表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞對巨噬細(xì)胞分化影響的初步研究
本文關(guān)鍵詞: 乙型肝炎病毒 肝細(xì)胞癌 巨噬細(xì)胞 分化 基因芯片 出處:《中國病原生物學(xué)雜志》2017年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的了解表達(dá)乙型肝炎病毒(HBV)的肝癌細(xì)胞在體外環(huán)境下對巨噬細(xì)胞分化的影響。方法收集表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞HepG2.215和對照肝癌細(xì)胞HepG2培養(yǎng)上清,聯(lián)合佛波酯(PMA,50ng/ml)刺激單核細(xì)胞THP-1分化為巨噬細(xì)胞,采用Real-time PCR(RT-PCR)檢測M1型巨噬細(xì)胞分化標(biāo)志HLA-DR、CD86和M2型巨噬細(xì)胞分化標(biāo)志CD206、CD163的表達(dá);采用基因芯片技術(shù)檢測分化的巨噬細(xì)胞基因表達(dá)變化結(jié)果表達(dá)HBV的HepG2.215細(xì)胞培養(yǎng)上清聯(lián)合PMA成功刺激THP-1分化成巨噬細(xì)胞。RT-PCR檢測HepG2.215培養(yǎng)上清誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞CD163和CD206基因表達(dá)上調(diào),HLA-DR基因表達(dá)小調(diào);基因芯片的檢測顯示,與HepG2+PMA比較,HepG2.215培養(yǎng)上清+PMA誘導(dǎo)形成的巨噬細(xì)胞有23個(gè)基因表達(dá)存在差異,其中6個(gè)基因表達(dá)上調(diào),其余基因表達(dá)下調(diào),這些表達(dá)差異的基因與基因的轉(zhuǎn)錄激活、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞代謝和免疫抑制等生物學(xué)功能相關(guān)。結(jié)論表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型分化,且多種基因的表達(dá)異常與HBV感染肝癌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的巨噬細(xì)胞有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hepatoma cells expressing hepatitis B virus (HBV) on macrophage differentiation in vitro. Methods the supernatants of HepG2.215 cells expressing HBV and HepG2 cells of control liver cancer cells were collected. Combined with PMA 50 ng / ml, monocytes were induced to differentiate into macrophages by THP-1. The expression of HLA-DR CD86 and CD206 CD163 was detected by Real-time PCR RT-PCR. Detection of gene expression in differentiated macrophages by gene microarray the supernatants of HepG2.215 cells expressing HBV and PMA successfully stimulated the differentiation of THP-1 into macrophages. RT-PCR was used to detect the CD163 and CD206 bases induced by the supernatants of HepG2.215 culture. The expression of HLA-DR gene was up-regulated in minor; Gene microarray analysis showed that 23 of the macrophages induced by PMA in the supernatant of HepG2.215 were different in gene expression, 6 of which were up-regulated, and the other were down-regulated, compared with HepG2 PMA. These differentially expressed genes are related to the biological functions of transcriptional activation, signal transduction, cell metabolism and immunosuppression. Conclusion hepatoma cells expressing HBV can induce macrophages to differentiate into M2 type. The abnormal expression of many genes was related to macrophages induced by HBV infection in hepatoma cells.
【作者單位】: 徐州醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室江蘇省免疫與代謝重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高二(8)班;
【基金】:江蘇省教育廳高校自然科學(xué)研究基金項(xiàng)目(No.16KJB310017) 中國博士后基金項(xiàng)目(No.2016M591925) 江蘇省博士后科研資助計(jì)劃項(xiàng)目(No.1601190C) 徐州醫(yī)學(xué)院課題項(xiàng)目(No.2012KJ13) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目(No.PAPD)
【分類號】:R512.62;R735.7
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本文編號:1518278
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