活體長爪沙鼠幽門螺桿菌檢測方法的建立
本文選題:長爪沙鼠 切入點:幽門螺桿菌 出處:《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的應(yīng)用巢式PCR方法通過胃液活體檢測長爪沙鼠幽門螺桿菌感染,從而建立可以持續(xù)監(jiān)測長爪沙鼠幽門螺桿菌感染的檢測技術(shù)。方法體外培養(yǎng)幽門螺桿菌并接種至長爪沙鼠體內(nèi),在感染后第10周使用普通PCR方法檢測長爪沙鼠胃液,使用巢式PCR方法對長爪沙鼠胃液、胃組織、十二指腸內(nèi)容物、結(jié)腸糞便進(jìn)行檢測;同時還利用快速尿素酶試驗和血清ELISA方法等對比分析巢式PCR方法的準(zhǔn)確性,上述PCR產(chǎn)物均經(jīng)過測序驗證。結(jié)果普通PCR方法檢測胃液、巢式PCR方法檢測胃液、胃組織、十二指腸內(nèi)容物,結(jié)腸糞便以及快速尿素酶試驗、血清ELISA檢測方法檢驗結(jié)果陽性率分別為30%、100%、100%、90%、10%、100%和0%。比較不同檢測方法的檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),胃液巢式PCR、胃組織巢式PCR和快速尿素酶試驗均有100%的檢測率,普通PCR檢測胃液的方法、結(jié)腸糞便巢式PCR方法及血清學(xué)ELISA檢測方法檢測率均比較低。結(jié)論胃液巢式PCR檢測方法由于其特異性、準(zhǔn)確性及靈敏性較高等特點可以用于長爪沙鼠幽門螺桿菌的長期檢測,特別是對于預(yù)防和治療幽門螺桿菌感染的實驗具有重要價值。
[Abstract]:The purpose of a nested PCR method for in vivo detection of gastric juice by gerbils infected with Helicobacter pylori in Mongolian gerbils can continuously monitor the detection of Helicobacter pylori infection. In order to establish technology of Helicobacter pylori and inoculated into the gerbil in vivo culture method in vitro, in tenth weeks after infection with the common PCR method for detection of Mongolian gerbil gastric juice on Mongolian gerbil gastric juice, gastric tissues by nested PCR method, duodenal contents, colon feces were detected; and also the use of the rapid urease test and serum ELISA method comparative analysis the accuracy of the nested PCR method, the PCR products were verified by sequencing. Results the common PCR method for detection of gastric juice, the nested PCR detection of gastric juice, gastric tissue. Duodenal contents, fecal and rapid urease test, the test results of serum ELISA detection positive rate were 30%, 100%, 100%, 90%, 10%, 100% and 0%. Results detection method for comparison of different gastric juice, nested PCR, nested PCR detection of gastric tissue and rapid urease test were 100% rate, general methods of PCR detection of gastric juice, fecal nested PCR method and serological detection method for ELISA detection rate was relatively low. Conclusion gastric fluid detection method of nested PCR because of its specific characteristics higher accuracy and sensitivity can be used for long-term detection of Helicobacter pylori in Mongolian gerbils, especially has important value for the prevention and treatment of Helicobacter pylori infection in the experiment.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;中國食品藥品檢定研究院實驗動物資源研究所;
【基金】:國家科技支撐計劃課題(2015BAI09B01) 國家自然科學(xué)基金項目(31572348) 北京自然科學(xué)基金重點項目(714100)
【分類號】:R-332;R573
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,本文編號:1564755
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