本文選題：肝干細(xì)胞　切入點(diǎn)：CK　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的明確小鼠肝臟中的細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)陽(yáng)性(CK19~+)細(xì)胞是否可分化為成熟肝細(xì)胞。方法利用CK19~(CreERT)小鼠和Rosa26-GFP小鼠雜交得到CK19~(CreERT)/Rosa26-GFP雙轉(zhuǎn)基因小鼠,注射他莫昔芬(tamoxifen,TM)后檢測(cè)小鼠肝臟中CK19~+細(xì)胞的GFP標(biāo)記情況。在此基礎(chǔ)上分別構(gòu)建3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氫-2,4,6-三甲基吡啶和四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝臟損傷模型,采用肝臟組織冰凍切片結(jié)合免疫熒光染色檢測(cè)肝臟中GFP標(biāo)記的CK19~+細(xì)胞的分化情況。結(jié)果獲得CK19~(CreERT)/Rosa26-GFP雙轉(zhuǎn)基因小鼠,免疫熒光染色結(jié)果顯示CK19~+細(xì)胞可被GFP標(biāo)記。在DDC肝臟損傷模型小鼠中檢測(cè)到增生性小膽管內(nèi)有GFP~+細(xì)胞,這些GFP~+細(xì)胞表達(dá)膽管上皮細(xì)胞標(biāo)志物CK19,且DDC肝損傷模型小鼠中GFP~+膽管細(xì)胞比例高于未損傷對(duì)照組[(63.5±6.3)%vs(53.6±4.8)%,P0.05];在CCl4肝損傷模型組小鼠中檢測(cè)到肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞中有GFP~+細(xì)胞,這些GFP~+細(xì)胞表達(dá)成熟肝細(xì)胞標(biāo)志物白蛋白(ALB),且CCl4肝損傷模型組小鼠肝臟中GFP~+細(xì)胞比例高于未損傷對(duì)照組[(0.15±0.02)%vs(0.008±0.003)%,P0.01]。結(jié)論小鼠肝臟內(nèi)的CK19~+細(xì)胞群體中存在具有肝向分化潛能的前體細(xì)胞,可能為真正的肝干細(xì)胞的識(shí)別鑒定提供一個(gè)新線索。
[Abstract]:Objective to determine whether cytokeratin 19 cytokeratin 19 (CK19) positive cells can differentiate into mature hepatocytes in mouse liver. Methods CK19~(CreERT)/Rosa26-GFP double transgenic mice were obtained by hybridization with Rosa26-GFP mice. The GFP labeling of CK19 ~ ~ cells in mouse liver was detected after tamoxifende (TMN) injection. On the basis of this, the liver injury models of 3O5-diethoxycarbonyl-4-dihydro-4-dihydro-6-trimethylpyridine and carbon tetrachloridede CCl4 were constructed, respectively. The differentiation of CK19 ~ ~ cells labeled with GFP in liver was detected by using frozen sections of liver tissue and immunofluorescence staining. Immunofluorescence staining showed that CK19 ~ ~ cells could be labeled by GFP. GFP~ cells were found in proliferative small bile duct in DDC liver injury model mice. These GFP~ cells expressed CK19, and the proportion of GFP~ cells in DDC liver injury model mice was higher than that in the uninjured control group [63.5 鹵6.3% vs 53.6 鹵4.8]. GFP~ cells were detected in liver parenchymal cells in CCl4 liver injury model group. The ratio of GFP~ cells in CCl4 liver injury model group was higher than that in uninjured control group [0.15 鹵0.02 鹵0.008 鹵0.003] .Conclusion there are liver differentiation potential progenitor cells in CK19~ ~ cell population of mouse liver, and the expression of ALB ~ + in GFP~ + cells is higher than that in normal control group [0. 15 鹵0. 02% vs 0. 008 鹵0. 003]. It may provide a new clue for the identification of true liver stem cells.
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部細(xì)胞生物學(xué)教研室;第二軍醫(yī)大學(xué)國(guó)際合作腫瘤研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31401166,81670573) 國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(“973計(jì)劃”,2010CB945602)~~
【分類號(hào)】：R575

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭鳳嬌;傅泳航;劉光澤;張建;李秀梅;陳媚娟;孔祥平;;HBV轉(zhuǎn)基因小鼠血液生理生化指標(biāo)檢測(cè)分析[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

2 鄭素軍;轉(zhuǎn)基因小鼠在乙肝分子生物學(xué)及免疫學(xué)研究中的應(yīng)用[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年02期

3 黃娟娟;李兵;曹力波;歐陽(yáng)林旗;劉世坤;;酒精對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟的損傷作用及其機(jī)制[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2010年03期

4 于慧杰;盛國(guó)光;;HBV轉(zhuǎn)基因小鼠的病理學(xué)及免疫學(xué)研究進(jìn)展[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2013年06期

5 胡衛(wèi)江;HBV轉(zhuǎn)基因小鼠研究進(jìn)展[J];張家口醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1996年01期

6 鄭鳳嬌;劉光澤;龔燕紅;張建;李秀梅;孔祥平;;HBV轉(zhuǎn)基因小鼠血液生理生化指標(biāo)檢測(cè)分析[J];華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

7 易學(xué)瑞,曾瀅,祖萍,朱征宇,劉光澤,甘建輝,袁有成,汪恩浩,張宜俊;基因重組(酵母)乙肝疫苗對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2003年03期

8 張樹忠,李建秀,戚中田,胡以平;丙肝病毒ns3基因轉(zhuǎn)基因小鼠的產(chǎn)生[J];癌變.畸變.突變;1998年04期

9 侯安繼;楊占秋;高春華;蔣涵;黃菁;;短波輻射對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠樹突狀細(xì)胞功能的影響[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2006年03期

10 劉博;蘇文靜;馬力;潘蕾;連建奇;黃長(zhǎng)形;白雪帆;;大劑量HBsAg對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年05期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 辛靈彪;SND1轉(zhuǎn)基因小鼠改善高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪肝和胰島素抵抗[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

2 丁琛;HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞比較蛋白質(zhì)組學(xué)及血清組學(xué)研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前4條

1 李茂涓;角蛋白1轉(zhuǎn)基因小鼠建系及其在小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中的作用研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

2 卓萌;Ub-HBcAg-CTP融合蛋白誘導(dǎo)特異性CTL抑制轉(zhuǎn)基因小鼠HBV復(fù)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];上海交通大學(xué);2015年

3 李敏然;腺病毒介導(dǎo)HBV載體表達(dá)雙靶位shRNA抑制HBV轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)HBV表達(dá)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

4 劉博;B7-H1蛋白疫苗對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠HBsAg免疫效果影響的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1561961