本文關(guān)鍵詞：從氧化應(yīng)激反應(yīng)研究血塞通對(duì)非酒精性脂肪肝的防治作用

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【摘要】：目的：復(fù)制非酒精脂肪肝大鼠模型。探析非酒精性脂肪肝與氧化應(yīng)激反應(yīng)關(guān)系；探討血塞通對(duì)非酒精性脂肪肝模型大鼠的防治作用。方法：1、動(dòng)物分組：將40只雄性清潔級(jí)SD大鼠稱(chēng)重,按照體重大小編號(hào),根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表將大鼠隨機(jī)分為4組,每組10只。即正常組10只、模型組10只、維生素C組10只、血塞通組10只。2、模型制備：正常組以普通飼料喂養(yǎng),其余三組以高脂飼料喂養(yǎng)(配方：88%普通飼料+10%豬油+2%膽固醇)。喂養(yǎng)從第1周開(kāi)始持續(xù)到第12周末結(jié)束。3、分組給藥：正常組和模型組均以0.9%生理鹽水進(jìn)行灌胃,維生素C組和血塞通組分別予以維生素C和血塞通灌胃。灌胃時(shí)間從第1周開(kāi)始至第12周末結(jié)束。4、指標(biāo)觀察：各組大鼠每周稱(chēng)重一次;12周末處死大鼠后,分別檢測(cè)各組大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肝組織總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。制作肝組織石蠟切片并進(jìn)行HE染色。采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定(ELISA法)檢測(cè)各組大鼠肝組織中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量；黃嘌呤氧化酶法測(cè)定各組大鼠肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)含量；實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative real-time-PCR)檢測(cè)各組大鼠肝組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子p1(TGF-β1)表達(dá)量。結(jié)果：1、正常組大鼠體重正常,毛色光亮,相對(duì)活潑。模型組大鼠體重增長(zhǎng)明顯,與正常組比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。2、肝組織HE染色：正常組肝細(xì)胞大小均勻,細(xì)胞核清晰呈圓形,肝索有規(guī)律的呈放射狀排列；模型組可見(jiàn)肝細(xì)胞內(nèi)有大量的脂肪空泡,胞漿疏松呈網(wǎng)狀,部分胞漿幾乎完全透明,肝索排列紊亂；血塞通組肝細(xì)胞中亦出現(xiàn)一定量的圓形脂滴空泡,但面積小于模型組。3、血清生化：與正常組比,模型組血清ALT、AST均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),并且肝組織TC、TG均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與模型組比,血塞通組血清ALT、AST均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)并且肝組織TC、TG均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4、肝組織中SOD活性含量：與正常組相比,模型組肝組織SOD活性含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與模型組比,血塞通組肝組織SOD活性含量升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)5、肝組織中ATP含量：與正常組相比較,模型組肝組織中ATP含量在顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)；與模型組比較,血塞通組肝組織中ATP含量顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。6、肝組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)mRNA水平相對(duì)表達(dá)量：與正常組比,模型組肝組織TGF-β1相對(duì)表達(dá)量顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)：與模型組比,血塞通組肝組織TGF-β1相對(duì)表達(dá)量顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論：1采用配方為88%普通飼料+10%豬油+2%膽固醇的高脂飼料可成功復(fù)制非酒精性脂肪肝大鼠模型。2非酒精性脂肪肝大鼠模型肝組織中SOD含量降低,表明在非酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展中存在氧化應(yīng)激反應(yīng)。3模型組肝組織中ATP含量降低,表明在非酒精性脂肪肝發(fā)生過(guò)程中出現(xiàn)線(xiàn)粒體損傷,而過(guò)量的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)會(huì)對(duì)線(xiàn)粒體造成損傷。血塞通組肝組織中ATP含量升高,表明血塞通可以改善氧化應(yīng)激對(duì)線(xiàn)粒體的損傷。4肝組織中TGF-β1相對(duì)表達(dá)量在非酒精性脂肪肝大鼠模型中有所增加,表明TGF-β1對(duì)肝細(xì)胞造成損傷的途徑可能是通過(guò)氧化應(yīng)激反應(yīng),此結(jié)果尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。5血塞通可減輕高脂飼料誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝模型大鼠脂肪變性程度,降低TGF-β1的表達(dá)量,同時(shí)改善氧化應(yīng)激及脂質(zhì)過(guò)氧化,對(duì)非酒精性脂肪肝起到防治作用。
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R575.5

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