本文關(guān)鍵詞：胸腺素β4對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護作用及其機制的研究

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【摘要】：研究目的:本課題旨在觀察胸腺素β4(Tβ4)對四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護作用,并初步探討其可能的作用機制。研究方法:將健康雄性Balb/c小鼠隨機分為正常對照組、CCl4模型組、低劑量Tβ4組(L-Tβ4組)和高劑量Tβ4組(H-Tβ4組)。采用40%CCl4橄欖油溶液1 ml/kg單次腹腔注射建立小鼠急性肝損傷模型,正常對照組腹腔注射橄欖油,1 h后低、高劑量Tβ4組分別腹腔注射3 mg/kg和10 mg/kg Tβ4溶液。于注射CCl4后2天和5天兩個不同時間點剖殺小鼠,下腔靜脈取血并留取肝左葉組織。檢測血清谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的水平,石蠟切片蘇木精伊紅(HE)染色檢測肝組織病理學改變,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測肝組織中抗氧化酶(SOD/CAT/GPx)、炎癥因子(TNF-α/IL-1β/MCP-1/IL-6)和凋亡相關(guān)基因(Bcl2/caspase-3)的轉(zhuǎn)錄水平,Western Blot技術(shù)檢測肝組織中α-SMA的蛋白表達水平,免疫熒光染色技術(shù)檢測肝組織中Col-I的蛋白表達水平。研究結(jié)果:1.低、高劑量Tβ4均能降低CCl4所致升高的血清ALT和AST水平,且高劑量Tβ4組的血清ALT水平低于低劑量Tβ4組(P0.05)。2.HE染色結(jié)果表明,低、高劑量Tβ4組與模型組相比,肝損傷表現(xiàn)得到顯著改善,且高劑量Tβ4組較低劑量Tβ4組、5天組較2天組效果更為明顯。3.qRT-PCR結(jié)果顯示,同正常對照組比較,CCl4模型組肝組織中抗氧化酶(SOD/CAT/GPx)mRNA水平明顯下降,炎癥因子(TNF-α/IL-1β/MCP-1/IL-6)和凋亡相關(guān)基因(抗凋亡基因Bcl2/促凋亡基因caspase-3)mRNA水平明顯提高(P0.05)。在2天時間點,低、高劑量Tβ4對抗氧化酶和Bcl2的轉(zhuǎn)錄水平具有上調(diào)作用趨勢,對炎癥因子和caspase-3的轉(zhuǎn)錄水平具有下調(diào)作用趨勢,且以高劑量Tβ4效果更為明顯,其中低劑量Tβ4組TNF-α、IL-1β和MCP-1,以及高劑量Tβ4組CAT、GPx、TNF-α、IL-1β、MCP-1、IL-6和caspase-3轉(zhuǎn)錄水平的改變具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在5天時間點,除IL-6的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)外,其余基因的轉(zhuǎn)錄水平在不同劑量組的變化趨勢與2天時間點相同,且變化幅度更大,其中低劑量Tβ4組CAT、TNF-α、IL-1β和MCP-1,以及高劑量Tβ4組SOD、CAT、GPx、TNF-α、IL-1β、MCP-1、IL-6和caspase-3轉(zhuǎn)錄水平的改變具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.Western Blot檢測結(jié)果顯示,與正常對照組相比,CCl4模型組的α-SMA蛋白表達水平明顯提高。低劑量Tβ4在兩個時間點均上調(diào)α-SMA蛋白表達水平,高劑量Tβ4對α-SMA蛋白表達無明顯影響。5.免疫熒光染色結(jié)果分別顯示,CCl4模型組的Col-I蛋白表達水平明顯提高。低劑量Tβ4在兩個時間點均上調(diào)Col-I蛋白表達水平,高劑量Tβ4對Col-I蛋白表達無明顯影響。研究結(jié)論:Tβ4可以通過提高抗氧化能力和控制炎癥反應(yīng),抑制肝細胞凋亡,從而減輕CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷,其保護作用呈劑量依賴性和時間依賴性。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R575
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本文編號：1265110