本文關(guān)鍵詞：氧化應激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對慢加急性肝衰竭能量代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《首都醫(yī)科大學》 2013年

氧化應激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對慢加急性肝衰竭能量代謝的影響

王克菲  

【摘要】：目的 通過建立慢加急性肝衰竭大鼠模型，探討抗氧化治療對慢加急性肝衰竭的保護作用，以及線粒體通透性轉(zhuǎn)換、氧化應激損傷與慢加急性肝衰竭能量代謝的相關(guān)性，得出評價氧化應激損傷的可靠指標，為進一步探討抗氧化治療對疾病預后的影響以及慢加急性肝衰竭發(fā)生過程中線粒體形態(tài)異常、能量代謝障礙的相關(guān)機制的研究奠定基礎。 方法 CCL4植物油溶液腹腔注射的方法建立大鼠肝纖維化模型，在肝纖維化的基礎上給予LPS/D-gal聯(lián)合急性攻擊建立慢加急性肝衰竭大鼠模型(ACLF組)15例；CCL4植物油溶液腹腔注射同期經(jīng)食道灌胃NAC，與肝衰竭組同期給予LPS/D-gal聯(lián)合急性攻擊建立抗氧化治療大鼠模型(NAC組)15例；不予干預同期飼養(yǎng)的大鼠建立空白對照模型（正常組）10例。造模完成后取各組肝組織進行病理學鑒定。留取大鼠肝組織標本，梯度離心法分離肝細胞線粒體，ELLSA法測定線粒體Cytc含量、熒光酶標法測定MPTP RFU；酶標法測定肝組織GSH、MDA、SOD；流式細胞技術(shù)檢測肝組織中ROS含量。留取大鼠血液標本，酶標法測定血漿GSH、MDA、SOD。 首都醫(yī)科大學附屬北京佑安醫(yī)院重癥肝病科收治的住院病人，其中慢加急性（亞急性）肝衰竭15例、慢性乙型肝炎15例，同期于我院體檢中心體檢健康人員10例。觀察三組人群在血常規(guī)、肝功能、凝血象及氧化應激指標（GSH、MDA、SOD）等的變化。 結(jié)果 1、CCL4植物油腹腔注射6w，大鼠肝臟呈現(xiàn)不同程度肝纖維化改變，表現(xiàn)為肝臟體積增大，顏色蒼白，與周圍組織粘連，表面呈小結(jié)節(jié)或小顆粒狀，邊緣鈍圓，質(zhì)地偏硬。光鏡下可見大量纖維組織增生，纖維間隔增粗，未見假小葉。給予LPS/D-gal急性攻擊后，光鏡下可見原有肝損傷基礎上肝細胞呈大塊或亞大塊壞死，血竇擴張，炎細胞浸潤，胞漿肥大。殘存肝細胞可見小泡性脂變或空泡變性。 2、三組大鼠肝臟及血液氧化應激損傷檢測結(jié)果顯示，慢加急性肝衰竭大鼠處于明顯的氧化應激狀態(tài)：ACLF組其肝組織GSH、SOD低于正常大鼠及NAC組，差別無顯著統(tǒng)計學意義；其肝組織MDA明顯高于正常大鼠及NAC組大鼠，差別有統(tǒng)計學意義，p0.05。NAC組肝組織GSH、SOD水平接近正常大鼠，差別無統(tǒng)計學意義；其肝組織MDA高于正常大鼠，差別有統(tǒng)計學意義，p0.05。ACLF組，其血漿GSH、SOD明顯低于正常大鼠及NAC組，MDA明顯高于正常大鼠及NAC組大鼠，差別有統(tǒng)計學意義，p0.05。NAC組血漿GSH、SOD水平接近正常大鼠，差別無統(tǒng)計學意義。 3、分別檢測三組大鼠Cytc含量，結(jié)果為：ACLF組0.997±0.275ng/mgprot、正常組3.966±2.063ng/mgprot、NAC組1.406±0.656ng/mgprot，差別具有統(tǒng)計學意義，p0.05。 4、分別檢測三組大鼠MPTP開放情況，結(jié)果為：ACLF組123152.094±53925.851RFU/mgprot、 NAC組72524.074±5168.649RFU/mgprot、正常組48260.106±8596.065RFU/mgprot，三組結(jié)果雖無統(tǒng)計學差異，但有改善的趨勢，P值0.068，與0.05較為接近，考慮可能與樣本量少有關(guān)。 5、Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，MPTP開放情況與線粒體Cytc含量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.858，與ATP含量呈負相關(guān)，r=-0.799；線粒體Cytc含量與ATP生成量呈正相關(guān)，r=0.78。 6、慢加急（亞急）性患者處于明顯的氧化應激狀態(tài)，其血漿GSH、SOD水平明顯降低，MDA水平明顯升高：與正常組相比，ACLF組及慢肝組血液MDA水平均升高，差別具有統(tǒng)計學意義，p0.05；與ACLF組相比，正常組及慢肝組GSH水平相近，慢肝組GSH略低，ACLF組與慢肝組及正常組血液GSH差距明顯，具有統(tǒng)計學意義，，p0.05。 結(jié)論 1、CCL4植物油溶液連續(xù)注射6w可造成穩(wěn)定的大鼠肝纖維化模型，在肝纖維化基礎上給予LPS/D-gal急性攻擊，可造成慢加急性肝衰竭大鼠模型； 2、慢加急性肝衰竭時機體處于明顯的氧化應激狀態(tài)，同時MPTP大量開放、Cytc通過MPTP孔道外流入胞漿、ATP生成障礙，這可能是臨床上此類病人發(fā)生物質(zhì)能量代謝障礙的原因之一； 3、通過外源性補給作為GSH前體的NAC，可在一定程度上補充機體還原性物質(zhì)、提高機體抗氧化能力，病理結(jié)果顯示，這種抗氧化作用在一定程度程度上抑制了肝纖維化的形成、延緩了肝衰竭疾病的進程。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：首都醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R575.3
【目錄】：

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6 李曉爽;慢加急性肝衰竭預后的回顧性臨床研究[D];天津醫(yī)科大學;2013年

7 李憲;血液灌流聯(lián)合血液濾過治療犬急性肝衰竭的實驗研究[D];暨南大學;2010年

8 高嶺;慢加急性肝衰竭糖皮質(zhì)激素受體的表達[D];山東大學;2010年

9 張茜茜;影響慢加急性肝衰竭患者預后的相關(guān)因素研究[D];吉林大學;2013年

10 楊玲玲;大鼠同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療急性肝衰竭的實驗研究[D];南昌大學;2011年

  本文關(guān)鍵詞：氧化應激損傷、線粒體通透性轉(zhuǎn)換對慢加急性肝衰竭能量代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：171500