本文關(guān)鍵詞： 潰瘍性結(jié)腸炎 MMP-2 MMP-9 高效液相色譜法 腸黏膜通透性 實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎 MMP-2 MMP-9 腸黏膜通透性　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：研究表明，潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者存在腸黏膜通透性升高的現(xiàn)象，同時(shí)有基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)表達(dá)的改變，MMPs在一定程度上參與腸道炎癥和腸黏膜屏障功能損傷的過程，但在UC患者中是否存在一定的關(guān)聯(lián)尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過觀察活動(dòng)期UC患者中MMP-2，9的水平及腸黏膜通透性的改變，探討UC患者中MMP-2，-9與腸黏膜通透性的臨床關(guān)聯(lián)。 方法：收集臨床確診的38例活動(dòng)性UC患者和30例健康志愿者（正常對(duì)照組）的外周血，采用ELISA法檢測(cè)MMP-2、MMP-9水平，同時(shí)收集UC患者的臨床資料。采用高效液相色譜(HPLC)方法檢測(cè)UC組和正常對(duì)照組口服乳果糖(L)和甘露醇(M)測(cè)試液后尿液中L/M比值作為腸黏膜通透性檢測(cè)指標(biāo)。 結(jié)果：(1)潰瘍性結(jié)腸炎患者臨床資料分析：UC患者中，按嚴(yán)重程度分類：輕度12例（32%），中度14例（36%），重度12例（32%）；按病變范圍分類：全結(jié)腸炎12例（32%），左半結(jié)腸炎8例（21%），直乙狀結(jié)腸炎9例（23%），直腸炎9例（24%）。(2)UC組中MMP-2，-9的表達(dá)：UC組外周血中MMP-2為（8.34±2.54）ng/ml，MMP-9為（8.56±2.45）ng/ml；正常對(duì)照組MMP-2為（1.91±0.30） ng/ml，MMP-9為（2.14±0.31）ng/ml，UC組MMP-2水平和MMP-9水平高于正常對(duì)照組（t=2.414，，P0.05；t=2.576，P0.05）。其中，重度組表達(dá)水平高于中度組MMP-2：（10.66±1.5VS6.12±0.43，P0.01）;MMP-9：（11.47±1.08VS5.39±0.51，P0.01）；全結(jié)腸炎組表達(dá)水平高于左半結(jié)腸炎組MMP-2：（12.37±1.12VS9.56±0.54，P0.01）、MMP-9：（13.11±1.07VS9.41±0.53，P0.01）。(3) UC患者和健康對(duì)照者尿中L/M測(cè)定結(jié)果:UC組L/M為(0.057±0.020)，正常對(duì)照組L/M為(0.030±0.005)，二者相比差異有顯著性（P0.05）。重度組患者L/M比值高于中度組，（0.067±0.014VS0.049±0.011，P0.05）；全結(jié)腸炎組患者L/M比值高于左半結(jié)腸炎組（0.070±0.009VS0.062±0.006，P0.05）。(4) UC組患者外周血中MMP-2、MMP-9水平與其L/M比值呈一定程度相關(guān)，（r=0.844，P0.05；r=0.861，P0.05）。 結(jié)論：活動(dòng)期UC患者中MMP-2，MMP-9水平高于健康對(duì)照組，同時(shí)存在腸黏膜通透性增高。MMP-2，MMP-9水平與腸黏膜通透性升高可能存在臨床關(guān)聯(lián)。 目的臨床研究發(fā)現(xiàn)UC患者存在腸黏膜通透性增高和MMP-2，-9水平改變現(xiàn)象，推測(cè)MMP-2，-9可能參與腸黏膜通透性改變的病理生理過程，參與UC腸黏膜損害的發(fā)病過程。因此，通過制備實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎動(dòng)物模型，進(jìn)一步探討MMP-2、MMP-9水平與腸黏膜通透性改變的關(guān)系。 方法采用復(fù)合法（三硝基苯磺酸+乙醇）制備結(jié)腸炎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組和模型組（TNBS+乙醇灌腸）。造模成功后，進(jìn)行結(jié)腸黏膜大體形態(tài)損傷評(píng)分(CMDI)；HE染色觀察大鼠結(jié)腸黏膜組織學(xué)改變，行結(jié)腸組織學(xué)損傷評(píng)分（HI）；酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)結(jié)腸勻漿MMP-2、MMP-9及TNF-α含量；制備小腸腸囊，采用Evans藍(lán)方法檢測(cè)小腸黏膜通透性。 結(jié)果與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠結(jié)腸大體形態(tài)學(xué)評(píng)分（CMDI）及組織損傷學(xué)評(píng)分（HI）明顯增高（P0.05）。模型組大鼠腸黏膜勻漿中MMP-2、MMP-9、TNF-α表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組MMP-2：(9.41±0.947vs1.17±0.893，P0.05)ng/ml；MMP-9：(13.79±1.357vs2.04±0.719，P0.05) ng/ml；TNF-α：（59.229±5.756vs15.363±2.851, P0.01）ng/L。TNBS模型組大鼠回腸組織中Evans藍(lán)較正常對(duì)照組含量明顯增高（607±10.387vs108.06±7.49，P0.05）。 結(jié)論實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜通透性增高，可能與MMP-2、MMP-9表達(dá)增高有關(guān)。
[Abstract]:Objective: the study shows that ulcerative colitis (UC) patients with intestinal permeability increased. At the same time, matrix metalloproteinase (MMPs) expression, MMPs participate in the process of inflammation and intestinal mucosal barrier function of intestinal injury in a certain extent, but not in UC patients correlated this is unclear. The experimental observation of MMP-2,9 in patients with UC levels and intestinal permeability of active phase change, MMP-2 of UC patients, the clinical relevance of -9 and intestinal mucosal permeability.
Methods: 38 patients with UC were collected from clinically diagnosed and 30 healthy volunteers (normal control group) in peripheral blood was detected by ELISA MMP-2, MMP-9 level, the clinical data of UC patients were also collected. By using high performance liquid chromatography (HPLC) method for detection of UC group and normal control group (oral administration of lactulose L) and mannitol (M) test solution in urine L/M ratio as intestinal permeability index.
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本文編號(hào)：1516946