本文關(guān)鍵詞：氧化應(yīng)激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對(duì)慢加急性肝衰竭能量代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《首都醫(yī)科大學(xué)》 2013年

氧化應(yīng)激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對(duì)慢加急性肝衰竭能量代謝的影響

王克菲  

【摘要】：目的 通過建立慢加急性肝衰竭大鼠模型，探討抗氧化治療對(duì)慢加急性肝衰竭的保護(hù)作用，以及線粒體通透性轉(zhuǎn)換、氧化應(yīng)激損傷與慢加急性肝衰竭能量代謝的相關(guān)性，得出評(píng)價(jià)氧化應(yīng)激損傷的可靠指標(biāo)，為進(jìn)一步探討抗氧化治療對(duì)疾病預(yù)后的影響以及慢加急性肝衰竭發(fā)生過程中線粒體形態(tài)異常、能量代謝障礙的相關(guān)機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。 方法 CCL4植物油溶液腹腔注射的方法建立大鼠肝纖維化模型，在肝纖維化的基礎(chǔ)上給予LPS/D-gal聯(lián)合急性攻擊建立慢加急性肝衰竭大鼠模型(ACLF組)15例；CCL4植物油溶液腹腔注射同期經(jīng)食道灌胃NAC，與肝衰竭組同期給予LPS/D-gal聯(lián)合急性攻擊建立抗氧化治療大鼠模型(NAC組)15例；不予干預(yù)同期飼養(yǎng)的大鼠建立空白對(duì)照模型（正常組）10例。造模完成后取各組肝組織進(jìn)行病理學(xué)鑒定。留取大鼠肝組織標(biāo)本，梯度離心法分離肝細(xì)胞線粒體，ELLSA法測(cè)定線粒體Cytc含量、熒光酶標(biāo)法測(cè)定MPTP RFU；酶標(biāo)法測(cè)定肝組織GSH、MDA、SOD；流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)肝組織中ROS含量。留取大鼠血液標(biāo)本，酶標(biāo)法測(cè)定血漿GSH、MDA、SOD。 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院重癥肝病科收治的住院病人，其中慢加急性（亞急性）肝衰竭15例、慢性乙型肝炎15例，同期于我院體檢中心體檢健康人員10例。觀察三組人群在血常規(guī)、肝功能、凝血象及氧化應(yīng)激指標(biāo)（GSH、MDA、SOD）等的變化。 結(jié)果 1、CCL4植物油腹腔注射6w，大鼠肝臟呈現(xiàn)不同程度肝纖維化改變，表現(xiàn)為肝臟體積增大，顏色蒼白，與周圍組織粘連，表面呈小結(jié)節(jié)或小顆粒狀，邊緣鈍圓，質(zhì)地偏硬。光鏡下可見大量纖維組織增生，纖維間隔增粗，未見假小葉。給予LPS/D-gal急性攻擊后，光鏡下可見原有肝損傷基礎(chǔ)上肝細(xì)胞呈大塊或亞大塊壞死，血竇擴(kuò)張，炎細(xì)胞浸潤，胞漿肥大。殘存肝細(xì)胞可見小泡性脂變或空泡變性。 2、三組大鼠肝臟及血液氧化應(yīng)激損傷檢測(cè)結(jié)果顯示，慢加急性肝衰竭大鼠處于明顯的氧化應(yīng)激狀態(tài)：ACLF組其肝組織GSH、SOD低于正常大鼠及NAC組，差別無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其肝組織MDA明顯高于正常大鼠及NAC組大鼠，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p0.05。NAC組肝組織GSH、SOD水平接近正常大鼠，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其肝組織MDA高于正常大鼠，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p0.05。ACLF組，其血漿GSH、SOD明顯低于正常大鼠及NAC組，MDA明顯高于正常大鼠及NAC組大鼠，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p0.05。NAC組血漿GSH、SOD水平接近正常大鼠，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、分別檢測(cè)三組大鼠Cytc含量，結(jié)果為：ACLF組0.997±0.275ng/mgprot、正常組3.966±2.063ng/mgprot、NAC組1.406±0.656ng/mgprot，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p0.05。 4、分別檢測(cè)三組大鼠MPTP開放情況，結(jié)果為：ACLF組123152.094±53925.851RFU/mgprot、 NAC組72524.074±5168.649RFU/mgprot、正常組48260.106±8596.065RFU/mgprot，三組結(jié)果雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但有改善的趨勢(shì)，P值0.068，與0.05較為接近，考慮可能與樣本量少有關(guān)。 5、Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，MPTP開放情況與線粒體Cytc含量呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.858，與ATP含量呈負(fù)相關(guān)，r=-0.799；線粒體Cytc含量與ATP生成量呈正相關(guān)，r=0.78。 6、慢加急（亞急）性患者處于明顯的氧化應(yīng)激狀態(tài)，其血漿GSH、SOD水平明顯降低，MDA水平明顯升高：與正常組相比，ACLF組及慢肝組血液MDA水平均升高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p0.05；與ACLF組相比，正常組及慢肝組GSH水平相近，慢肝組GSH略低，ACLF組與慢肝組及正常組血液GSH差距明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，，p0.05。 結(jié)論 1、CCL4植物油溶液連續(xù)注射6w可造成穩(wěn)定的大鼠肝纖維化模型，在肝纖維化基礎(chǔ)上給予LPS/D-gal急性攻擊，可造成慢加急性肝衰竭大鼠模型； 2、慢加急性肝衰竭時(shí)機(jī)體處于明顯的氧化應(yīng)激狀態(tài)，同時(shí)MPTP大量開放、Cytc通過MPTP孔道外流入胞漿、ATP生成障礙，這可能是臨床上此類病人發(fā)生物質(zhì)能量代謝障礙的原因之一； 3、通過外源性補(bǔ)給作為GSH前體的NAC，可在一定程度上補(bǔ)充機(jī)體還原性物質(zhì)、提高機(jī)體抗氧化能力，病理結(jié)果顯示，這種抗氧化作用在一定程度程度上抑制了肝纖維化的形成、延緩了肝衰竭疾病的進(jìn)程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：首都醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R575.3
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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7 鄒勇;陳韜;韓梅芳;王洪武;嚴(yán)偉民;宋戈;武澤光;王曉晶;朱傳龍;羅小平;寧琴;;肝臟NK細(xì)胞在病毒誘導(dǎo)的急性肝衰竭中通過 Fas/FasL和NKG2D/NKG2DL途徑增強(qiáng)對(duì)肝細(xì)胞的殺傷[A];病毒性肝炎慢性化、重癥化基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

8 張磊;谷甸娜;鄭毅;盧潔;張曉華;鄭明華;陳永平;;烏司他丁對(duì)急性肝衰竭大鼠肝臟Bad、Bax蛋白表達(dá)的影響[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

9 杜寧;莊永龍;胡瑾華;劉曉燕;岳小敬;王會(huì);崔志飛;周渝霞;郝玉清;王慧芬;;慢性肝衰竭臨床數(shù)據(jù)庫的建立及其應(yīng)用價(jià)值初探[A];全國第2屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議暨國家中醫(yī)藥管理局第1屆傳染病協(xié)作組會(huì)議論文匯編[C];2008年

10 張畔;楊榮蘭;;血漿置換治療急性肝衰竭的臨床觀察[A];2000年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2000年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蕭紅;[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

2 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院急診科 教授 羅學(xué)宏;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

3 王麗;[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

4 段鐘平;[N];健康報(bào);2007年

5 南通大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽外科主任 陳鐘;[N];健康報(bào);2007年

6 黃顯斌　何巍;[N];健康報(bào);2009年

7 特約記者 劉慧;[N];保健時(shí)報(bào);2007年

8 莊慶平;[N];健康報(bào);2006年

9 李艷新　任文靜;[N];哈爾濱日?qǐng)?bào);2010年

10 陳師睿　倪洪珍　蔣銳　杜精銳　余鳳　馬莉;[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉慧敏;解毒涼血法治療乙型肝炎慢加急性肝衰竭的療效評(píng)價(jià)及機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

2 郝紹瑞;李氏人工肝系統(tǒng)治療乙肝慢加急性肝衰竭的療效和預(yù)后評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2013年

3 吳會(huì)玲;慢加急性肝衰竭內(nèi)毒素血癥對(duì)清道夫受體CD163作用的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

4 閆濤;乙型慢加急性肝衰竭患者HBV基因突變的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

5 吳艷玲;刺五加酸、紅景天苷對(duì)小鼠急性肝衰竭的保護(hù)作用及干預(yù)機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2009年

6 李羽;永生化人胚胎肝細(xì)胞系的建立及肝細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

7 呂國良;以漏斗形流化床式反應(yīng)器為核心的新型生物人工肝系統(tǒng)組建及療效評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2011年

8 李濤;肝病患者谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶P1的研究[D];山東大學(xué);2013年

9 郝彥琴;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

10 姜雪強(qiáng);脂氧素對(duì)急性肝衰竭的保護(hù)作用及其作用機(jī)制探討[D];華中科技大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張海鳴;甲狀腺激素對(duì)急性肝衰竭大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用[D];江蘇大學(xué);2010年

2 郭朝陽;慢加急性肝衰竭患者外周血腫瘤壞死因子-α基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的研究[D];山東大學(xué);2010年

3 張強(qiáng);79例亞急性肝衰竭患者臨床特征分析及中西醫(yī)結(jié)合治療療效評(píng)價(jià)[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 黃建偉;四氯化碳構(gòu)建犬急性肝衰竭模型及血液凈化效果探索[D];暨南大學(xué);2010年

5 周鵬程;微囊懸浮型流化床式生物人工肝治療急性肝衰竭豬的血清代謝組學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2012年

6 李曉爽;慢加急性肝衰竭預(yù)后的回顧性臨床研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

7 李憲;血液灌流聯(lián)合血液濾過治療犬急性肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2010年

8 高嶺;慢加急性肝衰竭糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)[D];山東大學(xué);2010年

9 張茜茜;影響慢加急性肝衰竭患者預(yù)后的相關(guān)因素研究[D];吉林大學(xué);2013年

10 楊玲玲;大鼠同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：氧化應(yīng)激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對(duì)慢加急性肝衰竭能量代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：171500