本文關(guān)鍵詞：乳源免疫調(diào)節(jié)肽對酒精誘導(dǎo)性肝細(xì)胞損傷干預(yù)機制　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： PGPIPN LO2 脂肪變性 線粒體受損 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

【摘要】：目的:1.觀察長期酒精刺激能否在體外誘導(dǎo)正常肝細(xì)胞株(LO2)產(chǎn)生脂肪變性、線粒體受損、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ESR)等病理變化。2.探索乳源免疫調(diào)節(jié)肽(PGPIPN)是否具有延緩酒精刺激肝細(xì)胞損傷的作用,并探索其可能的分子機制。方法1.構(gòu)建能穩(wěn)定遺傳的酒精刺激肝細(xì)胞損傷模型,MTT法篩選酒精和PGPIPN最佳用藥范圍,同時向正常LO2細(xì)胞加入酒精和不同濃度PGPIPN連續(xù)培養(yǎng)三個月。2.用油紅O染色觀察LO2脂肪變性程度。透射電鏡對比各實驗組線粒體、核仁等結(jié)構(gòu)。3.RT-PCR檢測脂肪合成基因(ACC)、線粒體受損相關(guān)基因(Cyt-C、Caspase-3)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因(GRP78和CHOP)的表達(dá)。4.Western Blotting檢測脂肪合成相關(guān)蛋白(ACC)、線粒體受損相關(guān)蛋白(Cyt C、Caspase-3)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白(GRP78、CHOP)的表達(dá)。結(jié)果1.MTT篩選0.5%為酒精造模濃度,1×10-4g/L、1×10-3g/L、1×10-2g/L為PGPIPN最佳用藥濃度,并用以上濃度造模成功。2.與正常肝細(xì)胞LO2相比,酒精用藥組油紅O染色出現(xiàn)明顯脂肪變性,甚至出現(xiàn)脂肪粒融合現(xiàn)象,電鏡則顯示線粒體嚴(yán)重膨脹變性,而PGPIPN用藥組可以緩解脂肪變性,線粒體膨脹變性。3.RT-PCR顯示PGPIPN組與酒精組比較:ACC、Cyt-C、Caspase-3、GRP78、CHOP m RNA表達(dá)明顯降低。4.Western Blotting顯示PGPIPN組與酒精組比較:ACC、Cyt-C、Caspase-3、GRP78、CHOP蛋白表達(dá)明顯降低。結(jié)論1.PGPIPN可放緩體外培養(yǎng)的LO2酒精誘導(dǎo)性脂肪病變,緩解LO2受損。2.機制可能是減少脂肪合成、減輕線粒體受損和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R575

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本文編號：1336840