本文關(guān)鍵詞： HBV NK細(xì)胞 IFN-γ　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年02期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的探討自然殺傷細(xì)胞(NK)在乙型肝炎病毒(HBV)清除過(guò)程中的作用機(jī)制。方法通過(guò)對(duì)成年小鼠高壓注射20μg p GEM4Z/HBV1.2質(zhì)粒建立HBV急性排斥小鼠模型,采用放射免疫試劑盒定量檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)(1、2、3、4、5周)小鼠血清中HBsAg、免疫組化檢測(cè)肝臟組織中HBc Ag來(lái)評(píng)估模型的建立。流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)照小鼠和HBV小鼠肝臟中NK細(xì)胞比例和絕對(duì)數(shù)量變化,進(jìn)一步分析兩種小鼠NK細(xì)胞活化情況和分泌干擾素(IFN)-γ的能力變化。通過(guò)肝臟組織切片HE染色以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)判斷小鼠肝臟損傷狀況。最后,通過(guò)PK136抗體清除小鼠NK細(xì)胞以及IFN-γ中和抗體進(jìn)一步證實(shí)NK細(xì)胞分泌的IFN-γ是否參與HBV的清除過(guò)程。結(jié)果小鼠高壓注射20μg p GEM4Z/HBV1.2質(zhì)粒后,第1周血清中HBsAg和肝臟組織中HBc Ag表達(dá)量都較高,但呈降低趨勢(shì),在4~5周后幾乎轉(zhuǎn)陰,很好地模擬了臨床上急性感染HBV的病例。與對(duì)照組相比,HBV小鼠肝臟中NK細(xì)胞比例和絕對(duì)數(shù)量明顯增高;進(jìn)一步研究顯示HBV小鼠NK細(xì)胞活化分子CD69表達(dá)也顯著上升,同時(shí)IFN-γ分泌增加。與此同時(shí),小鼠肝臟呈無(wú)損傷狀態(tài)。預(yù)先清除NK細(xì)胞或阻斷IFN-γ的功能能顯著增加HBV小鼠中相關(guān)抗原的含量,延緩HBV的排斥。結(jié)論在HBV急性排斥模型中,NK細(xì)胞通過(guò)分泌IFN-γ促進(jìn)HBV的清除。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of natural killer cells (NKK) in the clearance of hepatitis B virus (HBV). Methods the acute rejection model of HBV was established by injecting 20 渭 g GEM4Z/HBV1.2 plasmid into adult mice under high pressure. Radioimmunoassay kit was used to quantitatively detect HBsAg in serum of mice at different time points for 5 weeks. The model was evaluated by immunohistochemical detection of HBc Ag in liver tissue. Flow cytometry was used to analyze NK cells in the liver of control mice and HBV mice. Changes in proportion and absolute quantity, The activation of NK cells and the ability to secrete IFN- 緯 in two kinds of mice were further analyzed. Liver injury was judged by HE staining of liver sections and detection of glutamate-pyruvic transaminase. It was further confirmed whether IFN- 緯 secreted by NK cells was involved in the clearance of HBV by PK136 antibody scavenging and IFN- 緯 neutralizing antibody. Results 20 渭 g p GEM4Z/HBV1.2 plasmid was injected into mice under high pressure. In the first week, the expression of HBsAg in serum and HBc Ag in liver tissue were both high, but the expression of HBc Ag was decreasing, and almost turned negative after 45 weeks. Compared with the control group, the proportion and absolute number of NK cells in the liver of HBV mice were significantly increased, and further studies showed that the expression of NK cell activating molecule CD69 in HBV mice was also significantly increased. At the same time, the secretion of IFN- 緯 was increased. At the same time, the liver of mice showed no damage. Scavenging NK cells or blocking the function of IFN- 緯 could significantly increase the content of related antigens in HBV mice. Conclusion in the model of acute rejection of HBV, NK cells promote the clearance of HBV by secreting IFN- 緯.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫教研室;
【基金】：安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào):1208085MH134)
【分類(lèi)號(hào)】：R512.62

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