2AR may be potential therapeutic targets for alcoholic liver fibrosis.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院 安徽醫(yī)科大學(xué)肝病研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No 81270498) 安徽省自然科學(xué)基金項目(No 11040606M194) 安徽高校省級科學(xué)研究重點項目(No KJ2012A148) 國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(No 201310366032)
【分類號】:R575.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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2 張宗h,
本文編號:1890360
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